試驗(yàn)原理：

IL-8試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知IL-8濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將IL-8和*標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中IL-8的濃度呈比例關(guān)系。

試劑盒內(nèi)容及其配制

試劑盒成份（2-8℃保存）

96孔配置

48孔配置

配制

96/48人份酶標(biāo)板

1塊板（96T）

半塊板（48T）

即用型

塑料膜板蓋

1塊

半塊

即用型

標(biāo)準(zhǔn)品：800pg/ml

1瓶（0.6ml）

1瓶（0.3ml）

按說明書進(jìn)行稀稀

空白對照

1瓶（1.0ml）

1瓶（0.5ml）

即用型

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液

1瓶（5ml）

1瓶（2.5ml）

即用型

*標(biāo)記的抗IL-8抗體

1瓶（6ml）

1瓶（3.0ml）

即用型

親和鏈酶素-HRP

1瓶（10ml）

1瓶（5.0ml）

即用型

洗滌緩沖液

1瓶（20ml）

1瓶（10ml）

按說明書進(jìn)行稀釋

底物A

1瓶（6.0ml）

1瓶（3.0ml）

即用型

底物B

1瓶（6.0ml）

1瓶（3.0ml）

即用型

終止液

1瓶（6.0ml）

1瓶（3.0ml）

即用型

自備材料

蒸餾水。
加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
振蕩器及磁力攪拌器等。

安全性

避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

操作注意事項(xiàng)

試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

樣品收集、處理及保存方法

血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

試劑的準(zhǔn)備

標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時準(zhǔn)備，不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行：

800 pg/ml

（6號標(biāo)準(zhǔn)品）

原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。

400 pg/ml

（5號標(biāo)準(zhǔn)品）

100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

200 pg/ml

（4號標(biāo)準(zhǔn)品）

100ul的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

100 pg/ml

（3號標(biāo)準(zhǔn)品）

100ul的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

50 pg/ml

（2號標(biāo)準(zhǔn)品）

100ul的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

25 pg/ml

（1號標(biāo)準(zhǔn)品）

100ul的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

0 pg/ml

（空白對照）

原始濃度不用稀釋直接加入50ul。

洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。

操作步驟

使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。
根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的*標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。
甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
在450nm波長處測定各孔的OD值。

建議使用的實(shí)驗(yàn)方案

標(biāo)準(zhǔn)品濃度（pg/ml）

A

800

800

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

B

400

400

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

C

200

200

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

D

100

100

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

E

50

50

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

F

25

25

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

G

0

0

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

H

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

局限

6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到的結(jié)果。

試劑盒性能

1. 靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。

2. 特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。

3. 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

結(jié) 果 判 斷 與 分 析

1、儀器值：于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值

2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的IL-8標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的IL-8含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。

