摘要：通過(guò)檢測(cè)*甲素與*聯(lián)合使用時(shí)對(duì)裸鼠載人SC-M1胃癌腫瘤模型的療效。結(jié)果顯示*甲素（Triptolide， TPL）與*（CDDP）聯(lián)合使用能有效地抑制裸鼠SC-M1胃癌腫瘤的生長(zhǎng)，且抑制效果明顯優(yōu)于*甲素或*單獨(dú)使用。
關(guān)鍵詞：*甲素， *， 裸鼠載人SC-M1胃癌腫瘤模型，抗腫瘤， SC-M1

一、 實(shí)驗(yàn)原理 
*是一個(gè)有著悠久、廣泛應(yīng)用歷史的中藥。*甲素是*的主要活性成分之一，是一個(gè)具有多種生物活性的天然產(chǎn)物，來(lái)源于中藥*的根，研究表明它具有抗氧化，抗類風(fēng)濕，抗老年性癡呆癥、抗癌等功效?，F(xiàn)代研究表明*甲素不僅有抗類風(fēng)濕作用，還有抗癌作用，在美國(guó)正在進(jìn)行一期抗癌臨床研究。zui近的研究發(fā)現(xiàn)，*甲素除了特異地影響某些蛋白和信號(hào)通路以外，還會(huì)抑制廣泛的基因轉(zhuǎn)錄，但其作用機(jī)理有待進(jìn)一步明確。
裸鼠為嚴(yán)重免疫缺陷的小鼠，對(duì)人源性癌細(xì)胞或組織免疫排異極小，目前將人類腫瘤細(xì)胞系移植到免疫缺陷的裸鼠體內(nèi)所建立的人類異種移植物腫瘤模型，已經(jīng)廣泛用于臨床前抗癌藥藥效的檢測(cè)。

二、 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>
觀察*甲素與*聯(lián)合使用時(shí)對(duì)裸鼠載人SC-M1胃癌腫瘤模型的療效。

三、 實(shí)驗(yàn)材料
1. 實(shí)驗(yàn)材料及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
*甲素 （T3652，Sigma）；*（P4394，Sigma）；SC-M1胃癌細(xì)胞（CRL-5822，ATCC）；動(dòng)物品系：SCID裸鼠 (SPF級(jí))；體重：18-20g/6周齡；性別：雄性； 動(dòng)物數(shù)：每組6只，共5組，共30只。
2. 數(shù)據(jù)分析
GraphPad Prism（Ver. 5，GraphPad Software） 作圖，并進(jìn)行雙側(cè)t檢驗(yàn)。

四、 實(shí)驗(yàn)步驟
實(shí)驗(yàn)共分為以下幾個(gè)步驟：
1. SC-M1細(xì)胞培養(yǎng)：
取液氮凍存的SM-C1細(xì)胞株，復(fù)蘇后，置37℃、5% CO2條件下培養(yǎng)。
2. 腋下成瘤：
SM-C1經(jīng)傳代培養(yǎng)后，取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，用PBS制備成5×107細(xì)胞/ml濃度的細(xì)胞懸液，接種于裸鼠腋部皮下（每只小鼠100μl，共計(jì)5×106細(xì)胞）。待能觀察到腫瘤后，隨機(jī)分為4組。
3. 給藥：
實(shí)驗(yàn)分組及給藥：
1）陰性對(duì)照組 PBS（靜脈注射， 一周三次，連續(xù)三周）。
2）*甲素治療組0.4mg/kg（靜脈注射，一周三次，連續(xù)三周）。
3）*治療組3mg/kg（靜脈注射，一周三次，連續(xù)三周）。
4）*甲素+*聯(lián)合治療組 （TPL，0.4mg/kg；CDDP，3mg/kg）（靜脈注射，一周三次，連續(xù)三周）。   
5）按實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案給藥。所應(yīng)用的飼料、墊料、籠具及接觸的器械等均應(yīng)高壓消毒后使用，裸鼠置于層流架中飼養(yǎng)。
4. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄和分析：
動(dòng)態(tài)觀察和測(cè)試腫瘤大小以及荷瘤鼠體重，每2天用卡尺測(cè)量各裸鼠腫瘤的短徑（a）及長(zhǎng)徑（b），按(a2×b)/2公式計(jì)算腫瘤體積。根據(jù)測(cè)量計(jì)算的腫瘤體積計(jì)算出相對(duì)腫瘤體積（RTV），RTV＝Vt/V0。其中V0為隨機(jī)分組（即d0）時(shí)的腫瘤體積，Vt為每一次測(cè)量（即dn）時(shí)的腫瘤體積。三周后處死各組動(dòng)物，剖取腫瘤稱重，按下列公式計(jì)算相對(duì)腫瘤增殖率：相對(duì)腫瘤增殖率%=（給藥組RTV/對(duì)照組RTV）×100%。

五、 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

                                                                      圖1. 各治療組腫瘤大小比較

                                                                  圖2. 各治療組腫瘤大小統(tǒng)計(jì)分析
                                                                  ***表示p<0.001，**表示p<0.05

 從圖1和圖2的結(jié)果可以看到，*甲素與*聯(lián)合用藥可以有效的抑制SC-M1胃癌細(xì)胞腫瘤在SCID小鼠模型中的生長(zhǎng)，且效果優(yōu)于兩種藥物單獨(dú)使用。

六、 參考文獻(xiàn)
1. Li CJ, Chu CY, Huang LH, et al. Synergistic anticancer activity of triptolide combined with cisplatin enhances apoptosis in gastric cancer in vitro and in vivo. Cancer Lett. 2012; 2: 203-213