48T人一氧化氮合成酶ELISA 檢測試劑盒

【資料簡介】

人一氧化氮合成酶ELISA 檢測試劑盒　　　　　　　　　　

本試劑僅供研究使用      標本：細胞上清液

試驗原理：
　　　　NOS試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知NOS濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將NOS和*標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中NOS的濃度呈比例關(guān)系。

自備材料
蒸餾水。
加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
振蕩器及磁力攪拌器等。

安全性
避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

人一氧化氮合成酶ELISA 檢測試劑盒

操作注意事項
試劑應(yīng)按標簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄，不可保存。
實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

樣品收集、處理及保存方法
血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液
保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。

人一氧化氮合成酶ELISA 檢測試劑盒

操作步驟
使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。
根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的*標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。
甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
在450nm波長處測定各孔的OD值。

局限
6號標準品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標準曲線無法得到的結(jié)果。

試劑盒性能
1. 靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性：不與其它細胞因子反應(yīng)。
3. 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

人一氧化氮合成酶ELISA 檢測試劑盒

結(jié) 果 判 斷 與 分 析
1、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應(yīng)的NOS標準品濃度為橫坐標（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的NOS含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應(yīng)的濃度。

3、檢測值范圍：0-4000pg/ml

4、敏感度： 1.0 pg/ml
4-Methylumbelliferyl N-acetyl-β-D-galactosaminide 4-甲基傘形酯-N-乙酰-b-D-氨基半乳糖苷
6-Methyluracil 6-甲基*
Methyl violet 2 B 龍膽紫
Metol 米吐爾
Metribuzin 嗪草酮
Metronidazole *
Metronidazole *
Miconazole nitrate 硝酸*
Miconazole nitrate 硝酸*
Minocyclin hydrochloride 米諾環(huán)素鹽酸鹽
Minocyclin hydrochloride 米諾環(huán)素鹽酸鹽
Mithramycin A 光神霉素
Mithramycin A 光神霉素
NADP 氧化型輔酶 II
Molecular sieves 3A 分子篩（3A） 球狀, 鉀-A型分子篩
Molecular sieves 4A 分子篩（4A） 球狀 鈉-A型分子篩
Molecular sieves 分子篩（） 球狀鈣-型分子篩
Molecular sieves 13X 分子篩（13X） 球狀鈉-X型分子篩
Molybdenium powder 鉬粉
Molybdic acid 鉬酸
Molybdic acid, sodium salt dihydrate 鉬酸鈉二水
Molybdic acid, sodium salt dihydrate 鉬酸鈉二水
Molybdic acid, sodium salt dihydrate 鉬酸鈉二水
α-Naphtholbenzein α-苯甲醇萘
Naphthol green B 萘酚綠B
1-Naphtholphthalein 1-萘*
Molybdic acid, sodium salt dihydrate 鉬酸鈉二水
Molybdic acid, sodium salt dihydrate 鉬酸鈉二水
Molybdic acid, sodium salt dihydrate 鉬酸鈉二水
