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所 在 地南京市
更新時(shí)間:2023-01-29 20:33:08瀏覽次數(shù):1659次
聯(lián)系我時(shí),請告知來自 環(huán)保在線胰島素(INS) 放免試劑盒
胰島素是由胰臟內(nèi)的胰島β細(xì)胞受內(nèi)源性或外源性物質(zhì)如葡萄糖、乳糖、核糖、精安酸、胰高血糖素等的刺激而分泌的一種蛋白質(zhì)激素。
[使用目的] 用于定量測定人血清或血漿中胰島素(Ins)的濃度。
[用途] 胰島素的測定主要用于對(duì)糖尿病的分型,即通過胰島素釋放實(shí)驗(yàn),區(qū)分糖尿病的類型。 另外對(duì)于研究胰島素β細(xì)胞的分泌功能、胰島素瘤的分析、探討冠心病機(jī)理等也有一定的意 義。
[試驗(yàn)原理] 本品采用了第二抗體+聚已二醇沉淀法放射免疫分析試驗(yàn)原理:含胰島素(Ins)的樣 品和 125I 標(biāo)記的胰島素(Ins)與相應(yīng)的抗體反應(yīng)形成抗原抗體復(fù)合物。反應(yīng)后加入二抗及 PEG,使免疫復(fù)合物沉淀,離心,測沉淀放射性計(jì)數(shù)。通過標(biāo)準(zhǔn)曲線得到樣本中胰島素(Ins) 的濃度。
[使用前準(zhǔn)備] 試驗(yàn)前,恢復(fù)樣本至室溫,小心搖勻血清樣本。 [實(shí)驗(yàn)方法] 1、 將實(shí)驗(yàn)所需試劑及樣本放置室溫,凍干品按操作要求進(jìn)行溶解,平衡至少 30 分鐘 以上才可進(jìn)行操作; 2、 取 60X12mm 聚苯乙烯管進(jìn)行編號(hào),所有實(shí)驗(yàn)均做雙管重復(fù); 3、 每個(gè) NSB 管加入 200µl 溫育液,每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品“0”管 加入 100µl 溫育液; 4、 取每個(gè)濃度的標(biāo)準(zhǔn)品(A~F)、質(zhì)控血清和樣本 100µl 加入相應(yīng)編號(hào)的試管中; 5、 每管均各加入 100µl 標(biāo)記物工作液; 6、 每管均各加入 100µl 抗體工作液,充分混勻; 7、 37℃溫育 2 小時(shí); 8、 每管均各加入 500µl 分離劑后,充分混勻; 9、 室溫放置 15 分鐘后,離心 3500 轉(zhuǎn)/分,20 分鐘后,吸去或傾倒掉上清液; 10、 用 γ-計(jì)數(shù)器測定各管計(jì)數(shù) CPM. 推薦檢測時(shí)間: 1 分鐘; 11、 從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取樣本及質(zhì)控血清的濃度。
[實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)注意] 1、 γ-計(jì)數(shù)器本底計(jì)數(shù)應(yīng)≤100CPM/分,效率應(yīng)≥75%; 2、 加入放射性標(biāo)記物時(shí),應(yīng)做好防護(hù)、小心謹(jǐn)慎,以避免造成放射性污染; 3、 如果某一個(gè)樣本的測定值高于ZUI高濃度的標(biāo)準(zhǔn)品濃度,用零標(biāo)準(zhǔn)品以 1:2 或 1: 4 的比例稀釋樣本后重新測試,測試結(jié)果乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
[質(zhì)量控制] 每次實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)至少采用兩個(gè)濃度的質(zhì)控血清進(jìn)行質(zhì)量控制,以確保每次實(shí)驗(yàn)測定結(jié)果 的可靠性。 100 100 1、 質(zhì)控血清的平均值應(yīng)在允許范圍內(nèi); 2、 曲線方程應(yīng)采用*擬合方式; 3、 重復(fù)樣本的測定結(jié)果相差在 15%以內(nèi)。 如不能同時(shí)滿足以上條件,則此次試驗(yàn)結(jié)果無效,全部試驗(yàn)需重新進(jìn)行。
[測定結(jié)果的計(jì)算] 1、 計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)品(A~F)、質(zhì)控品和樣品與標(biāo)準(zhǔn)品 0 的比值(B/B0); 2、 劑量-反應(yīng)曲線按“對(duì)數(shù)劑量-結(jié)合率對(duì)數(shù)”(Log(dose-Log(B/Bmax))數(shù)學(xué)模型 或四參數(shù)數(shù)學(xué)模型擬合,通過每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品的 B/B0和其濃度建立標(biāo)準(zhǔn)曲線; 3、 從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出樣本的濃度值,B/B0不在標(biāo)準(zhǔn)曲線之內(nèi)的樣本及其濃度
[實(shí)驗(yàn)的局限性] 1、 本品僅供體外診斷使用,只能用于人血清或血漿樣本的測定而不能用于其他體 液樣本; 2、 通過其它方法得到的 T 值與本品測定結(jié)果不具有直接的可比性;
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