3、檢測值范圍：0-800pg/ml

4、敏感度： 1.0 pg/ml

公司相關(guān)產(chǎn)品目錄：

小鼠凋亡相關(guān)因子（FAS/CD95）ELISA試劑盒 Mouse Factor-related Apoptosis,FAS ELISA試劑盒
小鼠Slit2 ELISA試劑盒  Mouse Slit2 ELISA試劑盒 
小鼠β淀粉樣蛋白1-42（Aβ1-42）ELISA試劑盒  Mouse amyloid beta peptide 1-42,Aβ1-42 ELISA試劑盒
小鼠8羥基脫氧鳥苷（8-OHdG）ELISA試劑盒  Mouse 8-Hydroxy-desoxyguanosine,8-OHdG ELISA試劑盒
小鼠白介素1受體拮抗劑（IL1Ra）ELISA試劑盒  Mouse Interleukin 1 receptor antagonist, IL-1ra ELISA試劑盒
小鼠降鈣素原（PCT）ELISA試劑盒  Mouse Procalcitonin,PCT ELISA試劑盒
小鼠胰島素自身抗體（IAA）ELISA試劑盒 Mouse insulin autoantibodies,IAA ELISA試劑盒
小鼠抗核膜糖蛋白210抗體（gp210）ELISA試劑盒  Mouse Anti-glucoprotein 210,GP210 ELISA試劑盒 
小鼠白介素7（IL-7）ELISA試劑盒  Mouse Interleukin-7,IL-7 ELISA試劑盒
小鼠褪黑素（MT）ELISA試劑盒  Mouse Melatonin,MT ELISA試劑盒
小鼠載脂蛋白H（Apo-H）ELISA試劑盒  Mouse Apolipoprotein H,Apo-H ELISA試劑盒
小鼠熱休克因子1（HSF1）ELISA試劑盒 Mouse Heat Shock Factor 1,HSF1 ELISA試劑盒
小鼠血小板因子3（PF-3）ELISA試劑盒  Mouse plaet factor 3, PF3 ELISA試劑盒
小鼠白介素2受體（IL-2R）ELISA試劑盒  Mouse Interleukin-2 receptor,IL-2R ELISA試劑盒
小鼠腎上腺髓質(zhì)素（ADM）ELISA試劑盒  Mouse adrenomedullin,ADM ELISA試劑盒
小鼠可溶性瘦素受體（sLR）ELISA試劑盒  Mouse Leptin Soluble Receptor,sLR ELISA試劑盒
小鼠β內(nèi)啡肽受體（β-EPR）ELISA試劑盒  Mouse Beta-Endorphin receptor,β-EPR ELISA試劑盒
小鼠肝脂酶（HL）ELISA試劑盒  Mouse hepatic lipase,HL ELISA試劑盒
小鼠乙型肝炎核心抗體（HBcAb）ELISA試劑盒  Mouse hepatitis B virus core antibody,HBcAb ELISA試劑盒
小鼠乙型肝炎e抗體（HBeAb）ELISA試劑盒  Mouse hepatitis B virus e antibody,HBeAb ELISA試劑盒
小鼠乙型肝炎e抗原（HBeAg）ELISA試劑盒  Mouse hepatitis B virus e antigen,HBeAg ELISA試劑盒
小鼠乙型肝炎表面抗體（HBsAb）ELISA試劑盒  Mouse hepatitis B virus surface antibody,HBsAb ELISA試劑盒
小鼠二胺氧化酶（DAO）ELISA試劑盒  Mouse diamine oxidase,DAO ELISA試劑盒
小鼠乙型肝炎表面抗原（HBsAg）ELISA試劑盒  Mouse hepatitis B virus surface antigen,HBsAg ELISA試劑盒
小鼠可溶性Endoglin（ENG/sCD105）ELISA試劑盒  Mouse Soluble Endoglin,ENG/sCD105 ELISA試劑盒 
小鼠活化蛋白C（APC）ELISA試劑盒  Mouse activated protein C,APC ELISA試劑盒
小鼠α葡萄糖苷酶（a-Glu）ELISA試劑盒  Mouse α-Glucosidase,a-Glu ELISA試劑盒
小鼠*（trypsin）ELISA試劑盒  Mouse trypsin ELISA試劑盒
Mouse trypsin ELISA試劑盒
小鼠破骨細(xì)胞分化因子（ODF）ELISA試劑盒  Mouse osteoclast differentiation factor,ODF ELISA試劑盒 
小鼠Toll樣受體9（TLR-9/CD289）ELISA試劑盒  Mouse Toll-like receptor 9,TLR-9 ELISA試劑盒 
小鼠鉤端螺旋體IgG（Lep IgG）ELISA試劑盒  Mouse Leptospira IgG,Lep IgG ELISA試劑盒 
小鼠生長激素釋放肽ghrelin（GHRP-Ghrelin）ELISA試劑盒  Mouse growth hormone releasing peptide-Ghrelin,GHRP-Ghrelin ELISA試劑盒 
小鼠內(nèi)臟脂肪特異性*蛋白酶抑制劑（vaspin）ELISA試劑盒  Mouse Visceral adipose-specific serine protease inhibitor,vaspin ELISA試劑盒 
