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甲胎蛋白異質(zhì)體在肝病鑒別中的應(yīng)用

閱讀:290發(fā)布時間:2017-4-14

    甲胎蛋白(AFP)在臨床上作為肝細(xì)胞癌的診斷以及療效觀察指標(biāo)已經(jīng)被廣泛認(rèn)可, 但是 AFP 只具有相對特異性,即肝癌患者中 AFP 升高,部分良性肝病患者中也升高,因此,尋求肝癌早期診斷特異性指標(biāo)具有重要臨床意義。研究發(fā)現(xiàn), AFP 在不同病理情況下產(chǎn)生的分子糖鏈結(jié)構(gòu)不同,肝癌病理情況下主要產(chǎn)生與小扁豆凝集素具有強結(jié)合力的甲胎蛋白異質(zhì)體(AFP-L3),本研究采用親和微量離心柱法分離 AFP-L3,應(yīng)用電化學(xué)發(fā)光法對不同肝病患者總AFP 和 AFP-L3 進行檢測,探討 AFP-L3 在鑒別良惡性肝病中的應(yīng)用價值。

    測定方法:AFP-L3 的分離采用親和微量離心柱法, 柱內(nèi)預(yù)先裝有耦聯(lián)了小扁豆凝集素的瓊脂糖,可特異性地結(jié)合AFP-L3,當(dāng)血清流過離心管時,樣本中的 AFP-L3 與管內(nèi)親和介質(zhì)結(jié)合,經(jīng)過清洗和離心洗脫過程,獲得含有 AFP-L3的樣本,然后用電化學(xué)發(fā)光法檢測總 AFP 和 AFP-L3 的含量,計算AFP-L3 占 AFP 總量的百分比,AFP-L3/AFP躍10%為陽性判斷標(biāo)準(zhǔn)。

    目前肝癌的診斷主要依靠 AFP,但AFP在一些良性肝病患者中也會有不同程度的升高。因為在肝細(xì)胞再生過程中會產(chǎn)生一定量的AFP。

    本研究結(jié)果顯示,AFP逸400滋g/L和AFP約400滋g/L 的肝癌組其總AFP-L3/AFP 陽性率明顯高于非肝癌組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義,表明用本方法檢測的 AFP-L3/AFP > 10%為診斷指標(biāo)時,可以有效的區(qū)分良、惡性肝病患者;而低濃度AFP陽性肝癌組與高濃度AFP 陽性肝癌組相比,其 AFP-L3 陽性率差異無統(tǒng)計學(xué)意義,表明AFP-L3 用于肝癌診斷不受AFP逸400 滋g /L作為肝癌診斷標(biāo)準(zhǔn)的限制,如果患者血清中總AFP 只有輕微升高,而AFP-L3 所占比例超過10%,就提示肝癌發(fā)生的可能性較大。對這樣的患者進行隨訪和嚴(yán)密監(jiān)控是很有必要的。筆者同時對非肝癌患者之間 AFP-L3/AFP 陽性率進行比較,結(jié)果顯示差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。

    目前AFP-L3 檢測方法主要有植物凝集素親和層析法、聚丙烯酰胺凝膠電泳法、親和印跡法及親和免疫交叉電泳技術(shù)等。這些方法技術(shù)要求較高,操作繁瑣,限制了AFP-L3 在臨床的應(yīng)用。本研究采用親和微量離心柱法,柱內(nèi)預(yù)先裝有耦聯(lián)了小扁豆凝集素的瓊脂糖作為親和介質(zhì),然后利用半抗原糖基進行特異性洗脫,并結(jié)合離心技術(shù),可快速簡便獲得樣本中的 AFP-L3, 然后用電化學(xué)發(fā)光法 檢測總 AFP 和AFP-L3 的含量, 方法簡單、結(jié)果準(zhǔn)確、成本較低,適合臨床推廣應(yīng)用。對于低濃度AFP陽性而AFP-L3 所占比例超過10%的肝病患者,定期復(fù)查 AFP-L3,動態(tài)觀察其變化,可及時發(fā)現(xiàn)某些肝病的惡變傾向,對肝癌的早期診斷意義較大。


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