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冰凍切片組織線粒體膜通道孔(MPTP)熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書

2019-5-20  閱讀(599)

主要用途

 

冰凍切片組織線粒體膜通道孔(MPTP)熒光檢測試劑是一種旨在通過鈣黃綠素-鈷技術(shù),選擇性地聚集在線粒體內(nèi)呈現(xiàn)熒光染色,而存在于或由線粒體釋放到細(xì)胞漿的熒光染料,即刻發(fā)生熒光淬滅,來分析和觀察線粒體膜通道孔活性的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種冰凍組織線粒體(動物、人體、昆蟲等)膜通道孔活性的檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,分辨率高,操作簡捷,性能穩(wěn)定。

 

技術(shù)背景

 

線粒體膜通道孔(mitochondrial permeability transition pore;MPTP)是由線粒體內(nèi)外膜成分構(gòu)成的非特異性且鈣離子依賴性通道。在細(xì)胞凋亡或壞死時,線粒體內(nèi)容物通過膜通道孔釋放到胞漿中。膜通道孔的開放,顯著改變線粒體的通透性。鈣離子過度進入、線粒體谷胱苷肽的氧化和活性氧族水平的增加等導(dǎo)致膜通道孔的持續(xù)開放,而造成細(xì)胞色素C的釋放和線粒體膜電位的消失。鈣黃綠素-AM,又稱雙甲亞胺二乙酸鈉熒光素-乙酰氧基甲基酯【bis(bis-carboxymethyl amino methyl fluorescein)-acetoxymethyl ester】,作為熒光探針:,適宜的分子量622d,小于1.5kd;第二,幾乎不具有膜結(jié)合性;第三,不是線粒體酶的底物;第四,容易進入細(xì)胞及其線粒體。鈣黃綠素-AM進入細(xì)胞后,被細(xì)胞內(nèi)酯酶切離,產(chǎn)生具有極性的熒光性強的鈣黃綠素。鈣黃綠素進入線粒體后,被線粒體俘獲。同時胞漿內(nèi)的鈣黃綠素受到其淬滅劑鈷離子的淬滅。一旦線粒體膜通道孔瞬時開放,鈣黃綠素釋放出來,被鈷離子淬滅。線粒體內(nèi)鈣黃綠素?zé)晒獾淖兓砻髂ねǖ揽椎拈_放狀態(tài)。



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