SHZ-88乳腺癌細(xì)胞 上海谷研科技有限公司的原代細(xì)胞株及血清，ATCC細(xì)胞株、hyclone澳洲特級(jí)胎牛血清，優(yōu)等胎牛血清，標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清，gibco特優(yōu)級(jí)胎牛血清血清，新生牛血清。
細(xì)胞術(shù)檢測(cè)樣品制備方法
直接標(biāo)記抗體（FITC標(biāo)記抗體）SHZ-88乳腺癌細(xì)胞：
（1） 收集1×106個(gè)細(xì)胞，800rpm離心5min，4℃以上冷PBS洗一次。
（2） 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘，800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細(xì)胞，800rpm離心5min。
（3） 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細(xì)胞，冰上孵育10min，800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標(biāo)記抗體（5×105個(gè)細(xì)胞/20ul抗體）的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定，待測(cè)即可。
（4） 用流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。[2]
未標(biāo)記抗體間接免疫熒光標(biāo)記法：
（1）收集2×106個(gè)細(xì)胞，用冷的PBS 2ml 洗滌細(xì)胞一次，800rpm離心5min。
（2）用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細(xì)胞40min,800rpm離心5min；2ml PBS重懸細(xì)胞，800rpm離心5min；
（3）用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細(xì)胞，冰上放置10min,800rpm離心5min。
（4）加入飽和劑量未標(biāo)記抗體，冰上放置40min,800rpm離心5min，用2ml冷的PBS 重懸細(xì)胞，800rpm離心5min，洗去未結(jié)合一抗，重復(fù)一次。
（5）加入熒光標(biāo)記（FITC）標(biāo)記的二抗，冰上避光放置40min后，800rpm離心5min，去上清，PBS洗滌兩次。
（6）加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細(xì)胞；固定待測(cè)。
（7）流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。
細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡及DNA倍體分析樣品（PI染色）的制備：
（1）待測(cè)樣本制成單細(xì)胞懸液，然后200g離心5分鐘，棄上清。
（2）用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定，4℃保存 ，至少固定18小時(shí)。
（3）調(diào)整細(xì)胞濃度為106細(xì)胞/毫升，取1毫升細(xì)胞懸液，用PBS洗三次，細(xì)胞重懸于1毫升PI染液中，37℃孵育30分鐘即可進(jìn)行流式分析。
（4）PI染液終濃度為50微克/毫升，RNase A終濃度為20微克/毫升。
其他*產(chǎn)品：
英文名稱 中文名稱 CAS號(hào)
4-METHYLAMINO-BENZAMIDE  38359-26-1
5-（2-AMINO-ETHYL）-2-HYDROXY-BENZOIC ACID  4900-26-9
1,3-BENZOTHIAZOL-2-YLBORONIC ACID,97% 1,3-苯并噻唑-2-硼酸 499769-96-9
Citalopram hydrochloride 鹽酸西酞普蘭 85118-27-0
ADAMANTAN-1-YL-AMINO-ACETIC ACID 1-羧甲胺基金剛烷 60256-21-5
2-（Chloromethyl）thiophene 2-氯甲基噻吩 765-50-4
5-fluoro-2,3-dihydro-1h-isoindole 5-氟異吲哚啉 57584-71-1
phylloerythrin  26359-43-3
（ R）-1-phenylethylaMine R（+）-alpha-甲基芐胺 3886-69-9
（（3AR,4R,6AS）-5-BENZYL-2,2-DIMETHYL-TETRAHYDRO-[1,3]DIOXOLO[4,5-C]PYRROL-4-YL）-METHANOL  117858-82-9
（2S,5S）-2,5-diaMinoadipic acid 2HCl  188181-71-7
L-Epicatechin 表兒茶素 490-46-0
（-）-1-（4（chlorophenyl）phenyl Methyl piperazine （-）-1-[（4-）苯甲基]哌嗪 300543-56-0
（-）-2-BETA-CARBOMETHOXY-3-BETA- （IODOPHENYL）TROPANE  136794-86-0
（1S,2S）-2-AMI-（4-HYDROXYPHENYL）PROPANE-1-OL （1R,2S）-2-氨基-1-（4-羥基苯基）丙-1-醇 771-91-5
AlloaroMadendrene 香樹(shù)烯 25246-27-9
（S）-p-Menth-1-en-8-ol alpha-松油醇 10482-56-1
（-）-Bicuculline MethobroMide （-）-荷包牡丹堿甲溴化物 73604-30-5
ClausenaMide 黃皮酰胺 103541-15-7
（-）-COTININE 可替寧 486-56-6
（-）-DiisopinocaMpheyl borane （-）-二異松蒎基硼烷 21932-54-7
細(xì)胞凍存
１．將細(xì)胞消化下來(lái)，移入離心管離心，棄上清
２．準(zhǔn)備凍存液比例：５０％ＦＢＳ＋４０％培養(yǎng)基＋１０％ＤＭＳＯ（現(xiàn)用現(xiàn)配）
３．加１．５凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)．
放入－２０度冰箱２－４小時(shí)后．再放入－８０度冰箱過(guò)夜，第二天放入液氮罐保存
原則　　慢凍速溶
４．加１．５凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)。
凍存時(shí)間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時(shí)。不能超過(guò)1小時(shí)。zui后放入-80度冰箱過(guò)夜。第二天放入液氮中。