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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>科研細(xì)胞>>原代細(xì)胞>> 大鼠卵巢顆粒細(xì)胞
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更新時(shí)間:2024-07-25 16:29:35瀏覽次數(shù):457次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 環(huán)保在線規(guī)格 | 5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 組織來源 | 卵巢組織 |
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貨號(hào) | CS-X2879 | 細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
細(xì)胞保存方法:
(一)細(xì)胞凍存
1. 配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液;
2. 取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,去除舊培養(yǎng)液,用PBS清洗。
3. 去除PBS,加入適量(覆蓋培養(yǎng)皿表面)把單層生長(zhǎng)的細(xì)胞消化下來;
4. 離心1000rpm,5min;
5. 去除,加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,計(jì)數(shù),調(diào)節(jié)凍存液中細(xì)胞的最終密度為5×106/ml~1×107/ml;
6. 將細(xì)胞分裝入凍存管中,每管1~1.5 ml;
7. 在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱,凍存時(shí)間及操作者;
8. 凍存:標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序?yàn)榻禍厮俾?1~-2℃/ min;當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí),可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時(shí),則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細(xì)胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ,然后放入-70℃冰箱中過夜,取出凍存管,移入液氮容器內(nèi)。
產(chǎn)品信息:
貨號(hào) | CS-X2879 | 組織來源 | 卵巢組織 |
傳代特性 | 可傳1-2代 | 培養(yǎng)基 | 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
培養(yǎng)條件 | 換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
商品介紹:
產(chǎn)品名稱:大鼠卵巢顆粒細(xì)胞 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介: 大鼠卵巢顆粒細(xì)胞分離自卵巢組織;卵巢是雌性動(dòng)物的生殖器官,卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類固醇激素。卵巢的位置與睪丸相同,僅左側(cè)發(fā)育(右側(cè)已退化),呈葡萄狀,均為處于不同發(fā)育時(shí)期的卵泡,卵泡呈黃色,卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產(chǎn)卵期有關(guān)。大多數(shù)脊椎動(dòng)物有兩個(gè)卵巢,但是部分魚類的兩個(gè)卵巢融合為單個(gè)結(jié)構(gòu),而所有鳥類只有左側(cè)卵巢有機(jī)能。卵巢是位于子宮兩側(cè)的一對(duì)卵圓形的生殖器官,它的外表有一層上皮組織,其下方有薄層的結(jié)締組織。卵巢的內(nèi)部結(jié)構(gòu)可分為皮質(zhì)和髓質(zhì)。皮質(zhì)位于卵巢的周圍部分,主要由卵泡和結(jié)締組織構(gòu)成;髓質(zhì)位于中央,由疏松結(jié)締組織構(gòu)成,其中有許多血管、淋巴管和神經(jīng)。卵巢顆粒細(xì)胞是卵巢的主要功能細(xì)胞,其增殖與分化直接影響著卵泡的生長(zhǎng)啟動(dòng)、發(fā)育、排卵、黃體形成以及甾體激素分泌等卵巢功能活動(dòng)。卵巢顆粒細(xì)胞是卵泡內(nèi)的最大細(xì)胞群,也是主要的功能細(xì)胞,卵泡發(fā)育的顯著標(biāo)志之一就是顆粒細(xì)胞迅速生長(zhǎng)及增殖,而成年動(dòng)物的卵泡閉鎖主要是由顆粒細(xì)胞凋亡引起,尤其在卵泡發(fā)育后期,此外,顆粒細(xì)胞還與卵泡膜細(xì)胞共同完成卵巢激素的合成,維持著有利于卵母細(xì)胞生長(zhǎng)和成熟的微環(huán)境。細(xì)胞形狀呈圓形或橢圓形。 5.