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豬羥化酶(PHD)ELISA試劑盒?洗滌方法

時間:2021/9/15閱讀:663
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豬羥化酶(PHD)ELISA試劑盒洗滌方法:

. 自動洗板機:每孔加入洗滌液350μl,注入與吸出間隔60秒。洗板5次。

2. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,在潔凈的吸水紙上拍干,每孔加洗滌液350μl,浸泡-2分鐘,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。

實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫;試劑或樣品配制時,均需充分混勻,并盡量避免起泡。

.加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?0μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品00μl,注意不要有氣泡,加樣時將樣品加于酶標(biāo)板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。給酶標(biāo)板覆膜,37℃孵育2小時。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.棄去液體,甩干,每個孔中加入Detection Ab工作液 00μl(在使用前5分鐘內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜,37℃溫育小時。

3.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡-2分鐘,大約350μl /每孔,甩干并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干。

4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前5分鐘內(nèi)配制)00μl,加上覆膜,37℃溫育小時。

5.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,方法同步驟3。

6.每孔加底物溶液00μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光孵育5分鐘左右(根據(jù)實際顯色情況酌情縮短或延長,但不可超過30分鐘。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔出現(xiàn)明顯梯度時,即可終止)。

7.每孔加終止液50μl,終止反應(yīng),此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。

8.立即用酶標(biāo)儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)。應(yīng)提前打開酶標(biāo)儀電源,預(yù)熱儀器,設(shè)置好檢測程序。

9.實驗完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結(jié)束。

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磷酸化真核翻譯起始因子4B抗體

真核翻譯起始因子4B抗體

磷酸化轉(zhuǎn)錄接頭蛋白EP300抗體

磷酸化上皮細胞癌轉(zhuǎn)化蛋白2抗體

磷酸化真核翻譯起始因子4G抗體

表皮生長因子受體5抗體

電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白β肽/黃素蛋白抗體

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轉(zhuǎn)錄因子E2F8抗體

內(nèi)皮單核細胞激活肽2抗體

細胞外基質(zhì)蛋白2抗體


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