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 方案1 : 醫(yī)院細(xì)菌室常規(guī)的檢測(cè)項(xiàng)目匯總

      細(xì)菌室常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目：
一 、形態(tài)學(xué)檢查（Morphological Examination）
（一）各種染色 
1、革蘭染色（Gram stain）：將細(xì)菌分為革蘭陽(yáng)性菌如葡萄球菌屬，鏈球菌屬等；革蘭陰性菌如大腸埃希菌沙門(mén)菌，志賀菌等。
2、抗酸染色(Acid-fast stain)：通過(guò)染色將細(xì)菌分為兩大類(lèi)：抗酸性細(xì)菌和非抗酸性細(xì)菌，抗酸性細(xì)菌種類(lèi)較少，如結(jié)核分枝桿菌，麻風(fēng)分枝桿菌等。正常：未見(jiàn)?？顾崛旧?，找到紅色分枝桿菌，及報(bào)告“找見(jiàn)抗酸分枝桿菌”，量可以用加號(hào)表示：
        ++++   每個(gè)視野>10根
        +++    每個(gè)視野發(fā)現(xiàn)1～10根
     ++     100個(gè)視野發(fā)現(xiàn)10～99根
     +      300個(gè)視野發(fā)現(xiàn)3～9根
     ±     300個(gè)視野發(fā)現(xiàn)1～2根
3、異染顆粒染色（Metachromatic granula stain）：用于檢查棒狀桿菌。
4、墨汁染色（Indian ink negative staining）：用背景著色，而細(xì)菌本身不著色的染色方法，用于腦脊液中查找新生隱球菌。正常：未見(jiàn)。
5、鞭毛染色（Flagella stain）：鞭毛的數(shù)目和位置隨細(xì)菌種類(lèi)而不同，可分為周毛菌、單毛菌、雙毛菌和叢毛菌，是細(xì)菌分類(lèi)和鑒定的重要依據(jù)。如霍亂弧菌是單鞭毛菌。
6、莢膜染色（Capsules stain）：莢膜是細(xì)菌壁外一層粘液性多聚物，賦予致病菌的侵襲力。染色將莢膜染成與菌體不同顏色，可作為細(xì)菌鑒定的依據(jù)。如肺炎鏈球菌。
（二）涂片檢測(cè)(smear)                               
1、便球桿比檢查( stool cocus/bacillus)：即革蘭陽(yáng)性球菌與革蘭陰性桿菌之比。
正常值：便球桿比：1:3
臨床意義：健康人腸道內(nèi)寄居著大量厭氧菌和小部分需氧菌。除人乳喂養(yǎng)的嬰兒腸道內(nèi)以革蘭陽(yáng)性球菌為主外，其余人均以革蘭陰性桿菌占優(yōu)勢(shì)。在腸道發(fā)生致病菌如沙門(mén)、志賀、弧菌感染時(shí)往往由于使用抗生素而是革蘭陰性桿菌受到抑制，此時(shí)球菌/桿菌比值有可能變大。若比值顯著增大，常提示腸道菌群紊亂或發(fā)生二重感染。
2、標(biāo)本真菌涂片（fungi）：經(jīng)革蘭染色如發(fā)現(xiàn)革蘭陽(yáng)性卵圓形芽生孢子或假菌絲，可初步報(bào)告為：找到真菌孢子和菌絲。
正常值：未見(jiàn)真菌。
3、痰涂片檢查（sputum smear）：
臨床意義：目的確定標(biāo)本是否適合做細(xì)菌培養(yǎng)，初步判定是否有致病菌存在。首先應(yīng)確定標(biāo)本是否為來(lái)自下呼吸道的痰，其標(biāo)準(zhǔn)為革蘭染色WBC>25/LPF(低倍視野),上皮細(xì)胞<10/LPF。有些細(xì)菌可做初步判斷：
1)  肺炎鏈球菌：革蘭染色為陽(yáng)性球菌，成雙或短鏈狀排列
