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糖原(glycogen)(C24H42O21)是一種動物淀粉,又稱肝糖或糖元,由葡萄糖結合而成的支鏈多糖,其糖苷鏈為α型。是動物的貯備多糖。
哺乳動物體內,糖原主要存在于骨骼肌(約占整個身體的糖原的2/3)和肝臟(約占1/3)中,其他大部分組織中,如心肌、腎臟、腦等,也含有少量糖原。低等動物和某些微生物(如:真菌)中,也含有糖原或糖原類似物。糖原結構與支鏈淀粉相似。
物質簡介:
糖原貯藏于肝細胞及肌細胞漿中,其形狀為大小不等的顆粒,遇碘則變褐色,易溶于水,機體壞死后,糖原即受到破壞,因此須采取新鮮標本,并及時固定。糖原不等于糖類,只是糖類的一種。糖類從組織化學技術的角度分類與生物化學的分類并非一致。從組織化學的角度,糖類可略分為多糖、中性糖液物質和酸性粘液物質及粘蛋白和粘脂質。多糖主指糖原,是由許多葡萄糖分子以糖苷鍵組成的聚合體。當機體死亡,即很快分解為葡萄糖。
動物和細菌細胞內貯存的多糖,*由葡萄糖組成。在動物體內以肝臟和骨骼肌中儲量zui豐富,與淀粉在植物中的作用相當。糖原在體內酶促作用下的合成和分解可維持血糖正常水平,細菌中糖原用于供能和供碳。干燥狀態(tài)下為白色無定形粉末,無臭,有甜味。與碘顯棕紅色,在430-490nm下呈現zui大光吸收。部分溶于水而成膠體溶液,不溶于乙醇。結構與支鏈淀粉相似,主要是α-D-葡萄糖,按α(1→4)糖苷鍵縮合失水而成,另有一部分支鏈通過α(1→6)糖苷鍵連接。用細算后淀粉酶水解時生成麥芽糖和葡萄糖??捎?0%氫氧化鈉處理動物肝臟,再加乙醇沉淀制備。
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測定意義:
糖原是由葡萄糖單位構成的高分子多糖,是糖的主要的儲存形式之一,主要貯存在肝和肌肉中作為備用能量,分別稱為肝糖原和肌糖原。肝糖原可調節(jié)血糖濃度,當血糖升高時可在肝臟合成糖原,血糖降低時,肝糖原則分解為葡萄糖以補充血糖。因此,肝糖原對維持血糖的相對平衡十分重要。肌糖原是肌肉中糖的儲存形式,在劇烈運動消耗大量血糖時,肌糖原不能直接分解成血糖,必須先分解產生乳酸,隨血液循環(huán)到肝臟,通過糖異生轉變?yōu)楦翁窃蚱咸烟恰?/span>
測定原理:
蒽酮法。利用強堿性提取液提取糖原,在強酸性條件下利用蒽酮顯色劑測定糖原含量。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、水浴鍋、可調式移液器、1mL 玻璃比色皿、濃硫酸(不允許快遞)和蒸
餾水。
試劑的組成和配制:
提取液:液體50mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:0.1mg/mL 的葡萄糖標準液 10mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×1 瓶, 4℃保存;
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糖原提?。?/strong>
1﹑細胞或細菌:收集500~1000 萬細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;加入0.75mL 提
取液超聲波破碎細菌或細胞(功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30 次);轉移至
10mL 試管中,95℃水浴20min(蓋緊,防止水分散失),隔5min 振搖試管1 次,使充分混
勻;取出試管冷卻后,用蒸餾水定容到5ml,混勻,8000g 25℃離心10min,取上清液待測。
2﹑組織:稱取0.1~0.2g 樣品,加入0.75ml 提取液充分勻漿;轉移至10ml 試管中;95℃水
浴20min(蓋緊,防止水分散失),隔5min 振搖試管1 次,使充分混勻;待組織全部溶解后,
取出試管冷卻后,用蒸餾水定容到5ml,混勻,8000g 25℃離心10min,取上清液待測。
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