圖像流式細胞儀——流式細胞術(shù)的突破

 ImageStream是一種臺式多譜段成像流式細胞儀（Multispectral Imaging Flow Cytometry），能夠同時采集6個檢測通道中的細胞圖像。它將流式細胞檢測與熒光顯微成像結(jié)合于一身，既能提供細胞群的統(tǒng)計數(shù)據(jù)，又可以獲得單個細胞的圖像，從而提供細胞形態(tài)學、細胞結(jié)構(gòu)和亞細胞信號分布的信息。
    細胞分析實驗中，常用的兩種方法為顯微成像觀測和流式細胞術(shù)；但是幾乎所有的用戶都會為顯微成像觀測法分析細胞數(shù)量太有限、統(tǒng)計學分析非常繁瑣以及流式細胞術(shù)無法觀測細胞形態(tài)、結(jié)構(gòu)，無法定位熒光信號到特定部位而煩惱，但是從現(xiàn)在起，您大可不必為此煩惱了，位于美國華盛頓州西雅圖的Amnis公司生產(chǎn)的ImageStream 100很好地解決了這一問題，它將流式多色檢測技術(shù)和熒光顯微鏡圖像顯示技術(shù)集中在一個平臺上，提供了全新的細胞分析方法。
    與傳統(tǒng)流式細胞儀很類似，ImageStream也是由液流系統(tǒng)，光學系統(tǒng)和電子系統(tǒng)等三大部分組成。液流系統(tǒng)將樣本細胞懸液和系統(tǒng)鞘液注入流動室中，使細胞在鞘液流的約束下聚焦在液流的中心，逐個流過檢測窗口。光學系統(tǒng)中光源照射通過檢測窗口的細胞，從而產(chǎn)生光信號。光源分為兩種，其一是用于產(chǎn)生明場細胞圖像的鹵燈（Brightfield Illuminator），另一種是用于產(chǎn)生熒光細胞圖像的激光器。光源照射細胞產(chǎn)生的光信號被具有很大數(shù)值孔徑（NA：0.75）的物鏡收集，然后通過光路系統(tǒng)傳遞到由二向色鏡構(gòu)成的濾光片堆棧（Dichroic Filter Stack），光信號在這里被分成不同波段投射到一個六通道冷CCD上，產(chǎn)生一個明場細胞圖像，一個暗場細胞圖像（Side Scatter，SSC）及四個不同熒光通道的細胞圖像。ImageStream的光路系統(tǒng)能夠自動調(diào)整焦距，并實時測定細胞運動速度，而其冷CCD采用時間延遲積分方式（Time Delay Integration，TDI）進行信號采集，上述這些手段保證了系統(tǒng)采集到的細胞圖像的質(zhì)量。
    ImageStream系統(tǒng)還配有功能強大的數(shù)據(jù)分析軟件IDEAS，可以對每個細胞分析超過500種量化參數(shù)。這些參數(shù)不僅包括細胞整體的散射光和熒光信號強度，還包括對細胞形態(tài)，細胞結(jié)構(gòu)及亞細胞信號分布的分析。通過在細胞群體中對這些參數(shù)進行統(tǒng)計，分析軟件可以生成細胞群體的散點圖和柱狀圖，而這些統(tǒng)計數(shù)據(jù)與細胞圖像是*整合的，比如點擊散點圖上的點，就可以直觀的看到這個點代表的細胞的圖像。另外，使用者還能夠根據(jù)自身研究的特殊需要，進行自定義參數(shù)的設(shè)定，進行更深入的分析。
    ImageStream圖像流式細胞儀的應(yīng)用范圍十分廣泛，除了能夠完成傳統(tǒng)流式細胞儀能夠完成的工作，它還能進行亞細胞定位、細胞周期、高通量FISH分析、分子轉(zhuǎn)運示蹤、細胞內(nèi)吞等諸多傳統(tǒng)流式細胞儀不能完成的研究工作。