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南京信帆生物:凝集吸收實驗原理、材料和方法

時間:2016/4/20閱讀:1285
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一、原理

腸道桿菌中的許多細菌都有部分相同的抗原結(jié)構(gòu)。因之一種細菌可與另一種細菌相應的抗血清發(fā)生交叉凝集反應。用一種過量的細菌抗原與發(fā)生交叉凝集反應的抗血清相結(jié)合??蓪⑵涔餐贵w吸去,剩下抗體只能與特異性抗原起反應,這種實驗即稱凝集吸收實驗。

利用凝集吸收實驗可制備單價因子血清,以進行細菌抗原結(jié)構(gòu)的分析及鑒定菌型。

二、材料

1、免疫血清:1:10稀釋傷寒桿菌免疫血清。

2、菌液:腸炎桿菌菌液,傷寒桿菌菌液。

3、試管、吸管、毛細吸管。

三、方法

1、1/10稀釋傷寒桿菌免疫血清分別與腸炎桿菌與傷寒桿菌進行玻片凝集,可見傷寒免疫血清與兩種菌均有凝集,說明二菌具有共同抗原結(jié)構(gòu),故發(fā)生交叉凝集反應。

2、將一定量的腸炎桿菌菌液加入1:10稀釋傷寒桿菌免疫血清中,放37℃水浴箱中作用2小時,取出后離心沉淀,吸取上清夜,棄去沉淀。

3、將吸收過的上清夜與稀釋腸炎桿菌菌液做玻片凝集,觀察結(jié)果。如仍有凝集時則將此上清夜再加濃腸炎桿菌菌液進行吸收,方法如上。

4、重復吸收過的上清夜分別與稀釋腸炎桿菌及傷寒桿菌菌液進行玻片凝集。如與前者無凝集而與后者有凝集,則表示傷寒桿菌免疫血清中的抗腸炎抗體已被*吸收。

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