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在ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)過(guò)程中往往會(huì)有不盡人意的地方,造成ELISA實(shí)驗(yàn)背景過(guò)高的主要原因有哪些呢?
1)不正確的洗滌不充分或省略洗滌步驟中的任何一步均會(huì)導(dǎo)致背景色過(guò)高。
解決方法:檢查洗滌緩沖液的體積并確保完成所有的洗滌步驟;確保洗滌緩沖液的正確稀釋和正確使用。
2)底物污染確保在使用前,底物不被金屬離子或氧化劑污染;在實(shí)驗(yàn)時(shí)留存一些額外的底物,底物本身不應(yīng)該有顏色。
3)底物曝光會(huì)使底物變成藍(lán)色,因此在加入板內(nèi)之前要保存在暗處(即試劑瓶?jī)?nèi))。
4)錯(cuò)誤的孵育時(shí)間和溫度必須嚴(yán)格按照產(chǎn)品說(shuō)明書來(lái)定孵育時(shí)間和溫度。
ELISA試劑盒注意事項(xiàng):
1.待檢標(biāo)本如為血清,應(yīng)采用一次性容器,血液采集后盡快(6小時(shí)以內(nèi))分離血清。
2.封閉液或抗體稀釋液應(yīng)新鮮配制或凍存。
以上幾點(diǎn)相信你的ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)會(huì)非常順利了。如有疑問(wèn)咨詢。
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