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CNE鼻咽癌細(xì)胞

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所在地上海市

更新時間:2016-06-30 05:58:32瀏覽次數(shù):150次

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CNE鼻咽癌細(xì)胞ATCC株?詢價

CNE鼻咽癌細(xì)胞上海谷研科技有限公司的原代細(xì)胞株及血清,ATCC細(xì)胞株、hyclone澳洲特級胎牛血清,優(yōu)等胎牛血清,標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清,gibco特優(yōu)級胎牛血清血清,新生牛血清。
細(xì)胞術(shù)檢測樣品制備方法
直接標(biāo)記抗體(FITC標(biāo)記抗體CNE鼻咽癌細(xì)胞):
(1) 收集1×106個細(xì)胞,800rpm離心5min,4℃以上冷PBS洗一次。
(2) 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘,800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細(xì)胞,800rpm離心5min。
(3) 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細(xì)胞,冰上孵育10min,800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標(biāo)記抗體(5×105個細(xì)胞/20ul抗體)的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定,待測即可。
(4) 用流式細(xì)胞儀檢測熒光值,每管計數(shù)10 000個細(xì)胞。[2]
未標(biāo)記抗體間接免疫熒光標(biāo)記法:
(1)收集2×106個細(xì)胞,用冷的PBS 2ml 洗滌細(xì)胞一次,800rpm離心5min。
(2)用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細(xì)胞40min,800rpm離心5min;2ml PBS重懸細(xì)胞,800rpm離心5min;
(3)用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細(xì)胞,冰上放置10min,800rpm離心5min。
(4)加入飽和劑量未標(biāo)記抗體,冰上放置40min,800rpm離心5min,用2ml冷的PBS 重懸細(xì)胞,800rpm離心5min,洗去未結(jié)合一抗,重復(fù)一次。
(5)加入熒光標(biāo)記(FITC)標(biāo)記的二抗,冰上避光放置40min后,800rpm離心5min,去上清,PBS洗滌兩次。
(6)加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細(xì)胞;固定待測。
(7)流式細(xì)胞儀檢測熒光值,每管計數(shù)10 000個細(xì)胞。
細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡及DNA倍體分析樣品(PI染色)的制備:
(1)待測樣本制成單細(xì)胞懸液,然后200g離心5分鐘,棄上清。
(2)用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定,4℃保存 ,至少固定18小時。
(3)調(diào)整細(xì)胞濃度為106細(xì)胞/毫升,取1毫升細(xì)胞懸液,用PBS洗三次,細(xì)胞重懸于1毫升PI染液中,37℃孵育30分鐘即可進行流式分析。
(4)PI染液終濃度為50微克/毫升,RNase A終濃度為20微克/毫升。

其他*產(chǎn)品:
(S)-2,2-DiMethyl-1,3-dioxolane-4-carboxylic acid (S)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊環(huán)-4-甲酸 102045-96-5
(S)-2,2-DiMethyl-3-(N-Boc)-4-ethynyl-oxazolidine (4S)-4-乙炔基-2,2-二甲基-1,3-唑烷-3-甲酸叔丁酯 173065-16-2
N2,N6-Bis-(tert-butoxycarbonyl)-L-lysine (S)-2,6-二叔丁氧羰基* 2483-46-7
(S)-2-[(Bis(3,5-bis(trifluoroMethyl)phenyl)triMethylsilanyloxy)Methyl]pyrrolidine, (S)-2-[(Bis(3,5-bis(trifluoroMethyl)phenyl)triMethylsilyloxy)Methyl]pyrrolidine, (S)-α,α-[3,5-Bis(trifluoroMethyl)phenyl]prolinol triMethylsilyl ether (2S)-2-[雙[3,5-雙(三氟乙基)苯基][(*基硅酯)氧基]甲基]-吡咯烷 848821-61-4
(S)-2-[N'-(N-BENZYLPROLYL)AMINO]BENZOPHENONE (R)-2- [N'-(N-芐基脯氨酰)氨基]二苯甲酮 96293-17-3
(S)-3-AMino-3-(2-nitro-phenyl)-propionic acid (S)-3-氨基-3-(2-硝基苯基)-丙酸 732242-02-3
(S)-3-AMINOBUTYRIC ACID (S)-3-氨基丁醇 3775-72-2
(S)-3-AMinopyrrolidine (S)-3-氨基吡咯烷 128345-57-3
(S)-3-AMINOTETRAHYDROFURAN (S)-3-氨基四氫呋喃 104530-79-2
(S)-3-Boc-aMino-4-phenyl-1-butene  107202-43-7
(S)-But-3-en-2-aMine (S)-3-丁烯-2-胺鹽酸鹽 153451-37-7
(S)-3-CARBOXYMETHYL-PIPERIDINE-1-CARBOXYLIC ACID TERT-BUTYL ESTER (S)-N-BOC-3-哌啶乙酸 941289-27-6
(S)-3-Hydroxyphenylglycine  71301-82-1
(S)-3-Hydroxypyrrolidine hydrochloride (S)-3-羥基吡咯烷鹽酸鹽 122536-94-1
(S)-3-Methyl-2-phenylbutylaMine (S)-3-甲基-2-苯基丁胺 106498-32-2
(S)-3-Phenoxybenzaldehyde cyanohydrin (S)-(3-苯氧基苯基61826-76-4
(S)-3-Thienylglycine (S)-3-噻吩基* 1194-87-2
NaMe:(S)-4'-(2-Methylbutyl)[1,1'-biphenyl]-4-carbonitrile  63799-11-1
(S)-4-(4-Nitrobenzyl)-2(1 H)-oxazolidinone (S)-4-[(4-硝基苯基)甲基]-2-惡唑烷酮 139264-55-4
(S)-4-(TERT-BUTOXYCARBONYL)MORPHOLINE-2-CARBOXYLIC ACID (2S)-2,4-嗎啉二羧酸 4-叔丁酯 868689-63-8
(S)-4-ETHYL-4-HYDROXY-7,8-DIHYDRO-1H-PYRANO[3,4-F]INDOLIZINE-3,6,10(4H)-TRIONE (S)-4-乙基-4-羥基-7,8-二氫-1H-吡喃O[3,4-F]吲哚嗪-3,6,10(4H)-酮 110351-94-5
細(xì)胞凍存
1.將細(xì)胞消化下來,移入離心管離心,棄上清
2.準(zhǔn)備凍存液比例:50%FBS+40%培養(yǎng)基+10%DMSO(現(xiàn)用現(xiàn)配)
3.加1.5凍存液在離心管中,將細(xì)胞吹打均勻,移入凍存管內(nèi).
放入-20度冰箱2-4小時后.再放入-80度冰箱過夜,第二天放入液氮罐保存
原則  慢凍速溶
4.加1.5凍存液在離心管中,將細(xì)胞吹打均勻,移入凍存管內(nèi)。
凍存時間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時。不能超過1小時。zui后放入-80度冰箱過夜。第二天放入液氮中。

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QGY-7701肝癌細(xì)胞

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