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上海谷研試劑有限公司

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RF/6A猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜內(nèi)皮細胞

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所在地上海市

更新時間:2016-07-04 07:24:28瀏覽次數(shù):489次

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RF/6A猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜內(nèi)皮細胞 上海谷研科技有限公司的原代細胞株及血清,ATCC細胞株、hyclone澳洲特級胎牛血清,優(yōu)等胎牛血清,標準胎牛血清,gibco特優(yōu)級胎牛血清血清,新生牛血清。
細胞術(shù)檢測樣品制備方法
直接標記抗體(FITC標記抗體)RF/6A猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜內(nèi)皮細胞
(1) 收集1×106個細胞,800rpm離心5min,4℃以上冷PBS洗一次。
(2) 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘,800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細胞,800rpm離心5min。
(3) 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細胞,冰上孵育10min,800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標記抗體(5×105個細胞/20ul抗體)的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定,待測即可。
(4) 用流式細胞儀檢測熒光值,每管計數(shù)10 000個細胞。[2]
未標記抗體間接免疫熒光標記法:
(1)收集2×106個細胞,用冷的PBS 2ml 洗滌細胞一次,800rpm離心5min。
(2)用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細胞40min,800rpm離心5min;2ml PBS重懸細胞,800rpm離心5min;
(3)用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細胞,冰上放置10min,800rpm離心5min。
(4)加入飽和劑量未標記抗體,冰上放置40min,800rpm離心5min,用2ml冷的PBS 重懸細胞,800rpm離心5min,洗去未結(jié)合一抗,重復一次。
(5)加入熒光標記(FITC)標記的二抗,冰上避光放置40min后,800rpm離心5min,去上清,PBS洗滌兩次。
(6)加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細胞;固定待測。
(7)流式細胞儀檢測熒光值,每管計數(shù)10 000個細胞。
細胞周期、細胞凋亡及DNA倍體分析樣品(PI染色)的制備:
(1)待測樣本制成單細胞懸液,然后200g離心5分鐘,棄上清。
(2)用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定,4℃保存 ,至少固定18小時。
(3)調(diào)整細胞濃度為106細胞/毫升,取1毫升細胞懸液,用PBS洗三次,細胞重懸于1毫升PI染液中,37℃孵育30分鐘即可進行流式分析。
(4)PI染液終濃度為50微克/毫升,RNase A終濃度為20微克/毫升。

其他*產(chǎn)品:
TroMetaMol 三羥甲基氨基甲烷 77-86-1
TRIS(2-AMINOETHYL)AMINE 三(2-氨基乙基)胺 4097-89-6
TRIS(2-CYANOETHYL)AMINE 三(2-氰乙基)胺 7528-78-1
Tris[2-phenylpyridinato-C2 三(2-苯基吡啶)合銥 94928-86-6
Tilorone dihydrochloride 鹽酸替洛隆 27591-69-1
TiMiperone 替米哌隆 57648-21-2
Tin (ii) octoate 辛酸錫(2+)鹽 1912-83-0
Tin(IV) isopropoxide 異丙氧基錫 1184-61-8
Tin(II) 2,3-naphthalocyanine 2,3-萘酞菁錫(II) 110479-58-8
TIN(IV) 2,3-NAPHTHALOCYANINE DICHLORIDE 2,3-二氯化萘酞菁錫 26857-61-4
tiocloMarol 噻氯香豆素 22619-35-8
tiospirone 替螺酮 87691-91-6
Tipelukast 4-[6-乙?;?3-[3-[(4-乙?;?3-羥基-2-丙基苯基)硫]丙氧基]-2-丙基苯氧基]丁酸 125961-82-2
Tipifarnib 替吡法尼 192185-72-1
Tipindole  7489-66-9
Tipranavir 替拉那韋 174484-41-4
Tirolisant PITOLISANT 362665-56-3
TitaniuM acetylacetonate 雙(乙酰丙酮基)異丁氧基異丙氧基鈦酸酯 97281-09-9
TitaniuM ethoxide 鈦酸乙酯 3087-36-3
TITANIUM SELENIDE  12067-45-7
titaniuM tetra(phenolate)  2892-89-9
細胞凍存
1.將細胞消化下來,移入離心管離心,棄上清
2.準備凍存液比例:50%FBS+40%培養(yǎng)基+10%DMSO(現(xiàn)用現(xiàn)配)
3.加1.5凍存液在離心管中,將細胞吹打均勻,移入凍存管內(nèi).
放入-20度冰箱2-4小時后.再放入-80度冰箱過夜,第二天放入液氮罐保存
原則  慢凍速溶
4.加1.5凍存液在離心管中,將細胞吹打均勻,移入凍存管內(nèi)。
凍存時間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時。不能超過1小時。zui后放入-80度冰箱過夜。第二天放入液氮中。

SMC-1胸膜細胞瘤

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NCI-H446 H446小細胞肺癌細胞

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QGY-7701肝癌細胞

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