2)  結(jié)核分枝桿菌：抗酸染色，找到紅色分枝桿菌，及報(bào)告“找見(jiàn)抗酸分枝桿菌”，量可以用加號(hào)表示：
       ++++   每個(gè)視野>10根
       +++    每個(gè)視野發(fā)現(xiàn)1～10根
++     100個(gè)視野發(fā)現(xiàn)10～99根
+      300個(gè)視野發(fā)現(xiàn)3～9根
±     300個(gè)視野發(fā)現(xiàn)1～2根
3)  真菌：經(jīng)革蘭染色如發(fā)現(xiàn)革蘭陽(yáng)性卵圓形芽生孢子或假菌絲，可初步報(bào)告為：找到真菌孢子和菌絲。
4)  放線(xiàn)菌及奴卡菌：革蘭染色后，插件中央部分菌絲為革蘭陽(yáng)性，而四周放射的末梢菌絲為革蘭陰性，切部分菌株有抗酸性?？蓤?bào)告：找見(jiàn)疑似放線(xiàn)菌或奴卡菌。

二 、細(xì)菌分離培養(yǎng)（Isolation and Culture of bacteria）                    
1、血培養(yǎng) (blood culture)：
臨床意義：正常人體的血液是無(wú)菌的,當(dāng)人體局部感染向全身播散和出現(xiàn)全身感染時(shí),血液中可出現(xiàn)細(xì)菌,依據(jù)程度不同稱(chēng)為菌血癥或敗血癥.菌血癥往往需要以多次血培養(yǎng)證實(shí),如表皮葡萄球菌,即可是致病菌,也是較常見(jiàn)的污染菌.
正常：無(wú)菌生長(zhǎng)。zui終陰性報(bào)告時(shí)間為7天。亞急性心內(nèi)膜炎患者標(biāo)本如5～6天無(wú)菌生長(zhǎng)，應(yīng)繼續(xù)培養(yǎng)至2周方可報(bào)告陰性結(jié)果。布魯氏菌培養(yǎng)第3周做出zui終陰性報(bào)告。厭氧菌培養(yǎng)應(yīng)在第2周做出zui終陰性報(bào)告。真菌血癥應(yīng)在第3周做出zui終陰性報(bào)告。結(jié)核血培養(yǎng)應(yīng)在第6周做出zui終陰性報(bào)告。                
2、尿液培養(yǎng)（urine culture）：
臨床意義：正常人體膀胱中的尿液是無(wú)菌的，用膀胱穿刺取出的尿液應(yīng)是無(wú)菌的。當(dāng)尿液經(jīng)尿道排出體外，受到尿道中細(xì)菌的污染而混有細(xì)菌。取經(jīng)尿道排出的中斷尿，細(xì)菌數(shù)不會(huì)超過(guò)104-5ml，因而，以此界限作為診斷泌尿道系感染的依據(jù)。
尿液培養(yǎng)反映腎臟、尿道、前列腺等的炎癥變化，幫助臨床選擇有效抗菌藥物。正常48小時(shí)仍無(wú)菌生長(zhǎng)可做zui終陰性報(bào)告。24小時(shí)如有細(xì)菌生長(zhǎng)即做細(xì)菌鑒定及藥敏。
3、痰培養(yǎng)：（sputum culture）：
臨床意義：痰中的病原菌不少屬于機(jī)會(huì)致病菌，與正常菌群同在，在報(bào)告時(shí)應(yīng)做說(shuō)明。對(duì)于機(jī)會(huì)致病菌，一般僅當(dāng)其數(shù)量超過(guò)正常菌群時(shí)才可報(bào)告鑒定結(jié)果及藥敏試驗(yàn)結(jié)果。
檢出致病菌時(shí)，除報(bào)告該菌的鑒定名稱(chēng)外，還需同時(shí)報(bào)告正常菌群情況。通常以報(bào)告甲型鏈球菌和奈瑟氏菌作為正常菌群存在的指標(biāo)。
如：甲型鏈球菌+
    奈瑟氏菌  +
    肺炎克雷伯氏菌2+
