熒光顯微鏡標(biāo)本制作要求

（1）載玻片

載玻片厚度應(yīng)在0.8-1.2mm之間，太厚的玻片，一方面光吸收多，另一方面不能使激發(fā)光在標(biāo)本上聚焦。載玻片必須光亮清潔，厚度均勻，無(wú)明顯自發(fā)熒光，有時(shí)需用石英玻璃載玻片。細(xì)胞

（2）蓋玻片

蓋玻片厚度在0.17mm左右，光潔。為了加強(qiáng)激發(fā)光，也可用干涉蓋玻片，這是一種特制的表面鍍有若干層對(duì)不同波長(zhǎng)的光起不同干涉作用的物質(zhì)（如氟化鎂）的蓋玻片，它可以使熒光順利通過(guò)，而反射激發(fā)光，這種反射的激發(fā)光又可激發(fā)標(biāo)本。

（3）標(biāo)本

組織切片或其它標(biāo)本不能太厚，若太厚，激發(fā)光大部分消耗在標(biāo)本下部，而物鏡直接觀察到的上部不能充分激發(fā)。另外，細(xì)胞重疊或雜質(zhì)掩蓋，背景非特異染色引起的熒光影響結(jié)果判斷。

（4）封裱劑

封裱劑常用甘油，必須無(wú)自發(fā)熒光，無(wú)色透明，熒光的亮度在pH8.5～9.5時(shí)較亮，不易很快褪去。所以，常用甘油和0.5mol/L pH9.0～9.5的碳酸鹽緩沖液的等量混合液作封裱劑。如果用抗褪色劑封裱熒光染色標(biāo)本更有利于顯微攝影。配方是將P-次苯基二胺二氫氯100mg加入PBS10m1中，調(diào)pH至9.0～9.5，再加入甘油90ml，混勻，在室溫放置過(guò)夜，待其中小氣泡*消失即可使用。

（5）鏡油

一般暗視野熒光顯微鏡和用油鏡觀察標(biāo)本時(shí)，必須使用鏡油，使用特制的無(wú)熒光鏡油，可用甘油代替，液體石蠟也可用，只是折光率較低，對(duì)圖像質(zhì)量略有影響。對(duì)于落射光熒光顯微鏡BX60，Nikon E-1000無(wú)須鏡油。細(xì)胞