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人抑制素A(INH-A)ELISA試劑盒詳細(xì)信息

2013年06月19日 20:49:36人氣:412來(lái)源:卡邁舒(上海)生物科技有限公司

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【資料簡(jiǎn)介】

 產(chǎn)品名稱(chēng): 人抑制素A(INH-A)ELISA Kit 

產(chǎn)品英文: Human Inhibin,INH-A ELISA Kit 
產(chǎn)品規(guī)格: 48T/96T 
產(chǎn)品類(lèi)別: 人激素類(lèi)ELISA試劑盒[Human hormone ELISA Kit]

人抑制素A(INH-A)ELISA快速檢測(cè)試劑盒
使用說(shuō)明書(shū)
本試劑盒僅供研究使用

預(yù)期應(yīng)用:ELISA法定量測(cè)定人血清,血漿及其它相關(guān)生物液體中INH-A含量。
說(shuō)明 
1. 濃洗滌液低溫保存會(huì)有鹽析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。 
2. 剛開(kāi)啟的酶聯(lián)板孔中可能會(huì)含有少許水樣物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象,不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。
實(shí)驗(yàn)原理
采用競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫法法檢測(cè)INH-A含量。首先用一株單抗體包被微孔板,制備成固相抗體,然后加入待測(cè)標(biāo)本及辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的另一株單抗,使之形成包被抗體-INH-A-酶標(biāo)記抗體的復(fù)合物。經(jīng)顯色后在酶標(biāo)儀測(cè)定吸光值(OD值),通過(guò)計(jì)算機(jī)或作圖擬合濃度-吸光度曲線(xiàn),反算出待測(cè)標(biāo)本中INH-A含量。
試劑盒組成及試劑配制 
1. 酶聯(lián)板(Assay plate ):                                   一塊(96孔)。 
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):                                    5瓶(凍干品)。
標(biāo)準(zhǔn)品濃度分別為:
Standard 1 Standard 2 Standard 3 Standard 4 Standard 5
0.625ng/ml 2.5 ng/ml 10ng/ml 40ng/ml 160ng/ml
3. 酶結(jié)合物(HRP-conjugate):                              1×6ml/瓶。
4. 抗體(Antibody)                                         1×6ml/瓶。
5. 顯色劑A(Substrate A):                                   1×7ml/瓶。
6. 顯色劑B(Substrate B):                                   1×7ml/瓶。
7. 濃洗滌液(Wash Buffer):    1×15ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋20倍。 
8. 終止液(Stop Solution):                                   1×7ml/瓶
需要而未提供的試劑和器材
1. 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀
2. 高速離心機(jī)
3. 電熱恒溫培養(yǎng)箱
4. 干凈的試管和Eppendof管
5. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測(cè)樣品較多時(shí),用多通道移液器
6. 蒸餾水,容量瓶等
標(biāo)本的采集及保存
1. 血清:全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注:以上標(biāo)本置4℃保存應(yīng)小于1周,-20℃或-80℃均應(yīng)密封保存,-20℃不應(yīng)超過(guò)1個(gè)月,-80℃不應(yīng)超過(guò)2個(gè)月;標(biāo)本溶血會(huì)影響zui后檢測(cè)結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。
操作步驟
1. 將各種試劑至室溫〔18-25℃〕平衡半小時(shí),取濃縮洗滌液,根據(jù)當(dāng)批檢測(cè)數(shù)量,用蒸餾水上1:20稀釋?zhuān)靹蚝髠溆谩?br />2. 將酶標(biāo)板取出,設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔、不加任何液體;每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)依次各設(shè)兩孔,每孔加入相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)品50ul;其余每個(gè)檢測(cè)孔直接加待測(cè)標(biāo)本50ul。 
3. 每孔加入酶結(jié)合物50ul(空白對(duì)照孔除外),再按同樣的順序加入抗體50ul,充分混勻,貼上不干膠封片,置37℃溫育1小時(shí)。
4. 手工洗板,棄去孔內(nèi)液體。洗滌液注滿(mǎn)各孔,靜置10秒甩干,重復(fù)三次后拍干;洗板機(jī)洗板,選擇洗滌三次程序,洗板后拍干。
5. 每孔加顯色劑A液50μl,顯色劑B液50μl,振蕩混勻后,37℃避光顯色15分鐘,每孔加終止液50μl。
6. 用酶標(biāo)儀讀數(shù),取波長(zhǎng)450nm,先用空白孔調(diào)零點(diǎn),然后測(cè)定各孔OD值。
數(shù)據(jù)處理
1. 手工作圖:用雙對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫軸,以對(duì)應(yīng)的0D值為縱軸,畫(huà)出平滑曲線(xiàn)或直線(xiàn),在曲線(xiàn)上按照待測(cè)血清OD值找到對(duì)應(yīng)的濃度值。
2. 計(jì)算機(jī):使用線(xiàn)性擬合功能,應(yīng)將標(biāo)準(zhǔn)品S1-S5的濃度取對(duì)數(shù)(Log(濃度))作為X,將對(duì)應(yīng)的OD值減去空白對(duì)照孔OD值后取對(duì)數(shù)(Log(OD值-NSB))作為Y,進(jìn)行線(xiàn)性擬合。再?gòu)臄M合線(xiàn)上計(jì)算出待測(cè)血清濃度。
注意事項(xiàng)
1. 從冷藏環(huán)境中取出的試劑盒內(nèi)全部瓶裝試劑及所需預(yù)包被板條應(yīng)置室溫
(18-25℃)平衡30分鐘后方可使用,余者應(yīng)及時(shí)封好口,放回2-8℃中避光保存,以備后用。
2. 使用前試劑應(yīng)搖勻。
3. 結(jié)果判斷須在反應(yīng)終止后10分鐘內(nèi)完成。
4. 不同批號(hào)的試劑不可混用。
5. 加樣時(shí)應(yīng)注意避免所用各試劑及樣品之間的交又污染。
6. 操作時(shí),試劑盒內(nèi)每種試劑各使用一個(gè)吸頭,每一種標(biāo)準(zhǔn)品使用一個(gè)吸頭,每一個(gè)樣品各使用一個(gè)吸頭,吸頭一次性使用。

特異性:本試劑盒可同時(shí)檢測(cè)天然或重組的INH-A,且與其他相關(guān)蛋白基本無(wú)交叉反應(yīng)。
有效期:6個(gè)月(2-8℃避光保存)

我司主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷(xiāo)售。并代理銷(xiāo)售 R&D 、 Sigma  Amresco 、 Oxoid、 Gibco  Pharmacia 、Rapidbio 、 GIBCO 等多個(gè)國(guó)外,致力于為廣大高校、科研院所和企事業(yè)單位提供*的科研試劑和完善的技術(shù)服務(wù),滿(mǎn)足生物化學(xué)、分子生物學(xué) 、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)等生物科技實(shí)驗(yàn)需求。

卡邁舒(上海)生物科技有限公司作者

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