此報(bào)告表明肺炎克雷伯氏菌在數(shù)量上多于正常菌群，診斷為病原菌。未檢出致病菌時(shí)，應(yīng)報(bào)告“正常菌群”。
4、咽拭子培養(yǎng)（pharynx swab culture）：
臨床意義：鼻、咽部的細(xì)菌感染病原菌源于口腔，口腔中既有需氧菌，也有厭氧菌。同痰培養(yǎng)一樣，病原菌不少屬于機(jī)會(huì)致病菌，與正常菌群同在，要正確區(qū)分。未檢出致病菌時(shí)，應(yīng)報(bào)告“正常菌群”。
5、穿刺液標(biāo)本（包括胸腹水、關(guān)節(jié)液、心包液）的培養(yǎng)（Serous Cavity Effusion culture）：
臨床意義:正常的穿刺液是無(wú)菌的，有感染的情況下，只要檢出細(xì)菌，通常都可視為是病原菌。正常：無(wú)菌生長(zhǎng)。
6、糞便培養(yǎng)（stool culture）：
臨床意義：一方面從腸道大量細(xì)菌中找出致病菌，對(duì)腸道疾病進(jìn)行病原學(xué)診斷并通過(guò)藥敏試驗(yàn)為臨床提供合適的用藥；另一方面可對(duì)腸道菌群進(jìn)行監(jiān)測(cè)，在疾病治療中預(yù)防菌群紊亂。正常：未檢出致病菌。
7、腦脊液培養(yǎng)(CSF culture)：
臨床意義：正常人體腦脊液是無(wú)菌的。
當(dāng)人體患有腦脊髓膜炎時(shí),在腦脊髓液中可以出現(xiàn)病原菌。常見(jiàn)的病原菌有細(xì)菌、真菌和結(jié)核菌等。正常：無(wú)菌生長(zhǎng)。
8、化膿及創(chuàng)傷感染標(biāo)本的培養(yǎng)（Purulent Secretion Culture）: 
臨床意義：組織或器官的化膿性感染,其病原菌的來(lái)源可以分為兩類(lèi)；
內(nèi)源性:感染源是炎癥局部周?chē)钠鞴僦械恼＞?常在菌群),由于損傷等因素造成常在菌群進(jìn)入無(wú)菌狀態(tài)的組織內(nèi),發(fā)生感染.
外源性:感染源是存在于人體外部自然界的微生物,由于外傷和直接接觸,外界微生物通過(guò)人體表面進(jìn)入人體,造成感染.
常見(jiàn)細(xì)菌有*、鏈球菌、消化鏈球菌；陽(yáng)性桿菌有炭疽芽孢桿菌、破傷風(fēng)梭菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌、潰瘍棒狀桿菌；陰性桿菌有腸桿菌、嗜血桿菌、產(chǎn)堿桿菌、假單胞菌、無(wú)色桿菌、擬桿菌、弧菌、氣單胞菌；其他有放線(xiàn)菌、奴卡氏菌、念珠菌、結(jié)核分枝桿菌。
三、手工試驗(yàn)                           
1、觸酶試驗(yàn)(catalase test)：具有觸酶（過(guò)氧化氫酶）的細(xì)菌，能催化過(guò)氧化氫，放出新生態(tài)氧，繼而生成分子氧出現(xiàn)氣泡。
2、凝固酶試驗(yàn)（coagulase test）：*產(chǎn)生的結(jié)合凝固酶，結(jié)合在細(xì)胞壁上，使血漿中的纖維蛋白原變成纖維蛋白附著于細(xì)菌表面，發(fā)生凝集反應(yīng)。
3 、CAMP試驗(yàn)：B群鏈球菌具有“CAMP”因子，能促進(jìn)葡萄球菌β溶血素的活性，使兩種細(xì)菌在劃線(xiàn)處呈現(xiàn)箭頭形透明溶血區(qū)。
4 、Optochin敏感試驗(yàn)：Optochin（ethylhydrocupreine，乙基氫化去甲奎寧的商品名）可干擾肺炎鏈球菌*的生物合成，抑制該菌的生長(zhǎng)，故肺炎鏈球菌對(duì)其敏感，其他鏈球菌對(duì)其耐藥。
