CoA羧化酶ACC測試盒_脂肪酸代謝系列_分光法
測定方法：分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格：50管/24樣
注 意：正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義：
ACC在生物體內(nèi)催化乙酰CoA羧化生成丙二酰CoA，是脂肪酸和許多次生代謝產(chǎn)物合成的關鍵酶。ACC的活性在一定程度上決定了脂肪酸的合成速度和含油量的高低。
CoA羧化酶ACC測試盒_脂肪酸代謝系列_分光法法
測定原理：
ACC能夠催化乙酰CoAA、NaHCO3和ATP生成丙二酰CoA、ATP和無機磷，通過鉬酸銨定磷法測定無機磷的增加量來測定ACC活性。
需自備的儀器和用品：
分光光度計、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成：
提取液：60mL×1瓶，4℃保存；
試劑一：20mL×1瓶， 4℃保存；
試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存；
試劑三：粉劑×1瓶，-20℃保存；
試劑四：粉劑×1 瓶, 4℃保存。用時加入25mL蒸餾水，溶解后4℃可保存一周。
試劑五：粉劑×1瓶, 4℃保存。用時加入25mL蒸餾水，溶解后4℃可保存一周。
試劑六：液體 25mL×1 瓶，室溫保存。
試劑七：10μmol/mL 標準磷貯備液 10mL×1 瓶，4℃保存。
樣本的前處理：
1、細菌或培養(yǎng)細胞：先收集細菌或細胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液），超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
2、組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
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