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TE緩沖溶液說(shuō)使用方法說(shuō)明書(shū)
2013-11-26 閱讀(1213)
TE緩沖溶液一個(gè)三和EDTA的配置,主要用于溶解DNA,可以儲(chǔ)存DNA。
TE緩沖液是通過(guò)加入少量的酸或堿溶液中pH的電阻變化。在正常的pH值的pH緩沖系統(tǒng)維持生物的價(jià)值,在正常的生理環(huán)境中起著重要的作用。大多數(shù)的細(xì)胞只能在一個(gè)狹窄的pH范圍內(nèi)運(yùn)行But also need to have a buffer system certain anti pH changes occur in the metabolic process。在生物體中有三種主要的pH緩沖體系,它們是蛋白質(zhì)、重碳酸鹽緩沖體系和磷酸鹽緩沖體系。每種緩沖體系所占的分量在各類細(xì)胞和器官中是不同的。
生物化學(xué)研究工作,經(jīng)常被用來(lái)維持的溶液體系的pH值變化的研究工作pH緩沖溶液往往直接影響我們的工作。如果提取酶實(shí)驗(yàn)體系的pH值變化或變化過(guò)大,會(huì)使酶活性下降甚至*失活。所以我們要學(xué)會(huì)配制緩沖溶液。
生化實(shí)驗(yàn)室常常用的緩沖系主要有磷酸、檸檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tris(三羥甲基氨基甲烷)等系統(tǒng)
在生化實(shí)驗(yàn)或研究工作中要慎重地選擇緩沖體系,因?yàn)橛袝r(shí)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素并不是緩沖液的pH值,而是緩沖液中的某種離子。 Such as borate, citrate, phosphate and three hydroxy methyl methane buffer may produce unwanted reaction。硼酸鹽:硼酸鹽與許多化合物形成復(fù)鹽、如蔗糖。
檸檬酸鹽:檸檬酸鈣離子結(jié)合容易,所以沒(méi)有鈣的使用案例。磷酸鹽:在一些實(shí)驗(yàn),它是酶抑制劑或代謝物,在磷酸鹽的形式從溶液中重金屬的沉淀。但這是在pH7.5緩沖容量很小。
三羥甲基氨基甲烷:它可以和重金屬一起作用,但在有些系統(tǒng)中也起抑止的作用。其主要缺點(diǎn)時(shí)溫度效應(yīng)。這點(diǎn)往往被忽視,在室溫pH是7.8的Tris一緩沖液,在4℃時(shí)是8.4,在37℃時(shí)是7.4,因此,4℃配制的緩沖液拿到37℃測(cè)量時(shí),其氫離子濃度就增加了10倍。而且它在pH7.5以下,緩沖能力差。