小鼠溴脫氧核苷*（BrdU）ELISA試劑盒  Mouse Bromodeoxyuridine,BrdU ELISA試劑盒 
小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β2（TGFβ2）ELISA試劑盒  Mouse transforming growth factorβ2,TGFβ2 ELISA試劑盒
小鼠α1微球蛋白（α1-MG）ELISA試劑盒  Mouse α1-microglobulin,α1-MG ELISA試劑盒
小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4（MCP-4/CCL13）ELISA試劑盒  Mouse monocyte chemotactic protein 4,MCP-4 ELISA試劑盒
小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α（PPAR-α）ELISA試劑盒  Mouse peroxisome proliferators activator receptors alpha,PPAR-α ELISA試劑盒
小鼠載脂蛋白E（Apo-E）ELISA試劑盒  Mouse Apolipoprotein E,Apo-E ELISA試劑盒
小鼠網(wǎng)膜素（omentin）ELISA試劑盒  Mouse omentin ELISA試劑盒
兔子組織型纖溶酶原激活劑（t-PA）ELISA試劑盒 rabbit Tissue-type Plasiminogen Actilyse,t-PA ELISA試劑盒
小鼠孤腓肽（OFQ/N）ELISA試劑盒  Mouse orphanin FQ/nociceptin,OFQ/N ELISA試劑盒 
小鼠蛋白磷酸酶（PP）ELISA試劑盒  Mouse Protein Phosphatase,PP ELISA試劑盒
小鼠硫氧還蛋白還原酶（TrxR）ELISA試劑盒  Mouse thioredoxin reductase,TrxR ELISA試劑盒
小鼠硫氧化還原蛋白（Trx）ELISA試劑盒  Mouse Thioredoxin,Trx ELISA試劑盒 
小鼠膠原酶II（Collagenase II）ELISA試劑盒  Mouse Collagenase Type II ELISA試劑盒
小鼠膠原酶I（Collagenase I）ELISA試劑盒  Mouse Collagenase I ELISA試劑盒
小鼠磷酸化蛋白激酶C（P-PKC）ELISA試劑盒  Mouse phospho Protein Kinase C,P-PKC ELISA試劑盒
小鼠磷酸化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶（pERK）ELISA試劑盒  Mouse phospho-extracellular signal-regulated kinase,pERK ELISA試劑盒
小鼠鈣通道阻滯劑（CCB）ELISA試劑盒  Mouse calcium channel blockers,CCB ELISA試劑盒 
小鼠*轉(zhuǎn)氨酶/谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT/GPT）ELISA試劑盒  Mouse Alanine Aminotransferase,ALT/GPT ELISA試劑盒
小鼠骨形成蛋白（BMPs）ELISA試劑盒  Mouse bone morphogenetic proteins,BMPs ELISA試劑盒
小鼠*結(jié)合蛋白4（RBP-4）ELISA試劑盒  Mouse Retinol-binding protein 4,RBP-4 ELISA試劑盒
小鼠6酮前列腺素F1a（6-keto-PGF1a）ELISA試劑盒  Mouse 6-keto-prostaglandin F1a,6-K-PGF1a ELISA試劑盒
小鼠戊糖素（Pentosidine）ELISA試劑盒  Mouse Pentosidine ELISA試劑盒
小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物（AGEs）ELISA試劑盒 Mouse advanced glycation end products,AGEs ELISA試劑盒 
小鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白（NGAL）ELISA試劑盒  Mouse neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL ELISA試劑盒
小鼠幽門螺旋菌IgG（Hp-IgG）ELISA試劑盒  Mouse Helicobacter pylori IgG,Hp-IgG ELISA試劑盒
小鼠多巴胺D1受體（D1R）ELISA試劑盒  Mouse Dopamine D1 receptor,D1R ELISA試劑盒
小鼠腎上腺素能a1A受體（ADRA1A）ELISA試劑盒  Mouse adrenergic alpha-1A receptor,ADRA1A ELISA試劑盒
