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GE-200液相色譜儀在飼料中*的含量測定應(yīng)用

2012年03月30日 14:10:03人氣:1614來源:杭州賽析科技有限公司銷售部

 

GE-200液相色譜儀在飼料中*的含量測定應(yīng)用
本標(biāo)準(zhǔn)適用于混合飼料、濃縮飼料和預(yù)混合飼料中*的測定。本標(biāo)準(zhǔn)測定量限(LOQ)為每千克飼料中*2mg。
 GB/T 6682 分析實(shí)驗(yàn)用水規(guī)則和實(shí)驗(yàn)方法
 
儀器設(shè)備
GE-200二元高壓液相色譜儀,配梯度洗脫SCL-501系統(tǒng)控制器,GE-200液相色譜儀,N2010色譜工作站
色譜柱:Vertex 苯基柱4.6*250,5um
分析天平:感量0.0001g
天平:感量0.01g
振蕩器
玻璃具塞三角瓶:250ml
微孔濾膜:孔徑0.45um
 
試劑和溶液
水應(yīng)符合GB/T 6682三級水的規(guī)定
乙腈:色譜純,磷酸:85%,二丁胺,磷酸二氫鉀,*
1mol/L磷酸二丁胺緩沖液(DBAP):在700ml水中加入168ml二丁胺,然后緩慢加入約70ml磷酸,震蕩使二丁胺溶解,冷卻至室溫。調(diào)節(jié)PH至2.5-5.6(以每次1-2ml的速度加入18ml磷酸)。轉(zhuǎn)移至量瓶中,加水至1000Ml,過濾,備用。
PH6.0磷酸緩沖液:取136g磷酸二氫鉀、69g*至900ml水中,用磷酸調(diào)節(jié)PH至6.0±0.2,轉(zhuǎn)移至量瓶中,加水至1000ml
提取液:取200ml乙腈、25mlDBAP,25ml磷酸緩沖液,加水至1000ml
流動相A:乙腈
流動相B:PH2.4-3.0的水(用磷酸調(diào)節(jié)、過濾)
流動相C:0.02ml/L DBAP溶液。取20ml 1mol/L DBAP溶液,加水至1000ml,過濾即得
*標(biāo)準(zhǔn)溶液:將*對照品在在60℃減壓干燥3H,稱取400mg(到0.0001g),置于100mL棕色容量瓶中,用乙腈溶液、定容,配置成4000ug/ml的貯備液,避光保存。
*標(biāo)準(zhǔn)中間液:準(zhǔn)確吸取6.25ml標(biāo)準(zhǔn)貯備液于50ml棕色容量瓶中,用提取液稀釋、定容、賠償成濃度500ug/ml的標(biāo)準(zhǔn)中間液。
*標(biāo)準(zhǔn)工作液:準(zhǔn)確吸取一定量的標(biāo)準(zhǔn)中間液于棕色容量瓶中,用提取液稀釋、定容至濃度為5、20、40、60、80ug/ml的標(biāo)準(zhǔn)工作液
 
試樣制備
取有代表性的樣品至少500g,用四分法縮減至約200g,粉碎通過1mm孔徑篩,混勻,貯于磨口瓶中備用
 
分析步奏
稱取試樣2g-10g(至0.01g)于玻璃具塞三角瓶中,準(zhǔn)確加入100ml提取液,振蕩器上震蕩60Min(震蕩速度200r/min)。用濾紙過濾,棄初濾液,收集部分濾液,用微孔濾膜過濾,濾液供液相色譜分析。
 
HPLC色譜條件
色譜柱:Vertex 苯基柱4.6*250,5um
檢測波長:280nm
流動相流速:1.5ml/min
進(jìn)樣體積:20uL
流動相:A、B、C,梯度見下表:
時間(min)     A%          B%            C%
0.0             50           50              0
3.0             50           50              0
4.0             15           85              0
5.0             15           0               85
25.0            25           0               75
25.1            50           50              0 
30.0            50           50              0
定量測定
測定標(biāo)準(zhǔn)工作液和試樣溶液中*峰面積的響應(yīng)值,用單點(diǎn)或多點(diǎn)校準(zhǔn)法定量
 
 
 
 
 
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