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訪問次數(shù):2630更新時間:2017-07-06 16:12:41
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產(chǎn)品名稱:GIBCO血清,胎牛血清熱滅活廠家
試劑級別:細(xì)胞培養(yǎng)級
產(chǎn)品產(chǎn)地:GIBCO原裝
產(chǎn)品商標(biāo):GIBCO
產(chǎn)品規(guī)格:500ml/200ml/100ml
產(chǎn)品資料:實(shí)驗(yàn)方法技術(shù)資料
保存/運(yùn)輸:-5°C~-20°C
有效期限:請參閱產(chǎn)品標(biāo)簽
GIBCO血清,胎牛血清熱滅活廠家常見問題:
Q:如何正確解凍血清?
A:方法一:將冷凍血清從-20℃取出后,放置于4℃冰箱中過夜。次日,將血清轉(zhuǎn)移到37℃的水浴中,搖動瓶身以加速血清的溶解。方法二:直接將血清從-20℃取出后,放置于37℃水浴中,不斷搖晃瓶身使其加快解凍和混勻。
【注】解凍過程中,如果不晃動瓶身,當(dāng)溫度超過40℃的時候,血清可能會導(dǎo)致蛋白變性,析出沉淀。解凍后不宜在37℃水浴長時間放置。
Q:血清是否需要滅活?
A:對于大多數(shù)細(xì)胞的培養(yǎng)而言,是不需要的加熱滅活的。但在免疫學(xué)研究、ES細(xì)胞培養(yǎng)、昆蟲細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)時推薦使用滅活血清。加熱血清可以滅活血清中被激活的補(bǔ)體,但同時也會破壞熱不穩(wěn)定的蛋白。熱滅活血清對細(xì)胞的生長只有微小的促進(jìn)作用,甚至?xí)驗(yàn)闇缁畈划?dāng),破壞血清的品質(zhì),而抑制細(xì)胞的生長。
Q:血清滅活的方式?
A:按照正確的解凍方式*解凍血清,使其恢復(fù)到室溫。將血清分裝成50mL進(jìn)行滅活。對于一次需要滅活500mL的操作,可以將一個相同體積的容器放置在水浴鍋中,中間插入溫度計(jì),作為參考。當(dāng)溫度達(dá)到56℃時,加熱30min進(jìn)行滅活。
【注】在血清的加熱和滅活過程中需要不斷地進(jìn)行搖晃混勻。
Q:血清中含有的絮狀沉淀是什么?
A:正常血清有時候中會出現(xiàn)一些絮狀的沉淀,這些絮狀物一般是纖維蛋白和脂蛋白的沉淀,不會影響血清的品質(zhì),可以通過在4℃混勻后靜置1h,400g離心5min去除。
操作步驟:
血清通常在細(xì)胞培養(yǎng)中作為基礎(chǔ)生長培養(yǎng)基的添加劑。常用血清是胎牛血清(FBS),也稱FCS。胎牛血清是從適合人類衛(wèi)生習(xí)慣的農(nóng)場收集的。有時,也可能用其他的牛血清,如新生牛血清或者供體牛血清。在細(xì)胞培養(yǎng)中,血清供應(yīng)了豐富的高分子蛋白,低分子量營養(yǎng)物,疏水載體蛋白和其他體外細(xì)胞生長必要的成分如激素和粘附因子。同時,血清可以增加培養(yǎng)基的緩沖能力或中和有毒成分,起到保護(hù)細(xì)胞的作用。在細(xì)胞培養(yǎng)過程中是否選擇添加血清,主要根據(jù)基礎(chǔ)培養(yǎng)基化學(xué)成分,培養(yǎng)細(xì)胞的類型和培養(yǎng)體系而定。
1、采集
在胎牛血清生產(chǎn)過程中,全血使用無菌一次性塑料袋收集,待凝結(jié)后分離,收集和冷凍儲存血清??刂铺ヅQ宓某跏际占强刂苲ui終血清產(chǎn)品質(zhì)量的關(guān)鍵因素。只有初始原料符合我們的規(guī)范時才能允許生產(chǎn)。
2、血清原料
在市場存在兩個胎牛血清標(biāo)準(zhǔn):美國農(nóng)業(yè)部標(biāo)準(zhǔn)(USDA)和歐洲標(biāo)準(zhǔn)。美國農(nóng)業(yè)部標(biāo)準(zhǔn),原始血清必須采自未發(fā)生瘋牛?。˙SE)和口蹄疫(FMD)疫情的國家,才可自由進(jìn)口到任何國家,用于安全生產(chǎn)。而且研究者只有使用符合這種標(biāo)準(zhǔn)的血清,才被允許將其細(xì)胞和細(xì)胞產(chǎn)品送至其他同樣有嚴(yán)格進(jìn)口條款的國家,進(jìn)行合作交流。
3、處理過程
優(yōu)選數(shù)個批次凍存血清進(jìn)行解凍,檢驗(yàn)其內(nèi)毒素和血紅素的含量,滿足標(biāo)準(zhǔn)的才能在冷藏條件下充分混合繼續(xù)加工,進(jìn)一步進(jìn)行過濾除菌。NQBB依次通過預(yù)過濾和膜過濾來處理胎牛血清。zui后的過濾步驟為連續(xù)三次用100nm的濾膜過濾。過濾結(jié)束,血清采用無菌工藝進(jìn)行分裝,整個過程有效確保zui終產(chǎn)品無菌。血清生產(chǎn)的空氣潔凈度為100級。所有分裝工作臺都通過高效微??諝膺^濾器過濾,并保持正壓分裝環(huán)境,對總微粒、懸浮微粒數(shù)和壓力進(jìn)行監(jiān)控。分裝后,終產(chǎn)品迅速-20度凍存,并隔離,直到所有的質(zhì)量控制檢測完成。
4、FBS質(zhì)量控制
每批胎牛血清檢測確認(rèn)符合各項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn),并以書面的方式記錄在質(zhì)檢報(bào)告中。
5、質(zhì)量保證
胎牛血清生產(chǎn)過程在一個嚴(yán)格控制的條件下進(jìn)行。紫外線滅菌,過濾除菌和分裝是關(guān)鍵生產(chǎn)環(huán)節(jié),可以確保血清的品質(zhì)。與血清生產(chǎn)相關(guān)的數(shù)據(jù)作為專門的檔案記錄,從初步采集的原料到成品儲存的整個生產(chǎn)過程,以及質(zhì)量控制檢測和結(jié)果都有備案,并可以在監(jiān)控條件下追溯源文件。 胎牛血清生產(chǎn)過程遵循歐洲議會關(guān)于體外診斷的標(biāo)準(zhǔn)。