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上海哈靈生物科技有限公司

主營(yíng)產(chǎn)品: ELISA代測(cè)服務(wù),ELISA試劑盒價(jià)格,ELISA試劑盒,ELISA試劑盒說明書,大鼠ELISA試劑盒

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哈靈生物提供 Real time PCR 技術(shù)服務(wù)

2013-7-22  閱讀(777)

一、樣品制備方法:
1.懸浮細(xì)胞:
懸浮細(xì)胞培養(yǎng)液倒入離心管中,離心沉積細(xì)胞,棄去上清液。參入1ml PBS懸浮細(xì)胞,轉(zhuǎn)入小離心管中,低速離心沉淀細(xì)胞,棄去PBS,將細(xì)胞沉積(1×107個(gè)細(xì)胞)放入-70℃ 冰箱保管。干冰運(yùn)送。也能夠在細(xì)胞沉積中參加1ml的 Trizol 裂解液重復(fù)吸打幾回,目視可見細(xì)胞層溶解*后,-70℃保管作用更佳。
2.貼壁細(xì)胞:
取大約1×107個(gè)貼壁細(xì)胞,胰酶消化后參入PBS懸浮細(xì)胞,低速離心搜集,棄去液體,參加 1 ml PBS懸浮細(xì)胞,轉(zhuǎn)入1.5ml離心管中,低速離心沉積細(xì)胞,棄去PBS,放入-70℃冰箱保管。干冰運(yùn)送。也能夠在細(xì)胞沉積中參加1ml的 Trizol 裂解液重復(fù)吸打幾回,目視可見細(xì)胞層溶解*后,-70℃保管作用更佳。
3.組織:
收集新鮮組織(注意:生物體逝世后1分鐘內(nèi)取資料并保管好),組織塊以PBS或生理鹽水清潔干凈,切為小塊,放入液氮或-70℃冰箱中保管,干冰運(yùn)送。也可每 50-100 mg 組織加1 ml Trizol溶液勻漿裂解組織樣品。勻漿的裂解液4℃ 短期保管(1個(gè)月)。-20℃或-70℃長(zhǎng)時(shí)間保管。

二、樣品的要求:
1. 盡可能新鮮的樣品。
2. 質(zhì)量大約150毫克的組織樣本。
3. 細(xì)胞數(shù)大于1×107的細(xì)胞樣本

三、注意事項(xiàng):
1.因RNA比較容易出現(xiàn)降解,建議將標(biāo)本加入Trizol后運(yùn)輸。
2.實(shí)驗(yàn)所需要準(zhǔn)備的取材工具以及組織存放器皿等必須得經(jīng)過滅菌除酶處理。
3.取材的實(shí)驗(yàn)環(huán)境要求沒有RNA酶污染。
4.客戶必須自備引物。也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成。

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