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上海友騰生物科技有限公司

紅細(xì)胞裂解液說明

時(shí)間:2014-2-25閱讀:336
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組織細(xì)胞樣品:   

1.新鮮組織經(jīng)*或膠原酶等消化分散成單個(gè)細(xì)胞懸液,離心棄去上清液;   

2.從4℃冰箱中取出ELS裂解液,按1:3-5的比例向細(xì)胞沉淀中加入ELS裂解液(1ml細(xì)胞壓積加入3-5ml裂解液),輕輕吹打混勻;   

3.800-1000rpm離心5-8分鐘,離心棄去上層紅色清液;   

4.收集沉淀部分,加入Hank’s液或無血清培養(yǎng)液離心洗2-3次;   

5.如裂解不*可重復(fù)步驟2和3;   

6.重懸細(xì)胞,用于后續(xù)實(shí)驗(yàn);如提取RNA,是于步驟4開始使用DEPC水配制的溶液中進(jìn)行。

血細(xì)胞:   

1.新鮮抗凝血,離心棄去上清液;   

2.取出4℃冰箱預(yù)冷的ELS裂解液,按1:6-10的比例向細(xì)胞沉淀中加入ELS裂解液(1ml細(xì)胞壓積加入6-10ml裂解液),輕輕吹打混勻;   

3.800-1000rpm離心5-8分鐘,離心棄去上層紅色清液;   

4.收集沉淀部分,加入Hank’s液或無血清培養(yǎng)液離心洗2-3次;   

5.如裂解不*可重復(fù)步驟2和3;   

6.重懸細(xì)胞,用于后續(xù)實(shí)驗(yàn);如提取RNA,是于步驟4開始使用DEPC水配制的溶液進(jìn)行。

紅細(xì)胞裂解液保存條件:2-8℃。

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