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上海友騰生物科技有限公司

微核檢測技術(shù)

時間:2014-3-12閱讀:404
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一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

學(xué)會利用所學(xué)知識,進(jìn)行自主實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì);了解染色體畸變的各種類型及原理,掌握利用微核檢測技術(shù)監(jiān)測環(huán)境污染的一般方法。

二、實(shí)驗(yàn)原理

微核(micronucleus, 簡稱MCN),也叫衛(wèi)星核,是真核類生物細(xì)胞中的一種異常結(jié)構(gòu),是染色體畸變在間期細(xì)胞中的一種表現(xiàn)形式。微核往往是各種理化因子,如輻射、化學(xué)藥劑對分裂細(xì)胞作用而產(chǎn)生的。在細(xì)胞間期,微核呈圓形或橢圓形,游離于主核之外,大小應(yīng)在主核1/3以下。微核的折光率及細(xì)胞化學(xué)反應(yīng)性質(zhì)和主核一樣,也具合成DNA的能力。一般認(rèn)為微核是由有絲分裂后期喪失著絲粒的染色體斷片產(chǎn)生的。有實(shí)驗(yàn)證明,整條染色體或幾條染色體也能形成微核。這些斷片或染色體在分裂過程中行動滯后,在分裂末期不能進(jìn)入主核,便形成了主核之外的核塊。當(dāng)子細(xì)胞進(jìn)入下一次分裂間期時,它們便濃縮成主核之外的小核,即形成了微核。

已經(jīng)證實(shí),微核率的大小是和作用因子的劑量或輻射累積效應(yīng)呈正相關(guān),這一點(diǎn)與染色體畸變的情況一樣。所以許多人認(rèn)為可用簡易的周期微核計(jì)數(shù)來代替繁雜的中期畸變?nèi)旧w計(jì)數(shù)。由于大量新的化合物的合成,原子能的應(yīng)用,各種各樣工業(yè)廢物的排出等都存在污染環(huán)境的可能性,欲了解這些因素對機(jī)體潛在的遺傳危害,需要有一套高度靈敏,技術(shù)簡單易行的測試系統(tǒng)來監(jiān)測環(huán)境的變化。只有真核類的測試系統(tǒng)更能直接推測誘變物質(zhì)對人類或其它高等生物的遺傳危害,在這方面,微核測試是一種比較理想的方法。目前國內(nèi)外不少部門已把微核測試用于輻射損傷、輻射防護(hù)、化學(xué)誘變劑、新藥試驗(yàn)、食品添加劑的安全評價(jià),以及染色體遺傳疾病和癌癥前期診斷等各個方面。

三、實(shí)驗(yàn)材料

蠶豆(vicia faba, 2n=12)干種子。

四、實(shí)驗(yàn)儀器及用具

顯微鏡、手動計(jì)數(shù)器、鑷子、載玻片、蓋玻片、燒杯、瓷盤、培養(yǎng)箱、分析天平、水浴鍋、酒精燈、剪刀、解剖針、濾紙、鉛筆、標(biāo)簽紙、膠水等。

五、藥品和試劑

根據(jù)學(xué)生試驗(yàn)設(shè)計(jì)要求,提供相應(yīng)的藥品和試劑。

六、實(shí)驗(yàn)步驟

(一)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

學(xué)生可選擇不同的方法自行設(shè)計(jì)進(jìn)行材料的誘變處理,并將試驗(yàn)設(shè)計(jì)交指導(dǎo)老師審核后進(jìn)行試驗(yàn)操作。

(二)實(shí)驗(yàn)實(shí)施

學(xué)生根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)獨(dú)立進(jìn)行實(shí)驗(yàn)實(shí)施。并撰寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告。

七、實(shí)驗(yàn)作業(yè)

產(chǎn)生微核的根尖細(xì)胞在分裂中期可能出現(xiàn)什么樣的分裂圖

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