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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2020-03-30 13:21:39瀏覽次數(shù):516次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 環(huán)保在線Barley Stripe Mosaic Virus(BSMV)大麥條紋花葉病毒RT-PCR試劑盒
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Botryosphaeria stevensii蘋果殼色單隔孢潰瘍病菌PCR試劑盒
Botrytis cinerea灰霉菌PCR試劑盒
Broad Bean Stain Virus(BBSV)蠶豆染色病毒RT-PCR試劑盒
性能指標(biāo):點(diǎn)擊了解更多PCR檢測(cè)試劑盒。
.試劑盒檢測(cè)特異性為00%
2. 檢測(cè)試劑盒重現(xiàn)性為00%
3. 靈敏度可達(dá)到03/ml
4. 有效期為6個(gè)月
產(chǎn)品名稱:豬腸道甲型科研PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)商
英文名稱:Swine Enteric Alphacoronavirus(SeACoV)PCR
規(guī)格:詳見說明書
類別:PCR檢測(cè)試劑盒
運(yùn)輸:低溫、避光、快遞免費(fèi)送貨上門。
用途:生化實(shí)驗(yàn),合成實(shí)驗(yàn)等試驗(yàn)。
運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,-20℃保存, 保存期限為 6 個(gè)月。
自備試劑:樣品 RNA。
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使用方法:
一、樣品 RNA 的制備
、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆轉(zhuǎn)錄)反應(yīng)合成 cDNA
. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系(20 μL 體系)
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴(yán)格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),
反應(yīng)終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應(yīng)。
5. 70℃保溫 0 分鐘以終止反應(yīng),然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用,丌需要純化。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)*,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 5-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至0kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.~umol或0~00pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。?POPSO Buffer,0.2M,pH8.5 英文名(EN):Anti-Horse IgG-HRP antibody produced i...CAS No.:Null規(guī)格(SP):0.2ML類別(Key):HRP酶標(biāo)抗體
Potassium Acetate Solution(乙酸鉀溶液),M 英文名(EN):Acetylthiocholine iodide (≥98%, TLC)CAS No.:866-5-5規(guī)格(SP):G類別(Key):通用試劑
Potassium Acetate Solution(乙酸鉀溶液),M,pH7.5 英文名(EN):Brij 72CAS No.:9005-00-9規(guī)格(SP):250G類別(Key):通用試劑
Potassium Acetate Solution(乙酸鉀溶液),20% 英文名(EN):Brij 58CAS No.:9004-95-9規(guī)格(SP):250G類別(Key):通用試劑
Potassium Acetate Solution(乙酸鉀溶液),3M 英文名(EN):TWEEN 60CAS No.:9005-67-8規(guī)格(SP):00ML類別(Key):通用試劑
Potassium Acetate Solution(乙酸鉀溶液),8M 英文名(EN):Brij 78CAS No.:9002-92-0規(guī)格(SP):250G類別(Key):通用試劑
Potassium Chloride Solution(溶液),M 英文名(EN):Kojic acid (≥99.0%, HPLC)CAS No.:50-30-4規(guī)格(SP):5G類別(Key):通用試劑
Potassium Chloride Solution(溶液),3M 英文名(EN):β-Cyclodextrin (≥98%,cell culture te...CAS No.:7585-39-9規(guī)格(SP):5G類別(Key):通用試劑
Potassium Chloride Solution(溶液),5M 英文名(EN):Chloral hydrate (purum, crystallized, ...CAS No.:302-7-0規(guī)格(SP):00G類別(Key):通用試劑
Potassium Phosphate Solution,0.2M, pH7.0 英文名(EN):2,6-Di-tert-butyl-4-methylphenol (≥99...CAS No.:28-37-0規(guī)格(SP):00G類別(Key):通用試劑
Potassium Phosphate Solution,0.2M, pH7.2 英文名(EN):Linoleic acid (≥99.0%)CAS No.:60-33-3規(guī)格(SP):G類別(Key):通用試劑
Potassium Phosphate Solution,0.2M, pH7.4. 英文名(EN):Linoleic acid (≥99.0%, cell culture t...CAS No.:60-33-3規(guī)格(SP):G類別(Key):通用試劑
Potassium Phosphate Solution,0.2M, pH7.5 英文名(EN):Curcumin (from Curcuma longa, ≥70%)CAS No.:458-37-7規(guī)格(SP):5G類別(Key):通用試劑
Potassium Phosphate Solution,0.2M, pH7.6 英文名(EN):D-(+)-Glucosamine hydrochloride (≥99%)CAS No.:66-84-2規(guī)格(SP):25G類別(Key):通用試劑
Potassium Phosphate Solution,0.2M, pH8.0 英文名(EN):Betaine (BioUltra, ≥99.0%)CAS No.:07-43-7規(guī)格(SP):50G類別(Key):通用試劑
Potassium Phosphate Solution,0.5M, pH7.0 英文名(EN):4-Aminopyridine (≥98%, powder)CAS No.:504-24-5規(guī)格(SP):5G類別(Key):通用試劑
Potassium Phosphate Solution,0.5M, pH7.2 英文名(EN):Urea Hydrogen Peroxide (97%)CAS No.:24-43-6規(guī)格(SP):25G類別(Key):通用試劑
Potassium Phosphate Solution,0.5M, pH7.4 英文名(EN):Sodium Bicarbonate (≥99.5%)CAS No.:44-55-8規(guī)格(SP):500G類別(Key):通用試劑
豬腸道甲型科研PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)商2′-脫氧尿苷-5′-單磷酸二鹽 規(guī)格:200mg Betaine Hydrochloride
2′-脫氧尿苷-5′-三磷酸三鹽 規(guī)格:00mg Ioxaglic Acid
2′-脫氧尿苷-5′-三磷酸四鹽 規(guī)格:200mg Chlorothiazide
5-溴-2-脫氧尿苷 規(guī)格:200mg Hydrochlorothiazide
5-溴尿苷 規(guī)格:50mg Ecamsule Related Compound A
5-溴-2-脫氧胞苷 規(guī)格:200mg Lindane
5--2-脫氧胞苷 規(guī)格:g Xylose
5--2-脫氧尿苷 規(guī)格:200mg Biotin
2′-溴脫氧尿苷 規(guī)格:500mg Butorphanol Tartrate CIV
阿糖腺苷 規(guī)格:200mg Methenamine Mandelate
阿糖胞苷 規(guī)格:200mg Cephalothin Sodium
阿糖尿苷 規(guī)格:300mg Cyclopentolate Hydrochloride
阿糖胸苷 規(guī)格:200mg Cefamandole Lithium
曲氟胸苷 規(guī)格:200mg Adenosine
鹽酸環(huán)胞苷 規(guī)格:200mg Maltitol
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