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當前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>PCR檢測試劑盒>>熒光-PCR法>> 貓瘟病毒(FPV)核酸檢測試劑盒品牌
產(chǎn)品型號
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)代理商
所 在 地上海市
更新時間:2024-01-03 11:15:59瀏覽次數(shù):1183次
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一、樣品 RNA 的制備
、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆轉(zhuǎn)錄)反應合成 cDNA
. 按下表配制 RT 反應體系(20 μL 體系)
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),
反應終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應。
5. 70℃保溫 0 分鐘以終止反應,然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用,丌需要純化。產(chǎn)品名稱:貓瘟病毒(FPV)核酸檢測試劑盒品牌
規(guī)格:48T/盒
類別:熒光-PCR法
運輸:低溫、避光、快遞免費送貨上門。
用途:生化實驗,合成實驗等試驗。
運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存, 保存期限為 6 個月。
自備試劑:樣品 RNA。
性能指標:點擊了解更多熒光-PCR法。
.試劑盒檢測特異性為00%
2. 檢測試劑盒重現(xiàn)性為00%
3. 靈敏度可達到03/ml
4. 有效期為6個月
注意事項:
①加入試劑的順序應*,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 5-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至0kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.~umol或0~00pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。Fmoc-2-氨基異丁 瓶 Chang liver 低溫運輸和保存
2-苯基吲哚 瓶 CHL 低溫運輸和保存
吉西他濱 瓶 CHO-K 低溫運輸和保存
苯并噻吩 瓶 CHO 低溫運輸和保存
5-硝基水楊 瓶 CL87/CCL87 低溫運輸和保存
3,4,5-*氧苯乙 瓶 CNE-2Z 低溫運輸和保存
[,'-雙(二苯基膦)二茂鐵]二鈀二氯甲烷絡合物 瓶 CNE 低溫運輸和保存
2-氟甲苯 瓶 COC 低溫運輸和保存
2,3-二基酚 瓶 COLO205 低溫運輸和保存
BOC-D-絲氨酯 瓶 COLO320/DM 低溫運輸和保存
2,5-二羥基甲苯 瓶 COS- [COS] 低溫運輸和保存
3,4-二氯甲苯 瓶 COS-7 [COS7] 低溫運輸和保存
2,5-二基胺 瓶 COS-7 SV40 低溫運輸和保存
紅色KB/5-氯-2-基胺 瓶 CRFK 低溫運輸和保存
2-氯-5-基胺 瓶 CRT 低溫運輸和保存
貓瘟病毒(FPV)核酸檢測試劑盒品牌Mouse pituitary adenylate cyclase activating polypeptide,PACAP 小鼠垂體腺苷環(huán)化酶激活肽 進口/國產(chǎn)常溫,避光 規(guī)格:00mg
lymphocyte factor 人淋巴細胞因子 進口/國產(chǎn)常溫,避光 規(guī)格:00mg
TGF Beta2 (Rabbit transforming growth factor Beta2) 兔轉(zhuǎn)化生長因子β2 進口/國產(chǎn)常溫,避光 規(guī)格:00mg
NOS (Rabbit nitric oxide synthase) 兔一氧化氮合成酶 進口/國產(chǎn)常溫,避光 規(guī)格:00mg
Plant Vitamin A,VA 植物 進口/國產(chǎn)常溫,避光 規(guī)格:00mg
Mouse Angiotensin converting enzyme,ACE 小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶 進口/國產(chǎn)常溫,避光 規(guī)格:00mg
TARC/CCL7(thymus activation regulated chemokine) 人胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子 進口/國產(chǎn)常溫,避光 規(guī)格:00mg
PGR 大鼠孕酮受體 進口/國產(chǎn)常溫,避光 規(guī)格:00mg
Mouse angiotension II ,ANG- II 小鼠血管緊張素Ⅱ 進口/國產(chǎn)常溫,避光 規(guī)格:00mg
Plant Vitamin E,VE E 植物 進口/國產(chǎn)常溫,避光 規(guī)格:00mg
eNOS (Rabbit Endothelial nitric oxide synthase) 兔內(nèi)皮型一氧化氮合成酶 進口/國產(chǎn)2-8℃,避光 規(guī)格:300mg
NCAM-L/CD7(Neural cell adhesion molecule ligand ) 人神經(jīng)細胞粘附分子配體 進口/國產(chǎn)常溫,避光 規(guī)格:00mg
ACE II 大鼠血管緊張素Ⅱ轉(zhuǎn)化酶 進口/國產(chǎn)常溫,避光 規(guī)格:00mg
ACE I 大鼠血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶 進口/國產(chǎn)常溫,避光 規(guī)格:00mg
PLAUR/uPAR (Rabbit Urokinase-type Plasminogen Activator Receptor) 兔型纖溶酶原激活物受體 進口/國產(chǎn)常溫,避光 規(guī)格:50mg
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