WSZ-10地埋式污水處理設(shè)備型號(hào)

設(shè)備優(yōu)勢(shì)：公司生產(chǎn)的設(shè)備都是采用新工藝、新技術(shù)，如：AO工藝、AB工藝、A2O工藝、MBR工藝、MBBR工藝、SBR工藝等，保證出水高于國(guó)家要求排放標(biāo)準(zhǔn)。

污水類目?jī)?yōu)勢(shì)：公司處理污水種類涵蓋生活污水、醫(yī)療污水、屠宰污水、洗滌污水、餐飲污水、塑料清洗污水、養(yǎng)殖污水、農(nóng)村污水、電鍍污水、食品污水及相類似的工業(yè)污水。

本產(chǎn)品由feng于2019.7.11發(fā)布

城市生活污水主要是指城市生活中的各種餐廚污水、垃圾、糞便、洗滌劑等各種污染水體形成的混合污水，氮、磷、硫等營(yíng)養(yǎng)元素含量較高，微生物含量高，并且含原微生物[11, 12].生活垃圾填埋場(chǎng)是城市生活垃圾、污水廠的處置污泥、電子廢棄物、垃圾焚燒廠飛灰殘?jiān)裙腆w廢棄物的主要*終堆放場(chǎng)所.垃圾滲濾液是伴隨垃圾填埋場(chǎng)運(yùn)營(yíng)整個(gè)生命周期的“二次污染物”.生活垃圾滲濾液具有污染物成分復(fù)雜，污染物濃度高的特點(diǎn)，相較于城市生活污水，其高濃度的氨氮、有毒有害物質(zhì)，重金屬離子等特征形成了一個(gè)特殊環(huán)境，尤其是場(chǎng)齡大于5 a的垃圾滲濾液可生化性差[13].受人類生產(chǎn)生活的影響，城市生活污水和垃圾滲濾液中含有抗生素殘留以及抗生素抗性的微生物，被認(rèn)為是環(huán)境抗生素抗性的一個(gè)重要存儲(chǔ)庫(kù)[14~16].
　　由于垃圾滲濾深度處理后產(chǎn)生了難以處理的濃縮液，垃圾滲濾液(包括濃縮液)往往被運(yùn)送到城市生活污水處理廠進(jìn)行合并處理[13, 17].目前，城市生活污水處理過(guò)程中的抗生素抗性基因污染分布及演變有較多相關(guān)研究[18, 19]，并且主要是針對(duì)磺胺類、四環(huán)素類等少數(shù)幾種抗生素抗性基因.針對(duì)城市生活污水(接收垃圾滲濾液進(jìn)行合并處理)和生活垃圾滲濾液環(huán)境抗生素抗性的對(duì)比研究，從抗生素抗性譜的角度全面研究這兩者間的抗性基因污染還沒(méi)有或者比較少相關(guān)研究報(bào)道.因此，對(duì)城市生活污水和生活垃圾滲濾液中抗生素抗性種類、分布格局開(kāi)展對(duì)比研究，比較兩者之間的異同，綜合分析研究城市生活污水和垃圾滲濾液抗生素抗性基因污染狀況，對(duì)于加強(qiáng)城市生活污水和垃圾滲濾液管理與處置，評(píng)估兩者的生態(tài)安全和環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)顯得十分必要.
　　1 材料與方法
　　1.1 樣品采集及前處理
　　城市生活污水樣品于2015年7月采集自廈門市某污水處理廠(接收廈門市東部固廢處理中心生活垃圾填埋場(chǎng)部分的垃圾滲濾液和垃圾滲濾液處置后濃縮液)的進(jìn)水樣品1 L(3個(gè)采樣平行樣品)，其中添加了終濃度為50%乙醇進(jìn)行預(yù)處理，用于固定污水中微生物.生活垃圾滲濾液采樣地點(diǎn)位于廈門市東部固廢處理中心生活垃圾填埋場(chǎng)，于2015年7月采集了垃圾滲濾液調(diào)節(jié)池末端，也是滲濾液處理站污水進(jìn)口端樣品1 L(3個(gè)采樣平行樣品)，同樣在采集樣品中添加了乙醇進(jìn)行預(yù)處理.所采集的城市生活污水和生活垃圾滲濾液，存放在低溫采樣箱中并迅速轉(zhuǎn)移至實(shí)驗(yàn)室的-20℃冰箱中保存，用于環(huán)境樣品的DNA提取.