小鼠鈣結(jié)合蛋白（CR）ELISA試劑盒  Mouse Calretinin,CR ELISA試劑盒
小鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白（HABP）ELISA試劑盒  Mouse Hya]uronate binding protein,HABP ELISA試劑盒
小鼠嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A（CyPA）ELISA試劑盒  Mouse cyclophilin A,CyPA ELISA試劑盒 
小鼠骨形成蛋白6（BMP-6）ELISA試劑盒  Mouse Bone morphogenetic protein 6,BMP-6 ELISA試劑盒 
小鼠淋巴細(xì)胞因子ELISA試劑盒  Mouse lymphocyte factor ELISA試劑盒
小鼠抗利尿激素/血管加壓素/*加壓素（ADH/VP/AVP）ELISA試劑盒  Mouse antidiuretic hormone/vasopressin/arginine vasopressin,ADH/VP/AVP ELISA試劑盒
小鼠N-乙酰基-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-*（AcSDKP）ELISA試劑盒  Mouse N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKP ELISA試劑盒
小鼠抗血小板抗體IgG/M/A（PA-IgG/M/A）ELISA試劑盒  Mouse plaet antibodies IgG/M/A,PA-IgG/M/A ELISA試劑盒
小鼠纖連蛋白（FN）ELISA試劑盒 Mouse Fibronectin,FN ELISA試劑盒 
小鼠FMS樣*激酶3（Flt3）ELISA試劑盒  Mouse FMS-like tyrosine kinase 3,Flt3 ELISA試劑盒
小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1（IGFBP-1）ELISA試劑盒 Mouse Insulin-like growth factor binding protein 1,IGFBP-1 ELISA試劑盒 
小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2（IGFBP-2）ELISA試劑盒 Mouse Insulin-like growth factor binding protein 2,IGFBP-2 ELISA試劑盒 
小鼠白介素16（IL-16）ELISA試劑盒 Mouse Interleukin 16,IL-16 ELISA試劑盒
小鼠白介素3（IL-3）ELISA試劑盒 Mouse Interleukin 3,IL-3 ELISA試劑盒
小鼠白介素4（IL-4）ELISA試劑盒 Mouse Interleukin 4,IL-4 ELISA試劑盒 
小鼠白介素-5（IL-5）ELISA試劑盒 Mouse Interleukin 5,IL-5 ELISA試劑盒
大鼠P選擇素（P-Selectin/CD62P）ELISA試劑盒  Rat P-Selectin ELISA試劑盒
小鼠層連蛋白/板層素（LN）ELISA試劑盒 Mouse Laminin,LN ELISA試劑盒 
小鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子（M-CSF）ELISA試劑盒 Mouse Macrophage Colony-Stimulating Factor,M-CSF ELISA試劑盒 
小鼠巨噬細(xì)胞來源的趨化因子（MDC/CCL22）ELISA試劑盒 Mouse Macrophage-Derived Chemokine,MDC ELISA試劑盒 
小鼠正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子（RANTES/CCL5）ELISA試劑盒  Mouse regulated on activation in normal T-cell expressed and secreted,RANTES ELISA試劑盒 
小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白2（MIP-2）ELISA試劑盒 Mouse Macrophage Inflammatory Protein 2,MIP-2 ELISA試劑盒 
小鼠催產(chǎn)素（OT）ELISA試劑盒  Mouse oxytocin,OT ELISA試劑盒
7 Mouse macrophage inflammatory protein 3β,MIP-3β ELISA試劑盒 
小鼠Ⅰ型膠原N末端肽（NTX）ELISA試劑盒  Mouse cross linked N-opeptide of type Ⅰ collagen,NTX ELISA試劑盒
小鼠5核苷酸酶（5-NT）ELISA試劑盒 Mouse 5-Nucleotidase,5-NT ELISA試劑盒 
小鼠神經(jīng)生長因子（NGF）ELISA試劑盒 Mouse Nerve growth factor,NGF ELISA試劑盒