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上海勁馬實驗設(shè)備有限公司作者
DNA改組（DNA shuffling）是目前zui方便、有效的一種分子水平的體外定向進化技術(shù)，該技術(shù)同傾向錯誤PCR （Error-prone PCR） 相結(jié)合，通過對單基因或相關(guān)基因家族的靶序列進行多輪隨機誘變、重組和高通量的篩選，可以有效富集正突變，去除負突變，提高突變文庫的豐度，創(chuàng)造新基因和獲得期望功能的蛋白質(zhì)。來自湖南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院微生物分子生物學(xué)湖南省重點實驗室的研究人員對這一重要技術(shù)進行了總結(jié)和展望，并提出了DNA改組的創(chuàng)新，發(fā)展和改組過程中應(yīng)當(dāng)注意的問題。
DNA改組由由美國的Stemmer于1994年首先提出，經(jīng)后人的不斷創(chuàng)新和改進，現(xiàn)已發(fā)展成為比較完善的技術(shù)體系。作為一種高通量的突變和篩選技術(shù)，不僅可以實現(xiàn)基因序列的點突變，還可以實現(xiàn)其它突變技術(shù)不能實現(xiàn)的基因片段插入、缺失、倒轉(zhuǎn)和整合等，而且可以反復(fù)改組，實現(xiàn)突變的優(yōu)勢積累效應(yīng)。
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