土壤系列_土壤α-葡萄糖苷酶S-α-GC測試盒
測定方法:微量法
產品規(guī)格:100管/48樣
注 意 :正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:
S-α-GC能夠催化水解芳基或烴基與糖基原子團之間的糖苷鍵生成葡萄糖,是纖維素分解酶系中重要組成成分之一,在土壤微生物的糖類代謝方面具有重要生理功能。
土壤系列_土壤α-葡萄糖苷酶S-α-GC測試盒
測定原理:
S-α-GC能夠催化對-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷生成對-硝基苯-酚,后者在400nm有特征光吸收。
自備用品:
可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、甲苯(不允許快遞)和蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑一:甲苯5mL×1瓶,4℃保存;(自備)
試劑二:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入10mL蒸餾水,充分溶解備用,用不完的試劑仍-20℃保存;
試劑三:液體20mL×1瓶,4℃保存;
試劑四:液體15mL×1瓶,4℃保存;
樣品處理:
新鮮土樣自然風干或37度烘箱風干,過30~50目篩。
測定步驟:
1、分光光度計或酶標儀預熱30min以上,調節(jié)波長至400nm,蒸餾水調零。
2、加樣表
試劑名稱測定管對照管
風干土樣(g)0.020.02
試劑一(μL)1010
室溫振蕩混勻15min90℃振蕩混勻15min
試劑二(μL)130
蒸餾水130
試劑三(μL)160160
混勻, 37℃振蕩反應1h后,90℃水浴5min(蓋緊,防止水分散失),流水冷卻,
10000g 25℃離心10min,取上清液(在EP管或96孔板中加入下列試劑)
上清液(μL)7070
試劑四(μL)130130
充分混勻,室溫靜置2min后, 400nm處測定吸光值A,計算ΔA=A測定管-A對照管。每個測定管設
一個對照管。