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細胞活力鑒定——臺盼藍染色法

2010年07月31日 11:54:11人氣:2703來源:江萊生物-中國老牌試劑供應商

原理:
細胞損傷或死亡時,臺盼藍可穿透變性的細胞膜,與解體的DNA 結(jié)合,使其著色。而活細胞能阻止染料進入細胞內(nèi)。故可以鑒別死細胞與活細胞。

用品:
1. 4%
臺盼藍母液:稱取4g臺盼藍,加少量蒸餾水研磨,加雙蒸水至100ml,用濾紙過濾,4度保存。使用時。用PBS稀釋至0.4%
2.
吸管、*、顯微鏡

步驟:
1
、制備單細胞懸液。并作適當稀釋(106 細胞/ml
2
、染色:細胞懸液與0.4%臺盼藍溶液以9:1混合混勻。
3
、計數(shù):在三分鐘內(nèi),用計數(shù)板分別計數(shù)活細胞和死細胞

結(jié)果統(tǒng)計:
鏡下觀察,死細胞被染成淡藍色,而活細胞拒染。
根據(jù)下式求細胞活力:
活細胞率(%= 活細胞總數(shù)/(活細胞總數(shù)+死細胞總數(shù))×100

注意事項:臺盼藍染細胞時,時間不宜過長。否則,部分活細胞也會著色,會干擾計數(shù)。

 

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