ELISA試劑盒酶免疫測(cè)定(enzymeimmunoassay)可分為均相(homogenous)和非均相(heterogenous)兩種類型。在均相EIA中可不需進(jìn)行游離的和的符號(hào)物的別離而直接測(cè)定符號(hào)物。ELISA試劑盒例如在某種條件下，抗原抗體反響后形成的酶符號(hào)抗原抗體復(fù)合物中的酶失掉其對(duì)底物效果的生機(jī)，因而測(cè)出的酶生機(jī)直接反映游離的酶符號(hào)物。
均相EIA在查驗(yàn)中較少使用。非均相EIA需*行游離的和的符號(hào)物的別離。如前所述，固相載體可用作一種別離手法。這種固相酶免疫測(cè)定辦法在1971年開(kāi)始建立時(shí)稱為酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定(enzymelinked immunosorbent assay)，簡(jiǎn)稱ELISA，在國(guó)內(nèi)有譯作酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)的，盡管意義不*切當(dāng)，但已慣用。如上所述，免疫測(cè)定是一種很靈敏的測(cè)定辦法，抗原抗體反響后直接測(cè)定形成的沉積或濁度，靈敏度可達(dá)5~10μg/ml，但在臨床查驗(yàn)中，某些待測(cè)物在標(biāo)本中的含量遠(yuǎn)低于這一水平，因此要尋覓添加靈敏度的辦法。
ELISA試劑盒符號(hào)的免疫測(cè)定是將檢查試劑中的抗原或抗體用可微量測(cè)定的物質(zhì)加以符號(hào)，通過(guò)測(cè)定符號(hào)物來(lái)進(jìn)步靈敏度。在放射免疫測(cè)定和酶免疫測(cè)定中，符號(hào)物分別為放射性核素和酶，zui后用測(cè)定放射性和酶生機(jī)來(lái)核算待檢物的量，靈敏度可比直接測(cè)定沉積物進(jìn)步數(shù)百至數(shù)千倍。可是這種特異性也不是的。倘若兩種化合物有著有些一樣的構(gòu)造，ELISA試劑盒在抗原抗體反響中可出現(xiàn)穿插反響。例如：絨毛膜*(hCG)和黃體生成激素(LH)均由α和β兩個(gè)亞單位組成，其構(gòu)造的不一樣處在β亞單位，而兩者的α亞單位是同類的。用hCG免疫動(dòng)物所得的抗血清中含有抗α-hCG和抗β-hCG兩種抗體，抗α-hCG抗體將與LH中的
α酶位發(fā)作穿插反響。在臨床查驗(yàn)中，如用抗hCG抗血清作為確診試劑檢定尿液中hCG，只能用于hCG濃度較高的實(shí)驗(yàn)，不然婦女生理性排泄入尿液中的微量LH將與之發(fā)作穿插反響。因此在作為早孕確診(靈敏度應(yīng)到達(dá)50mIu/mlhCG)的實(shí)踐中有必要使用只對(duì)hCG特異的抗β-hCG，以避免與其它激素的穿插反響的發(fā)作。
在測(cè)定血清中某一物質(zhì)的含量時(shí)，化學(xué)比色法的靈敏度為mg/ml水平，酶反響測(cè)定法的靈敏度約為5~10μg/ml，免疫測(cè)定中凝膠分散法和濁度法的靈敏度與酶反響法相仿。符號(hào)的免疫測(cè)定的靈敏度可進(jìn)步數(shù)千倍，達(dá)ng/ml水平。例如，用放射免疫測(cè)定法或酶免疫測(cè)定法測(cè)定HBsAg，其靈敏度可達(dá)0.1ng /ml。
ELISA試劑盒因?yàn)楦鞣N抗原成份，包含小分子的半抗原，均可用以制備特異性的抗血清或單克隆抗體，使用此抗體作為試劑就可檢查標(biāo)本中相應(yīng)的抗原，ELISA試劑盒因此免疫測(cè)定的使用范圍極廣，在臨床查驗(yàn)中可用于測(cè)定：
1) 體液中的各種蛋白質(zhì)，包含含量極少的蛋白質(zhì)如甲胎蛋白等。
2) 激素，包含小分子量的甾體激素等。
3) 抗生素和藥物。
4) 病原體抗原，HBsAg、HBeAg等。
5) 別的，也可使用純化的抗原檢查標(biāo)本中的抗體，例如抗-HBs等。