開發(fā)合適的培養(yǎng)基配方與優(yōu)化細胞培養(yǎng)條件是生物技術(shù)藥物生產(chǎn)工藝的核心內(nèi)容之一。適宜的培養(yǎng)基組成與優(yōu)選的細胞培養(yǎng)條件對于提高重組蛋白類藥物的產(chǎn)率，保證產(chǎn)品批次之間的一致性、穩(wěn)定關(guān)鍵質(zhì)量屬性等因素至關(guān)重要，尤其是ADC、Bi-specific、Fc Fusion Protein等相對分子量大、結(jié)構(gòu)復(fù)雜的抗體類藥物，對其重要性不言而喻。對于培養(yǎng)基生產(chǎn)商和自行配制培養(yǎng)基的細胞培養(yǎng)公司而言，了解培養(yǎng)基中各組分在培養(yǎng)過程中的變化以及對目標產(chǎn)物質(zhì)量和產(chǎn)量的影響至關(guān)重要，因此我們需要盡可能多的了解培養(yǎng)基配方中各組分的含量在整個細胞培養(yǎng)過程中的變化趨勢。
目前生物過程工藝開發(fā)與優(yōu)化偏重于檢測常規(guī)的溫度、攪拌、氣體溶解量和OD值等理化條件以及少數(shù)培養(yǎng)成分與代謝物的變化，缺乏對于細胞上清液組分直接、全面和快速的客觀動態(tài)數(shù)據(jù)分析，因此無法優(yōu)化調(diào)整細胞培養(yǎng)工藝條件和培養(yǎng)基中各組分配比。為滿足快速全面分析細胞培養(yǎng)上清液組分，將基礎(chǔ)碳源、氮源、核苷酸酸、維生素和其他主要代謝物一起檢測分析，得到更多有關(guān)生物過程中的詳細信息，我們開發(fā)出“細胞培養(yǎng)上清液方法包”。該技術(shù)平臺采用超液相色譜三重四極桿液質(zhì)聯(lián)用儀，僅需17分鐘，即可同時監(jiān)測分析下列95種細胞培養(yǎng)上清液營養(yǎng)成份和代謝物的相對豐度變化。
本文使用島津超液相色譜儀LC-30A和三重四極桿質(zhì)譜LCMS-8050聯(lián)用，利用“細胞培養(yǎng)上清液方法包”建立了藤黃桿菌培養(yǎng)上清液中營養(yǎng)物質(zhì)和細胞代謝物的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜的同時分析方法，供相關(guān)人員參考。
島津三重四極桿質(zhì)譜LCMS-8050
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