Molybdic oxide 三氧化鉬
Molybdic oxide 三氧化鉬
Molybdenium（IV） sulfide 二硫化鉬
Monensin, sodium salt 莫能菌酸鈉
Monensin, sodium salt 莫能菌酸鈉
MOPS, free acid 3-（N-*啉） 丙磺酸
MOPS, free acid 3-（N-*啉） 丙磺酸
MOPS, free acid 3-（N-*啉） 丙磺酸
MOPS, free acid 3-（N-*啉） 丙磺酸
MOPS, sodium salt 3-（N-*啉） 丙磺酸鈉鹽
Oxalyldihydrazide 草酰肼
Oxiracetam *
Palladium 鈀粉
MOPS, sodium salt 3-（N-*啉） 丙磺酸鈉鹽
MOPS, sodium salt 3-（N-*啉） 丙磺酸鈉鹽
MOPS, sodium salt 3-（N-*啉） 丙磺酸鈉鹽
MOPS, sodium salt 3-（N-*啉） 丙磺酸鈉鹽
MOPSO, free acid 3-（N-*啉）-2-羥基丙磺酸
MOPSO, free acid 3-（N-*啉）-2-羥基丙磺酸
MOPSO, free acid 3-（N-*啉）-2-羥基丙磺酸
MOPSO, free acid 3-（N-*啉）-2-羥基丙磺酸
MOPSO, sodium salt 3-（N-*啉）-2-羥基丙磺酸鈉鹽
MOPSO, sodium salt 3-（N-*啉）-2-羥基丙磺酸鈉鹽
MOPSO, sodium salt 3-（N-*啉）-2-羥基丙磺酸鈉鹽
MOPSO, sodium salt 3-（N-*啉）-2-羥基丙磺酸鈉鹽
Moroxydine hydrochloride *
Morpholine *啉
3-Morpholinopropylamine N-氨丙基嗎啉
Mucin from Bovine Submaxillary Gland 粘蛋白
Mucin from Bovine Submaxillary Gland 粘蛋白
MUG 4-甲基傘型酮-beta-D-葡糖苷酸
MUG 4-甲基傘型酮-beta-D-葡糖苷酸
MU-Gal 4-甲基傘形酮酰-beta-D-吡喃糖苷
MU-Gal 4-甲基傘形酮酰-beta-D-吡喃糖苷
MU-alpha-GAL 4-甲基傘形酮酰-alpha-D-吡喃糖苷
MU-GLU 4-甲基傘形酮酰-Β-D-吡喃葡糖酸苷
NDSB 201 吡啶丙烷磺酸內(nèi)鹽
New coccine 酸性紅18
Nicarbazin 尼卡巴嗪
MUP, disodium salt, trihydrate 4-甲基傘花基磷酸鈉 三水
MUP, disodium salt, trihydrate 4-甲基傘花基磷酸鈉 三水
Mutarotase from Pig Kidney 變旋酶,
Papain 木瓜蛋白酶
Mutarotase from Pig Kidney 變旋酶,
Mutarotase from Pig Kidney 變旋酶,
Mycophenolic acid 霉酚酸
Mycophenolic acid 霉酚酸
Mycophenolic acid 霉酚酸
Myriocin from Mycelia sterilia 子囊霉素
NADH disodium salt, trihydrate, reduced 還原型輔酶 I （鈉鹽）
NADH disodium salt, trihydrate, reduced 還原型輔酶 I （鈉鹽）
Naftopidil hydrochloride hydrate *
Nalidixic acid 萘啶酮酸
Naphazoline hydrochloride *（鼻眼凈）
1-Naphthaldehyde 1-萘甲醛
2-Naphthaldehyde 2-萘甲醛
Naphthalene 萘
1-Naphthaleneacetic acid 1-萘乙酸
1-Naphthaleneacetic acid 1-萘乙酸
1-Naphthaleneacetic acid sodium salt 1-萘乙酸鈉
2-Naphthaleneacetic acid 2-萘乙酸
1-Naphthaleneacetic acid potassium salt 1-萘乙酸鉀
1-Naphthaleneacetic acid potassium salt 1-萘乙酸鉀
Naphthalene-1,5-disulfonic acid tetrahydrate 1,5-萘二磺酸四水
Naphthalene-1,5-disulfonic acid disodium salt 1,5-萘二磺酸二鈉鹽
Naphthalene-2,6-disulfonic acid disodium salt 2,6-萘二磺酸二鈉鹽
1-Naphthalene ethanol 1-萘乙醇
2-Naphthalene ethanol 2-萘乙醇
1-Naphthalenesulfonic acid 1-萘磺酸
1-Naphthoic acid 1-萘甲酸 （ alpha-萘甲酸）
2-Naphthoic acid 2-萘甲酸
1-Naphthol 1-萘酚
1-Naphthol 1-萘酚
2-Naphthol 2-萘酚
2-Naphthol 2-萘酚
Naphthol AS acetate 色酚AS醋酸鹽