亚洲国产精品二区久久,日本美女后入式午夜视频在线观看,国产污视频在线观看,欧美日韩国产精品中文字幕在线观看

上海莼試生物技術(shù)有限公司
初級會員 | 第2年

13585831301

ELISA試劑盒
ATCC細(xì)胞
細(xì)胞
蛋白
生化試劑
標(biāo)準(zhǔn)品
擔(dān)體
中國藥典標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)
IBL試劑盒
*原時間試劑
血清
肉類及相關(guān)產(chǎn)品 實驗室耗材系列 細(xì)胞系列 抗體純化試劑 單抗、多抗研制用材料 細(xì)胞培養(yǎng)用材料和試劑 免疫分析相關(guān)試劑 免疫分析科研試劑盒 抗體純化試劑盒 抗血清系列 動物血漿系列 熱滅活血清系列 碳吸附過濾血清系列 培養(yǎng)細(xì)菌專用血清系列 動物血清系列(pet瓶) HRP標(biāo)記抗原 天然純化抗原 動物Ig類抗原 基因重組抗原 膠體金標(biāo)記一抗(多抗為抗原親和純化,單抗為G或A蛋白親和純化 ) HRP標(biāo)記二抗(抗原親和純化) HRP標(biāo)記一抗(多抗為抗原親和純化,單抗為G或A蛋白親和純化) 多克隆抗體二抗/PcAb(未標(biāo)注的為G或A蛋白親和純化) 多克隆抗體一抗/PcAb(未標(biāo)注的為G或A蛋白親和純化) 單克隆抗體二抗/McAb(G或A蛋白親和純化) 單克隆抗體一抗/McAb(G或A蛋白親和純化) 裂解血 抗凝動物血系列 脫纖維動物血系列 無菌過濾動物血清系列 輻照滅菌動物血清系列 無菌采制動物血清系列
科研抗體
PCR試劑盒
科研細(xì)胞
細(xì)胞生物學(xué)試劑

配制percoll細(xì)胞分離液

時間:2012/2/10閱讀:526
分享:

(一) 原理

Percoll是一種包有乙烯吡咯烷酮的硅膠顆粒。滲透壓很低(<20mosm/kg H2O), 粘度也很小,可形成高達(dá)1.3g/ml密度,采用預(yù)先形成的密度梯度時可在低離心力(200~1000g)于數(shù)分至數(shù)十分鐘內(nèi)達(dá)到滿意的細(xì)胞分離結(jié)果。由 于Percoll擴散常數(shù)低,所形成的梯度十分穩(wěn)定。此外,Percoll不穿透生物膜,對細(xì)胞無毒害,因此廣泛用于分離細(xì)胞、亞細(xì)胞成分、細(xì)菌及病毒, 還可將受損細(xì)胞及其碎片與完好的活細(xì)胞分離。

(二)操作方法及注意事項

1.不同濃度(密度)Percoll溶液的制備: 先用9份Percoll與1份8.5% NaCl或1.5MPBS混合達(dá)到生理性滲透壓,然后用生理溶液(0.85% NaCl或0.15M PBS)稀釋到所需濃度。

Percoll濃度(%)  70    60    50    40    30     20

比重g/ml   1.090 1.077 1.067 1.056 1.043 1.031

2.  不連續(xù)密度梯度Percoll層的制備: 先將試管壁用牛血清濕潤,除去多余血清,這種預(yù)處理可使逐層疊加的Percoll液平穩(wěn)沿管壁流下,使形成滿意的界面。在制備過程中一般用長針頭注射器從 高密度向低密度逐層放置,有時相鄰兩層Percoll比重相差不大時,可將Percoll液放入注射器中,小針頭斜面緊貼管壁,任其自然慢慢流下。

3. 裝樣:樣品體積和細(xì)胞濃度根據(jù)不同細(xì)胞而異,一般加樣體積不宜過大,細(xì)胞濃度也不可過高,否則會影響細(xì)胞的分離和回收。

4. 離心:一般采用離心力為400g,時間20~25min。由于多層Percoll之間密度差別不大,因此離心機加速、降速時要慢,要平穩(wěn)。

5. 取樣:當(dāng)所要分離的細(xì)胞絕大部分在兩層的界面時,可逐層去除Percoll液后收集界面部位的細(xì)胞;有時大部分細(xì)胞位于Percoll層中,則需要逐層收集。收獲含有Percoll液的細(xì)胞經(jīng)2次洗滌后可供培養(yǎng)或檢測用。

(三)分離純化細(xì)胞舉例

1. 富含NK活性大顆粒淋巴細(xì)胞(LGL)的純化:按順序由下向上逐層加50%、47.5%、45%、42.5%和40%五種不同密度的 Percoll,如用10ml試管(或塑料管)分離,每層Percoll約1.2~1.5ml,初步從外周血中分離的PBMC細(xì)胞1×108懸于1ml培 基中,按要求裝樣、離心和取樣。一般富含NK殺傷活性的LGL細(xì)胞位于42.5%與45%Percoll界面以及上下二層的Percoll液中。

2. 純化淋巴母細(xì)胞和除去死細(xì)胞:分別疊加50%和30%Percoll液。收取經(jīng)PHA(或其它抗原、有絲分裂原)刺激PBMC,或含有較高比例異 型的PBMC(如腎綜合征出血熱患者),按要求裝樣、離心和取樣。位于管底的淋巴細(xì)胞為小淋巴細(xì)胞;兩層Percoll之間為淋巴母細(xì)胞,純度和回收率在 80%以上,位于30%Percoll表面是死細(xì)胞。收獲淋巴母細(xì)胞可進(jìn)行表型、結(jié)構(gòu)以及功能的研究。
 

會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標(biāo)簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標(biāo)簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復(fù)您~
撥打電話
在線留言
黄色av手机在线观看| 裸体午夜一级视频| 尤物网三级在线观看| 日韩高清精品一区有码在线| 啊啊啊操我视频大全| 久久久精品日韩一区二区三区| 熟妇女人妻丰满中文字幕| 天天日天天干天天天天操| 精品的极品美女一区二区三区| 八插8插黄色视频| 日本公共厕所mmm撒尿| 国产熟女50岁一区二区| 丁香婷婷亚洲六月综合色| 国产青青操骚货在线观看| 日韩视频在线网页| 澳门一区二区免费下线观看| 日韩伦理视频一区二区三区| 亚洲午夜国产片在线观看| 中国熟女色av夜夜嗨| 强奸啪啪啪好大欧美| 插我舔内射18免费视频| 非洲男生操男生屁眼视频| 娇嫩的被两根粗大的np| 欧美人与兽大屌肛交爆菊| 国产一区二区三区免费观在线| 午夜理论理论亚洲激情| 国产一级a不收费| 日韩欧美人妻综合| 国产欧美一区二区精品久久久| 美女日逼视频免费| 加勒比在线不卡一区二区观看| 插女人下面高潮视频| 欧美日韩欧美国产中文字幕| 国产精品你懂的在线资源| 操俄罗斯美女bb| 成年女人永久看片视频 | 男生用鸡巴操女生的视频| 欧美综合区自拍亚洲综合| 美女麻豆颜色光屁股眼子| 日本人色频在线看观| 中文字幕乱码一区二区三区麻豆|