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細胞周期與細胞凋亡檢測試劑盒說明書
南京森貝伽生物生產(chǎn)的細胞周期與細胞凋亡檢測試劑盒是一種采用經(jīng)典的碘化丙啶染色方法進行細胞周期與細胞凋亡分析的檢測試劑盒。
碘化丙啶(Propidium,簡稱PI)是一種雙鏈DNA的熒光染料。碘化丙啶和雙鏈DNA結合后可以產(chǎn)生熒光,并且熒光強度和雙鏈DNA的含量成正比。細胞內的DNA被碘化丙啶染色后,可以用流式細胞儀對細胞進行DNA含量測定,然后根據(jù)DNA含量的分布情況,可以進行細胞周期和細胞凋亡分析。
碘化丙啶染色后,假設G0/G1期細胞的熒光強度為1,那么含有雙份基因組DNA的G2/M期細胞的熒光強度的理論值為2,正在進行DNA復制的S期細胞的熒光強度為1-2之間。凋亡細胞由于細胞核發(fā)生濃縮以及發(fā)生DNA片段化(DNA fragmentation)導致部分基因組DNA片斷在染色過程中丟失,因此凋亡細胞碘化丙啶染色后呈現(xiàn)明顯的弱染,即熒光強度小于1,在流式檢測的熒光圖上出現(xiàn)所謂的sub-G1峰,即凋亡細胞峰。
細胞發(fā)生凋亡時,由于胞漿和染色質濃縮、核碎裂,產(chǎn)生凋亡小體,使細胞的光散射性質發(fā)生變化。在細胞凋亡的早期,細胞對前向角光散射的能力顯著降低,對側向光散射的能力增加或沒有變化。在細胞凋亡的晚期,前向和側向光散射的信號均降低。因此可通過流式細胞儀測定細胞光散射的變化觀察細胞凋亡情況。
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