沉淀型單組分TMB底物溶液說(shuō)明書(shū)

【資料簡(jiǎn)介】

沉淀型單組分TMB底物溶液
Cat.NO.: ZD312

2-8 C保存, 保質(zhì)期一年.

包裝單位100mL
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
    TMB（四甲基聯(lián)苯胺；3，3’，5，5’-Tetramethylbenzid過(guò)氧化物酶（HRP）的靈敏顯色底物之一。
 我公司研究開(kāi)發(fā)的沉淀型單組份TMB顯色底物液，適用于檢測(cè)膜上蛋白質(zhì)的免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示。
本產(chǎn)品主要由TMB和優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液組成。免疫反應(yīng)固定的HRP可催化本產(chǎn)品形成不溶性的藍(lán)色絡(luò)合物，并沉淀結(jié)合在膜上，顯示目的蛋白的位置及表達(dá)量。
適用范圍:
Western Blot
 其它通過(guò)沉淀反應(yīng)檢測(cè)HRP的應(yīng)用
主要成分：
1.       TMB
2.       H2O2及特殊的穩(wěn)定劑
3.       導(dǎo)致TMB反應(yīng)產(chǎn)物沉淀的特制化合物
產(chǎn)品使用說(shuō)明:
本說(shuō)明書(shū)是沉淀型單組分TMB底物溶液的一般使用說(shuō)明，每個(gè)系統(tǒng)根據(jù)經(jīng)驗(yàn)來(lái)優(yōu)化。
注意：
1、顯色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能導(dǎo)致底物沉淀從膜上脫落或背景加深。
2、顏色變化的快慢很大程度上取決于蛋白量、抗體使用量以及所使用的封閉液種類(lèi)等。
一 客戶自備溶液
    PBS-T：PBS中含0.05%的Tween-20。
    Western Blot膜封閉液：莊盟公司推出的目錄號(hào)ZS403或其他封閉液。
    以合適的稀釋比率稀釋在封閉液中的一抗。每個(gè)系統(tǒng)一抗的*稀釋比率根據(jù)經(jīng)驗(yàn)來(lái)決定。
    以合適的稀釋比率稀釋在封閉液中的HRP標(biāo)記的二抗。每個(gè)系統(tǒng)二抗的*稀釋比率根據(jù)經(jīng)驗(yàn)來(lái)決定。
二 操作步驟
1.         將膜從轉(zhuǎn)膜系統(tǒng)中取出后在封閉液中室溫?fù)u動(dòng)封閉30~60分鐘。
2.         加一抗室溫?fù)u動(dòng)孵育1~2小時(shí)。
3.         用PBS-T洗膜三次，再用PBS洗滌一次。
4.         加HRP標(biāo)記的二抗室溫?fù)u動(dòng)孵育1小時(shí)。
5.         用PBS-T洗膜三次，再用PBS洗滌一次。
6.         將膜浸入沉淀型單組分TMB底物溶液中，反應(yīng)2－30分鐘（根據(jù)顏色變化
            掌握染色時(shí)間）。
7.         顯色完成后，用蒸餾水沖洗可終止顯色反應(yīng)。