哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)一般需加入一定量血清，以提供必要的營養(yǎng)成分和細(xì)胞調(diào)節(jié)因子。但是實(shí)際生產(chǎn)時(shí)很難保證不同批次間血清的一致性，而且血清對哺乳動物細(xì)胞存在潛在的毒性作用和外源污染等。為了避免不同批次間血清的質(zhì)量變動，提高細(xì)胞培養(yǎng)和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性，避免血清對細(xì)胞的毒性作用和血清源性污染等，很多細(xì)胞培養(yǎng)基開發(fā)商開始研究開發(fā)無血清細(xì)胞培養(yǎng)基，即在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入某些組分來替代血清。因此我們首先需要分析檢測添加了血清的培養(yǎng)基和未添加血清的培養(yǎng)基之間的差異性，盡可能多地分析培養(yǎng)基中各組分的相對含量以及不同組分間的配比。
為滿足快速全面分析細(xì)胞培養(yǎng)上清液組分，將基礎(chǔ)碳源、氮源、核苷酸酸、維生素和其他主要代謝物一起檢測分析，得到更多有關(guān)生物過程中的詳細(xì)信息，我們開發(fā)出“細(xì)胞培養(yǎng)上清液方法包”。該技術(shù)平臺采用超液相色譜三重四極桿液質(zhì)聯(lián)用儀，僅需17分鐘，即可同時(shí)監(jiān)測分析95種細(xì)胞培養(yǎng)上清液營養(yǎng)成份和代謝物的相對豐度變化。本文使用島津超液相色譜儀LC-30A和三重四極桿質(zhì)譜LCMS-8050聯(lián)用，利用“細(xì)胞培養(yǎng)上清液方法包”建立了哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)和細(xì)胞代謝物的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜的同時(shí)分析方法，供相關(guān)人員參考。
島津三重四極桿質(zhì)譜LCMS-8050
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