方法簡(jiǎn)介: 公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠卵巢顆粒細(xì)胞采用先機(jī)械分離,而后膠原酶消化,最后差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測(cè): 公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠卵巢顆粒細(xì)胞經(jīng)FSHR免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 包被條件 PLL(0.1mg/ml) 培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性 貼壁 細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣 傳代特性 可傳1-2代 消化液 0.25%yi蛋白酶 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% |
操作步驟:
1)、冷凍前24-48小時(shí)更換半量或全量培養(yǎng)基,使細(xì)胞處于指數(shù)生長(zhǎng)期。
2)、配制冷凍保存溶液(使用前配制):另取一離心管,加入培養(yǎng)基、血清,逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度,即制成雙倍的凍存液,置于室溫下待用。
3)、離心收集培養(yǎng)之細(xì)胞,用加血清的培養(yǎng)基重懸起細(xì)胞,取少量細(xì)胞懸浮液(約0. 1 ml)計(jì)數(shù)細(xì)胞濃度及凍前存活率。
4)、取與細(xì)胞懸液等量的凍存液,緩慢逐滴加入細(xì)胞懸液,并晃動(dòng)試管,制成細(xì)胞凍存懸液(DMSO后濃度為5~10%),使細(xì)胞濃度為1~5×106cells/ ml,混合均勻,分裝于已標(biāo)示之冷凍保存管中,1~2 ml/vial,并取少量細(xì)胞懸浮液作污染檢測(cè)。嚴(yán)密封口后,注明細(xì)胞名稱、代數(shù)、日期。然后進(jìn)行凍存。
注意事項(xiàng):
1)、欲冷凍保存之細(xì)胞應(yīng)在生長(zhǎng)良好且存活率高之狀態(tài),約為80~90%致密度。冷凍前檢測(cè)細(xì)胞是否仍保有其性質(zhì),應(yīng)在冷凍保存前一至二日測(cè)試是否有抗體之產(chǎn)生。
2)、細(xì)胞在液氮中可長(zhǎng)期凍存無,而不會(huì)影響細(xì)胞活力;在-70度可保存數(shù)月。
3)、注意冷凍保護(hù)劑之品質(zhì)。DMSO應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí),無菌且無色(以0. 22micron FGLP Telflon過濾或是直接購買無菌產(chǎn)品,如Sigma D-2650),以5~10 ml小體積分裝,4 ℃避光保存,勿作多次解凍。Glycerol亦應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí),以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用,因長(zhǎng)期儲(chǔ)存后對(duì)細(xì)胞會(huì)有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液,可避免DMSO直接加入時(shí)釋放的熱量對(duì)細(xì)胞的損傷。緩慢逐滴加入細(xì)胞懸液是使細(xì)胞逐步適應(yīng)高滲,可降低細(xì)胞受損。DMSO可能引起部分白血病細(xì)胞株的分化,可換用10%甘油凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人腎小球系膜細(xì)胞 | 人可溶性CD80(sCD80)試劑盒ELISA |
大鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞 | 人氧化低密度脂蛋白(OxLDL)試劑盒ELISA |
大鼠卵巢顆粒細(xì)胞 | 人抗磷脂??贵w(IgA)ELISA檢測(cè)試劑盒 |
大鼠腦膜成纖維細(xì)胞 | 人11去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)試劑盒 ELISA |
大鼠胚胎成纖維細(xì)胞 | 新生隱球菌PCR試劑盒 |
大鼠氣管平滑肌細(xì)胞 | 萊氏泰勒蟲PCR試劑盒 |
大鼠軟骨細(xì)胞 | 班氏絲蟲PCR檢測(cè)試劑盒 |
大鼠腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 | 斯氏普羅威登斯菌PCR檢測(cè)試劑盒 |
大鼠食管平滑肌細(xì)胞 | 即FAV-A)雞包涵體肝炎病毒病毒PCR試劑盒 |
大鼠胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞 | 肉孢子蟲通用PCR試劑盒 |
大鼠下頜骨成纖維細(xì)胞 | 石膏樣小孢子菌PCR試劑盒 |
大鼠嗅球細(xì)胞 | 加州立克次體PCR試劑盒 |
大鼠心肌成纖維細(xì)胞 | 大鼠卵巢顆粒細(xì)胞棘盤瑞氏絳蟲PCR檢測(cè)試劑盒 |
大鼠羊膜間質(zhì)細(xì)胞 | 圣保羅沙門氏菌PCR檢測(cè)試劑盒 |
大鼠陰道平滑肌細(xì)胞 | 阪崎腸桿菌rpsU-dnaG 基因熒光PCR檢測(cè)試劑盒間序列(探針法) |
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