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微生物檢測應用：李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基
2017-12-26 閱讀(1045)
李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基在微生物檢測中，常用于用于分離和初步鑒別單增李斯特氏菌和其它李斯特菌。
【檢驗原理】
蛋白胨、胰酪胨提供氮源和碳源；氯化鈉維持滲透壓；瓊脂是培養(yǎng)基凝固劑；抑制劑和配套試劑B可抑制其它雜菌的生長；色素和配套試劑A可使單增李斯特氏菌形成藍綠色規(guī)測光滑的小菌落，周圍有乳白色脂肪沉淀環(huán)。
【李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基配方成分】
【使用方法】
平板凝膠培養(yǎng)基使用：待檢樣品按照相應的標準（GB、SN、FDA等）進行處理后，取適量樣品液接種于該培養(yǎng)基上，于36±1℃培養(yǎng)18～24 h，觀察結果，挑取典型可疑菌落進行鑒定。
脫水干粉培養(yǎng)基使用：首先、稱取本品干粉7.11g，用95mL蒸餾水或去離子水溶解，攪拌加熱煮沸至*溶解，121℃高壓蒸汽滅菌15min；另外，稱取配套試劑A(SR0470)0.2g加入4ml蒸餾水或去離子水中，充分混勻成均一乳白色溶液(可借用磁力攪拌器或渦漩混合器) 121℃高壓蒸汽滅菌15min，之后冷至約50℃?zhèn)溆?。接著，?支配套試劑B(SR0470)分別加入1mL無菌水，使之*溶解。zui后，將配套試劑A和B加入到約50℃基礎培養(yǎng)基中，充分混勻后傾注無菌平皿，制成平板培養(yǎng)基備用。（注：配套試劑A在傾注平板前應與基礎和配套試劑B充分混勻，否則會影響菌落特征觀察。）
瓶裝凝膠培養(yǎng)基使用：將1瓶裝凝膠培養(yǎng)基置于100℃水浴中加熱至*溶解后冷卻至50℃?zhèn)溆?。?支配套試劑B(SR0470)加入1mL無菌水，使之*溶解。將1瓶配套試劑A（4ml/瓶）和1支配套試劑B加入到約50℃的基礎培養(yǎng)基中，充分混勻后備用。（注：配套試劑A在傾注平板前應與基礎和配套試劑B充分混勻，否則會影響菌落特征觀察。）
【質量控制】
1. 外觀方面
脫水干粉培養(yǎng)基：淡黃色粉末； 配套試劑A：黃色粉末（或乳白色溶液）；配套試劑B：白色凍干粉。
平板凝膠/瓶裝凝膠培養(yǎng)基：淡黃色凝膠。
2. 生物學方面
下列質控菌株接種待測試培養(yǎng)基，36℃±1℃培養(yǎng)24-48h，結果如下：
質控菌株及編號指標質控評判標準單核細胞增生李斯特ATCC19115生長率PR≥0.5，藍綠色光滑規(guī)則小菌落，周圍有乳白色脂肪沉淀環(huán)。英諾克李斯特ATCC33090特異性藍色至藍綠色大腸埃希氏菌ATCC25922選擇性G≤1糞腸球菌ATCC29212
【儲存條件及保質期】
脫水干粉培養(yǎng)基：貯存于避光、陰涼干燥處;配套試劑A&B： 2~8℃，避光保存;貯存期均為兩年。
平板凝膠/瓶裝凝膠：2~8℃，避光保存，有效期三個月。
【注意事項】
1、稱量脫水干粉培養(yǎng)基時避免粉塵揚起，應佩戴口罩操作以免吸入粉塵引起呼吸道系統(tǒng)不適。
2、凝膠培養(yǎng)基在2-8℃保存時與存放容器冷凝管保持一定距離以免凍損壞。使用前應平衡至室溫。
【廢物處理】
檢測之后帶菌器皿置于121℃下高壓滅菌30分鐘后處理。
【執(zhí)行標準】
Q/HKSJ 03 普通微生物培養(yǎng)基
