土壤β葡萄糖苷酶S-β-GC纖維二糖酶測(cè)試盒
測(cè)定方法:微量法
產(chǎn)品規(guī)格:100管/48樣
注 意:正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義:
S-β-GC能夠催化水解芳基或烴基與糖基原子團(tuán)之間的糖苷鍵生成葡萄糖,是纖維素分解酶系中重要組成成分之一,在土壤微生物的糖類代謝方面具有重要生理功能。
土壤β葡萄糖苷酶S-β-GC纖維二糖酶測(cè)試盒
測(cè)定原理:
S-β-GC能夠催化對(duì)-硝基苯-β-D吡喃葡萄糖苷生成對(duì)-硝基苯-酚,后者在400nm有特征光吸收。
自備用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、甲苯(不允許快遞)和蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑一:甲苯5mL×1瓶,4℃保存;(自備)
試劑二:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入10mL蒸餾水,充分溶解備用,用不完的試劑仍-20℃保存;
試劑三:液體20mL×1瓶,4℃保存;
試劑四:液體15mL×1瓶,4℃保存;
樣品處理:
新鮮土樣自然風(fēng)干或37度烘箱風(fēng)干,過(guò)30~50目篩。
測(cè)定步驟:
1、分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至400nm,蒸餾水調(diào)零。
2、加樣表
試劑名稱測(cè)定管對(duì)照管
風(fēng)干土樣(g)0.020.02
試劑一(μL)1010
室溫振蕩混勻15min90℃振蕩混勻15min
試劑二(μL)130
蒸餾水130
試劑三(μL)160160
混勻, 37℃振蕩反應(yīng)1h后,90℃水浴5min(蓋緊,防止水分散失),流水冷卻,
10000g 25℃離心10min,取上清液(在EP管或96孔板中加入下列試劑)
上清液(μL)7070
試劑四(μL)130130
充分混勻,室溫靜置2min后, 400nm處測(cè)定吸光值A(chǔ),計(jì)算ΔA=A測(cè)定管-A對(duì)照管。每個(gè)測(cè)定管設(shè)一個(gè)對(duì)照管。