人5羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒 科研,需要說明書請工作人員
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結(jié)果計算:
以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。
,臨床ELISA測定中可能會出現(xiàn)的問題及可能的原因
問 題 可能的原因(非試劑盒本身的原因)
1.弱陽性質(zhì)控樣本檢測不出 溫育的時間或溫度不夠;顯色反應時間太短;所用配制緩沖液的蒸餾水有問題
2.測定的重復性差 (相同樣本兩次測定結(jié)果不*) 這是典型的由測定操作引起的問題,包括
(1)加樣本及試劑量不準;孔間不*;
(2)加樣過快,孔間發(fā)生污染;
(3)加錯樣本;
(4)加樣本及試劑時,加在孔壁上部非包被區(qū);
(5)不同批號試劑盒中組分混用;
(6)溫育時間、洗板、顯色時間不*;
(7)孔內(nèi)污染雜物;
(8)酶標儀濾光片不正確;
(9)血清標本未*凝固即加入,反應孔內(nèi)出現(xiàn)纖維蛋白凝固或殘留血細胞,易出現(xiàn)假陽性反應等。
3.白板
(陽性對照不顯色) (1)漏加酶結(jié)合物;
(2)洗板液配制中出現(xiàn)問題,如量筒不干凈,含酶抑制物(如疊氮鈉)等。
(3)漏加顯色劑A或B;
(4)終止劑當顯色劑使用。
4.全部板孔均有顯色 (1)洗板不干凈;
(2)顯色液變質(zhì);
(3)加底物的吸光受酶污染;
(4)洗板液受酶等污染。
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