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南京信帆生物技術(shù)有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第11年

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ELISA檢測(cè)試劑盒的三種檢測(cè)方法

時(shí)間:2024/10/12閱讀:589
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  1. 雙抗體夾心法(Sandwich ELISA)
 
  原理:該方法使用兩個(gè)抗體,一個(gè)作為捕獲抗體固定在微孔板上,另一個(gè)作為檢測(cè)抗體帶有酶標(biāo)記。樣本中的目標(biāo)抗原被捕獲抗體固定后,檢測(cè)抗體與抗原結(jié)合,通過酶的底物反應(yīng)產(chǎn)生可檢測(cè)的信號(hào)。
 
  操作流程:樣本加入微孔板,與預(yù)包被的捕獲抗體結(jié)合;加入酶標(biāo)記的檢測(cè)抗體,與已結(jié)合的抗原結(jié)合;加入底物,產(chǎn)生顏色變化,通過顏色深淺定量分析抗原含量。
 
  2. 競(jìng)爭(zhēng)法(Competitive ELISA)
 
  原理:競(jìng)爭(zhēng)法中,樣本中的目標(biāo)抗原與已知濃度的抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合有限數(shù)量的抗體。樣本中抗原含量越高,結(jié)合到抗體上的標(biāo)記抗原就越少,產(chǎn)生的信號(hào)也就越弱。
 
  操作流程:將樣本和已標(biāo)記的抗原同時(shí)加入含有抗體的微孔板中,讓它們競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合抗體;洗去未結(jié)合的成分后,加入底物,通過顏色變化來(lái)定量分析樣本中的抗原含量。
 
  3. 間接法(Indirect ELISA)
 
  原理:間接法首先使用未標(biāo)記的抗體與樣本中的抗原結(jié)合,然后加入酶標(biāo)記的二抗(抗抗體)來(lái)識(shí)別并結(jié)合到一抗上。通過酶的底物反應(yīng)產(chǎn)生信號(hào),間接檢測(cè)目標(biāo)抗原。
 
  操作流程:樣本加入微孔板,抗原與板上的抗體結(jié)合;加入酶標(biāo)記的二抗,與一抗結(jié)合;加入底物,產(chǎn)生顏色變化,通過顏色深淺定量分析抗原含量。
 
  以上三種方法是ELISA檢測(cè)試劑盒中常見的檢測(cè)技術(shù),每種方法都有其特定的應(yīng)用場(chǎng)景和優(yōu)勢(shì)。選擇哪種方法取決于檢測(cè)的目的、樣本類型以及所需的靈敏度和特異性。
 
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