人3-羥基-3-甲基戊二酰*合酶1(HMGCS1)ELISA試劑盒 科研,需要說明書請(qǐng)工作人員
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結(jié)果計(jì)算:
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。
,臨床ELISA測(cè)定中可能會(huì)出現(xiàn)的問題及可能的原因
問 題 可能的原因(非試劑盒本身的原因)
1.弱陽性質(zhì)控樣本檢測(cè)不出 溫育的時(shí)間或溫度不夠;顯色反應(yīng)時(shí)間太短;所用配制緩沖液的蒸餾水有問題
2.測(cè)定的重復(fù)性差 (相同樣本兩次測(cè)定結(jié)果不*) 這是典型的由測(cè)定操作引起的問題,包括
(1)加樣本及試劑量不準(zhǔn);孔間不*;
(2)加樣過快,孔間發(fā)生污染;
(3)加錯(cuò)樣本;
(4)加樣本及試劑時(shí),加在孔壁上部非包被區(qū);
(5)不同批號(hào)試劑盒中組分混用;
(6)溫育時(shí)間、洗板、顯色時(shí)間不*;
(7)孔內(nèi)污染雜物;
(8)酶標(biāo)儀濾光片不正確;
(9)血清標(biāo)本未*凝固即加入,反應(yīng)孔內(nèi)出現(xiàn)纖維蛋白凝固或殘留血細(xì)胞,易出現(xiàn)假陽性反應(yīng)等。
3.白板
(陽性對(duì)照不顯色) (1)漏加酶結(jié)合物;
(2)洗板液配制中出現(xiàn)問題,如量筒不干凈,含酶抑制物(如疊氮鈉)等。
(3)漏加顯色劑A或B;
(4)終止劑當(dāng)顯色劑使用。
4.全部板孔均有顯色 (1)洗板不干凈;
(2)顯色液變質(zhì);
(3)加底物的吸光受酶污染;
(4)洗板液受酶等污染。
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