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魚孕激素/孕酮 ELISA試劑盒

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更新時間:2018-05-06 05:13:24瀏覽次數(shù):318次

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實驗原理

用純化的抗原包被微孔板,制成固相載體,往包被抗原的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、*化的抗原、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。

 

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酶標(biāo)儀校正程序
◎精密度評價:每個通道3只小杯分別加入200ul高中低3種不同.濃度的甲基橙溶解,蒸溜水調(diào)零,于490nm作雙份平行測定,每日測二次(上下午各一次),連續(xù)測定20天。分別計算其批內(nèi)精密度,日內(nèi)批精密度,日間精密度和總精密度及相應(yīng)的CV值。
◎線性測定:用電子天平精確稱取甲基橙配制5個系列的溶液,于490nm平行測8次,取其均值。計算其回歸方程,相關(guān)系數(shù)及標(biāo)準(zhǔn)估計誤差s,并用±1.96s表示樣品測量的誤差范圍.雙波長測定評價:取一分甲基橙溶液,分別加入3種不同濃度的溶血液(測定波長為490nm,校正波長為585nm),先后于8個通道檢測,每個通道測3次,51比較各組之間是否具有統(tǒng)計學(xué)差異,以考察雙波長消除干擾組分的效果。
◎一般酶標(biāo)儀無585nm濾光片,可選用550nm或630nm濾光片。450nm 濾光片的檢定選用普魯蘭溶液(校正波長為630nm)
常見酶標(biāo)儀評價

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