5、氧化酶試驗(yàn)( oxidase test): 該試紙條適用于G-桿菌的氧化酶實(shí)驗(yàn)。具有氧化酶的細(xì)菌，首先使*氧化，再由氧化型*使鹽酸對(duì)二甲氨基苯胺氧化，并與α萘酚結(jié)合，生成靛酚藍(lán)而成藍(lán)色。用于初步判斷奈瑟氏菌屬及腸桿菌科的非發(fā)酵菌。
6、超廣譜β-內(nèi)酰胺酶的測(cè)定（ESBLS檢測(cè)）:有些大腸和肺克能產(chǎn)生超廣譜β-內(nèi)酰胺酶，他不僅能水解*代和第二代*，還能水解第三代*類(lèi)抗生素，如*、*等和單酰胺酶，使其失去抗菌作用，但對(duì)碳青霉烯類(lèi)無(wú)明顯作用。
7、 MRSA和MRS檢測(cè)：用30ug紙片的*的藥敏結(jié)果及新的折點(diǎn)能預(yù)測(cè)mecA介導(dǎo)的耐藥。
8 、D－試驗(yàn)：大環(huán)內(nèi)脂類(lèi)耐藥的葡萄球菌可以改變、誘導(dǎo)*耐藥 。由erm基因?qū)е?nbsp;23S rRNA 甲基化耐藥，與大環(huán)內(nèi)脂類(lèi), *, 和 * B型有交叉，又叫 MLSB 耐藥，或只耐大環(huán)內(nèi)脂類(lèi) (msrA 基因編碼的泵出機(jī)制  )
四、血清學(xué)檢測(cè)
1、肥達(dá)氏反應(yīng)（Widal）：
正常值：H：<1：80；  O：1<：80；  甲：<1：80；  乙：<1：80；丙：<1：80
臨床意義：用標(biāo)準(zhǔn)傷寒、副傷寒菌液與稀釋的待檢測(cè)血清反應(yīng)，根據(jù)凝集效價(jià)判定血清中有無(wú)抗傷寒或抗副傷寒桿菌的抗體。在病程的不同時(shí)期相隔5-7天，連續(xù)進(jìn)行血清學(xué)檢查，如果血清滴度隨之增高4倍或4倍以上就更有診斷價(jià)值。
2、外斐氏反應(yīng)(Weil-Felix)：
正常值：OX19：<1：80  ；OXK： <1：80
臨床意義：用與立克次氏體有共同的抗原成分的變形桿菌X19、X2、Xk菌株的O抗原與被檢血清作交叉凝集反應(yīng)，借以診斷斑疹傷寒、恙蟲(chóng)病等立克次氏體病。一般認(rèn)為凝集價(jià)>1：80即有診斷意義.更為重要的是此種試驗(yàn)的凝集滴度隨病程發(fā)展而很快上升(在發(fā)病兩周末可升高數(shù)倍),到恢復(fù)后期又明顯下降。
3、結(jié)核抗體的檢測(cè)(TB-CHECK-1)
正常值：陰性
臨床意義：快速、定性的過(guò)篩試驗(yàn)，能特異性地檢測(cè)出活動(dòng)性結(jié)核病人血清、血漿或全血中的抗結(jié)核桿菌抗體。主要檢測(cè)IgG和IgA，高濃度的IgM亦可被檢出。接種過(guò)疫苗的人體試驗(yàn)不起反應(yīng)。
4、支原體培養(yǎng) （解脲支原體UU或人型支原體MH）
正常值：陰性
臨床意義：現(xiàn)已從人類(lèi)泌尿生殖道分離出來(lái)7種支原體，其中分離率較高而與泌尿生殖道疾病有關(guān)，是解脲支原體，其次是人型支原體。人型支原體（M.humenis，MH）、解脲支原體（Ureaplasma urealyticum，UU）和生殖器支原體（M.genitalium，MG）都會(huì)引起泌尿生殖道感染。UU與新生兒疾病與成人泌尿生殖道系統(tǒng)炎癥疾病有關(guān)，傳播途徑為性接觸和母嬰接觸，因此UU感染列為性傳播疾病常引起非淋菌性尿道炎，慢性前列腺炎和附睪炎，不育不孕，染等。MH主要引起泌尿生殖系統(tǒng)感染包，急性腎盂腎炎，及宮頸炎等。在健康人群中，可能有U.u或M.h寄生，但<103CCU/ml，故本試劑盒檢測(cè)結(jié)果為陰性。檢測(cè)到≥104CCU/ml 的 U.u或M.h有較明確臨床意義，一般需用藥治療。103～104CCU/ml的 U.u或M.h，提示支原體輕度感染，供醫(yī)生診斷治療時(shí)參考。
