MDA-MB-453乳腺癌細(xì)胞 上海谷研科技有限公司的原代細(xì)胞株及血清，ATCC細(xì)胞株、hyclone澳洲特級(jí)胎牛血清，優(yōu)等胎牛血清，標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清，gibco特優(yōu)級(jí)胎牛血清血清，新生牛血清。
細(xì)胞術(shù)檢測(cè)樣品制備方法
直接標(biāo)記抗體（FITC標(biāo)記抗體）MDA-MB-453乳腺癌細(xì)胞：
（1） 收集1×106個(gè)細(xì)胞，800rpm離心5min，4℃以上冷PBS洗一次。
（2） 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘，800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細(xì)胞，800rpm離心5min 。
（3） 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細(xì)胞，冰上孵育10min，800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標(biāo)記抗體（5×105個(gè)細(xì)胞/20ul抗體）的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定，待測(cè)即可。
（4） 用流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。[2]
未標(biāo)記抗體間接免疫熒光標(biāo)記法：
（1）收集2×106個(gè)細(xì)胞，用冷的PBS 2ml 洗滌細(xì)胞一次，800rpm離心5min。
（2）用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細(xì)胞40min,800rpm離心5min；2ml PBS重懸細(xì)胞，800rpm離心5min；
（3）用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細(xì)胞，冰上放置10min,800rpm離心5min。
（4）加入飽和劑量未標(biāo)記抗體，冰上放置40min,800rpm離心5min，用2ml冷的PBS 重懸細(xì)胞，800rpm離心5min，洗去未結(jié)合一抗，重復(fù)一次。
（5）加入熒光標(biāo)記（FITC）標(biāo)記的二抗，冰上避光放置40min后，800rpm離心5min，去上清，PBS洗滌兩次。
（6）加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細(xì)胞；固定待測(cè)。
（7）流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。
細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡及DNA倍體分析樣品（PI染色）的制備：
（1）待測(cè)樣本制成單細(xì)胞懸液，然后200g離心5分鐘，棄上清。
（2）用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定，4℃保存 ，至少固定18小時(shí)。
（3）調(diào)整細(xì)胞濃度為106細(xì)胞/毫升，取1毫升細(xì)胞懸液，用PBS洗三次，細(xì)胞重懸于1毫升PI染液中，37℃孵育30分鐘即可進(jìn)行流式分析。
（4）PI染液終濃度為50微克/毫升，RNase A終濃度為20微克/毫升。
其他*產(chǎn)品：
（S）-2-AMi-Methoxypropane （S）-（+）-1-甲氧基-2-丙胺 99636-32-5
（S）-2-AMino-3-Methoxypropanoic acid （S）-2-氨基-3-甲氧基丙酸 32620-11-4
（S）-2-AMINO-3-METHOXY-PROPIONIC ACID HYDROCHLORIDE （S）-2-氨基-3-甲氧基丙酸鹽酸鹽 336100-47-1
（S）-2-AMINO-BUT-3-EN-1-OL HYDROCHLORIDE （S）-2-氨基-3-丁烯-1-醇 219803-57-3
（S）-2-AMINOHEX-5-YNOIC ACID  98891-36-2
（S）-2-broMopropanoic acid 2-溴丙酸 32644-15-8
（S）-2-ForMyl-1-piperidinecarboxylic acid tert-butyl ester （S）-2-甲?；?1-哌啶羧酸-1,1-二甲基乙酯 （S）- 150521-32-7
（S）-2-Hydroxy-4-phenylbutyric acid （S）-2-羥基-4-苯基丁酸 115016-95-0
（S）-2-METHYL-1-PHENYL-BUT-3-EN-1-OL  122332-13-2
（S）-2-Methylbutyl acetate （S）-2-甲基丁醇乙酸酯 6493-92-1
（S）-2-Methylproline （S）-2-甲基* 42856-71-3
（S）-2-Methylserine 2-甲基-L-* 16820-18-1
（S）-2-N-Boc-aMinoMethylMorpholine  875551-59-0
（S）-2-tert-ButoxycarbonylaMino-3-iodo-propionic acid Methyl ester BOC-3-碘-D-*甲酯 170848-34-7
（S）-2-TERT-BUTOXYCARBONYLAMINO-HEPTANOIC ACID  71066-01-8
（S）-3-（2-METHOXYETHOXY）PYRROLIDINE （S）-3-（2-甲氧基乙氧基）吡咯烷 880362-02-7
（S）-3-（3'-FLUOROPHENYL）ALANINE T-BUTYL ESTER  309757-71-9
（S）-3-（Boc-aMino）pyrrolidine （S）-3-叔丁氧羰基氨基吡咯烷 122536-76-9
（S）-3,3'-Di（anthracen-9-yl）-1,1'-binaphthalene-2,2'-diol （S）-3,3-DI（ANTHRACEN-9-YL）-1,1-BINAPHTHYL-2,2-DIOL 361342-50-9
（S）-3,4-DIHYDROXYBUTYRONITRILE 126577-60-4
（S）-3,7-diMethyl-1,6-octadien-3-ol （S）-3,7-二甲基-1,6-辛二烯-3-醇 126-90-9
（S）-3-AMINO-2-OXETANONE P-TOLUENESULFONIC ACID SALT （S）-3-氨基氧雜環(huán)丁-2-酮 4-甲基苯磺酸酯 112839-95-9
細(xì)胞凍存
１．將細(xì)胞消化下來，移入離心管離心，棄上清
２．準(zhǔn)備凍存液比例：５０％ＦＢＳ＋４０％培養(yǎng)基＋１０％ＤＭＳＯ（現(xiàn)用現(xiàn)配）
３．加１．５凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)．
放入－２０度冰箱２－４小時(shí)后．再放入－８０度冰箱過夜，第二天放入液氮罐保存
原則　　慢凍速溶
４．加１．５凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)。
凍存時(shí)間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時(shí)。不能超過1小時(shí)。zui后放入-80度冰箱過夜。第二天放入液氮中。