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微生物檢測應用:李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基

2017-12-26  閱讀(1045)

李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基在微生物檢測中,常用于用于分離和初步鑒別單增李斯特氏菌和其它李斯特菌。

 

【檢驗原理】

蛋白胨、胰酪胨提供氮源和碳源;氯化鈉維持滲透壓;瓊脂是培養(yǎng)基凝固劑;抑制劑和配套試劑B可抑制其它雜菌的生長;色素和配套試劑A可使單增李斯特氏菌形成藍綠色規(guī)測光滑的小菌落,周圍有乳白色脂肪沉淀環(huán)。

【李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基配方成分】

 

【使用方法】

平板凝膠培養(yǎng)基使用:待檢樣品按照相應的標準(GB、SN、FDA等)進行處理后,取適量樣品液接種于該培養(yǎng)基上,于36±1℃培養(yǎng)18~24 h,觀察結果,挑取典型可疑菌落進行鑒定。

脫水干粉培養(yǎng)基使用:首先、稱取本品干粉7.11g,用95mL蒸餾水或去離子水溶解,攪拌加熱煮沸至*溶解,121℃高壓蒸汽滅菌15min;另外,稱取配套試劑A(SR0470)0.2g加入4ml蒸餾水或去離子水中,充分混勻成均一乳白色溶液(可借用磁力攪拌器或渦漩混合器) 121℃高壓蒸汽滅菌15min,之后冷至約50℃?zhèn)溆?。接著,?支配套試劑B(SR0470)分別加入1mL無菌水,使之*溶解。zui后,將配套試劑A和B加入到約50℃基礎培養(yǎng)基中,充分混勻后傾注無菌平皿,制成平板培養(yǎng)基備用。(注:配套試劑A在傾注平板前應與基礎和配套試劑B充分混勻,否則會影響菌落特征觀察。)

瓶裝凝膠培養(yǎng)基使用:將1瓶裝凝膠培養(yǎng)基置于100℃水浴中加熱至*溶解后冷卻至50℃?zhèn)溆?。?支配套試劑B(SR0470)加入1mL無菌水,使之*溶解。將1瓶配套試劑A(4ml/瓶)和1支配套試劑B加入到約50℃的基礎培養(yǎng)基中,充分混勻后備用。(注:配套試劑A在傾注平板前應與基礎和配套試劑B充分混勻,否則會影響菌落特征觀察。)

【質量控制】

1. 外觀方面

脫水干粉培養(yǎng)基:淡黃色粉末; 配套試劑A:黃色粉末(或乳白色溶液);配套試劑B:白色凍干粉。

平板凝膠/瓶裝凝膠培養(yǎng)基:淡黃色凝膠。

2. 生物學方面

下列質控菌株接種待測試培養(yǎng)基,36℃±1℃培養(yǎng)24-48h,結果如下:

 

質控菌株及編號指標質控評判標準單核細胞增生李斯特ATCC19115生長率PR≥0.5,藍綠色光滑規(guī)則小菌落,周圍有乳白色脂肪沉淀環(huán)。英諾克李斯特ATCC33090特異性藍色至藍綠色大腸埃希氏菌ATCC25922選擇性G≤1糞腸球菌ATCC29212

【儲存條件及保質期】

  脫水干粉培養(yǎng)基:貯存于避光、陰涼干燥處;配套試劑A&B: 2~8℃,避光保存;貯存期均為兩年。

  平板凝膠/瓶裝凝膠:2~8℃,避光保存,有效期三個月。

【注意事項】

  1、稱量脫水干粉培養(yǎng)基時避免粉塵揚起,應佩戴口罩操作以免吸入粉塵引起呼吸道系統(tǒng)不適。

  2、凝膠培養(yǎng)基在2-8℃保存時與存放容器冷凝管保持一定距離以免凍損壞。使用前應平衡至室溫。

【廢物處理】

  檢測之后帶菌器皿置于121℃下高壓滅菌30分鐘后處理。

【執(zhí)行標準】

  Q/HKSJ 03 普通微生物培養(yǎng)基



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