7、革蘭陰性菌脂多糖（LPS）檢測(cè)：體液內(nèi)毒素測(cè)定（鱟試驗(yàn)）
正常范圍：<10Pg/ml
臨床意義：細(xì)菌內(nèi)毒素作為革蘭陰性菌細(xì)胞壁zui外層結(jié)構(gòu)之一,具有多種生物效應(yīng)，微量?jī)?nèi)毒素進(jìn)入機(jī)體后,將會(huì)產(chǎn)生發(fā)燒、休克及內(nèi)毒素血癥等臨床癥狀。以鱟實(shí)驗(yàn)來(lái)檢測(cè)內(nèi)毒素，能對(duì)內(nèi)毒素血癥、革蘭氏陰性細(xì)菌敗血癥和革蘭氏陰性細(xì)菌感染的病人做出早期診斷和治療。
8、真菌（1-3）-β-D-葡聚糖檢測(cè)(G試驗(yàn)) 
正常范圍：<10Pg/ml
臨床意義：所有真菌的細(xì)胞壁上都含有（1-3）-β-D-葡聚糖，而其他微生物、動(dòng)物及人的細(xì)胞成分和細(xì)胞外液都不含這種成分，因此在機(jī)體的體液中檢測(cè)到（1-3）-β-D-葡聚糖時(shí)診斷侵襲性真菌感染的有效依據(jù)。
9、嗜異性凝集檢試驗(yàn)：
正常值：陰性或凝集價(jià)<1：8
臨床意義：傳染性單核細(xì)胞增多癥的病原體是EB病毒，病人血清中可測(cè)到嗜異性凝集和抗EB病毒的抗體，此試驗(yàn)可診斷此病。凝集價(jià)有較大增高見(jiàn)于：血清病、何杰金氏病和日本血吸蟲(chóng)感染的急性期。 當(dāng)凝集價(jià)達(dá)到1：224以上時(shí)可結(jié)合病人臨床癥狀確診為傳染性單核細(xì)胞增多癥。約10%的病人試驗(yàn)為陰性，以?xún)和蛬雰簽橹鳌?nbsp;
10、布氏桿菌凝集試驗(yàn)（Bacterium burgeri agglutination test）：
正常值：陰性
臨床意義：是應(yīng)用已知菌株檢測(cè)血清中特異性抗體，目前仍是標(biāo)準(zhǔn)診斷布氏病的血清學(xué)方法。感染2周后陽(yáng)性率可達(dá)90%，3～5周時(shí)，效價(jià)zui高，1：160以上有診斷意義，動(dòng)態(tài)觀察升高4倍以上更有意義。其對(duì)人體感染的陽(yáng)性檢出率為：急性期為94.85%；亞急性期為87.50%；慢性期為61.11%。隨著病程的延長(zhǎng)和康復(fù),血清中特異性抗體效價(jià)逐漸降低，但亦有持續(xù)價(jià)達(dá)數(shù)年之久。影響該實(shí)驗(yàn)的因素除影響抗原抗體反應(yīng)常見(jiàn)因素外,嚴(yán)格掌握診斷菌的濃度十分重要.診斷菌液的濃度越大,敏感性越低,反之敏感性提高。另外，某些細(xì)菌感染，如傷寒、霍亂等可有交叉反應(yīng)。
11、新型隱球菌抗原檢測(cè)（Cryptococcus neoformans antigen detect）
臨床意義：定性和半定量檢測(cè)新型隱球菌在血清和腦脊髓液中的莢膜多聚糖抗原。 隱球菌抗原經(jīng)常存在于肺部隱球菌病人的血清中以及中樞神經(jīng)系統(tǒng)病人的血清和腦 脊液中?，F(xiàn)在所有隱球菌病例中幾乎50%是發(fā)生在HIV陽(yáng)性患者身上。除了AIDS患 者之外，隱球菌還會(huì)很罕見(jiàn)的發(fā)生在普通人身上，以及由于有紅斑狼瘡、肉樣瘤病、白血病、淋巴瘤、庫(kù)欣病等潛在疾病或因皮質(zhì)激素、細(xì)胞毒素藥物和移植實(shí)驗(yàn)等抑制性治療而消弱免疫系統(tǒng)的人身上。