　　1.2 城市生活污水和生活垃圾滲濾液DNA提取
　　量取城市生活污水(raw wastewater，RWW)和生活垃圾滲濾液(raw leachate，RLC)各40 mL，分裝到50 mL離心管中，使用12 000 r ·min-1轉(zhuǎn)速離心10 min，倒掉上清液，每個(gè)離心管中再加入1 mL生理鹽水，振蕩并懸浮起離心管底部固體，從而達(dá)到清洗效果.再將離心管中的全部樣品分別轉(zhuǎn)移至新的1.5 mL離心管中，18 000 r ·min-1轉(zhuǎn)速離心后，棄去上清液.然后加入FastDNA? Spin Kit for Soil試劑盒(MP Biomedicals，美國(guó))中的PBS緩沖液(978 μL).
　　隨后將上述含有采集樣品的PBS緩沖液轉(zhuǎn)移至試劑盒中的Lysing Matrix E tube，按照生產(chǎn)商提供的方法提取樣品中的總DNA，然后用1%的瓊脂糖凝膠進(jìn)行電泳驗(yàn)證.樣品所提取的DNA樣品用QuantiFluor? dsDNA System(Promega Corporation，美國(guó))試劑盒測(cè)定雙鏈DNA濃度.根據(jù)測(cè)定的樣品DNA濃度，實(shí)驗(yàn)樣品用滅菌的超純水統(tǒng)一稀釋至50 ng ·μL-1.
　　1.3 高通量熒光定量PCR
　　采用SmartChip Real-Time PCR Systems(WaferGen Inc.，美國(guó))高通量熒光定量反應(yīng)平臺(tái).研究中所采用的293對(duì)引物在先前的相關(guān)的研究中被有效驗(yàn)證過(guò)[1].此外另外添加了1對(duì)用于檢定超級(jí)細(xì)菌抗生素抗性基因blaNDM-1的引物[20]，1對(duì)intI 1 整合子基因(class1 integron)引物[21]和1對(duì)CintI 1臨床醫(yī)學(xué)意義上的整合子基因(clinical class 1 integon)引物[22].
      PCR擴(kuò)增反應(yīng)的體積為100 nL.反應(yīng)體系中各試劑的終濃度為： 1×的LightCycler 480 SYBR? Green ⅠMaster Mix(Roche，美國(guó)), nuclease-free PCR-grade water，1 ng ·μL-1的BSA，5 ng ·μL-1的DNA模板，1 μmol ·L-1的上下游引物. PCR反應(yīng)條件為： 95℃預(yù)變性10 min;95℃變性30 s，60℃退火延伸30 s，總共40個(gè)循環(huán);儀器程序自動(dòng)升溫進(jìn)行熔解曲線分析.高通量定量PCR每個(gè)芯片都有不添加DNA模板的陰性對(duì)照. qPCR反應(yīng)得到的數(shù)據(jù)通過(guò)Cycler預(yù)設(shè)定的篩選條件(擴(kuò)增效率介于1.8~2.2)進(jìn)行導(dǎo)出.根據(jù)SmartChip Real-Time PCR Systems的靈敏度和度，確定循環(huán)次數(shù)CT值為31時(shí)作為儀器的檢測(cè)限.每個(gè)樣品都進(jìn)行3次技術(shù)重復(fù)實(shí)驗(yàn)，當(dāng)3次技術(shù)重復(fù)都被擴(kuò)增出來(lái)時(shí)認(rèn)為是陽(yáng)性擴(kuò)增，3個(gè)采樣平行樣品都是陽(yáng)性擴(kuò)增時(shí)，認(rèn)為樣品的目的基因被有效檢出.