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貨號	CS-X3165	規(guī)格	5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶
生長特性	貼壁	組織來源	腦組織

細胞保存方法：

（一）細胞凍存

1. 配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液；

2. 取對數(shù)生長期的細胞，去除舊培養(yǎng)液，用PBS清洗。

3. 去除PBS，加入適量（覆蓋培養(yǎng)皿表面）把單層生長的細胞消化下來；

4. 離心1000rpm，5min；

5. 去除，加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，計數(shù)，調(diào)節(jié)凍存液中細胞的最終密度為5×106/ml～1×107/ml；

6. 將細胞分裝入凍存管中，每管1～1.5 ml；

7. 在凍存管上標明細胞的名稱，凍存時間及操作者；

8. 凍存：標準的凍存程序為降溫速率-1～-2℃/ min；當溫度達-25℃以下時，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃時，則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ，然后放入-70℃冰箱中過夜，取出凍存管，移入液氮容器內(nèi)。

產(chǎn)品信息：

貨號	CS-X3165	組織來源	腦組織
傳代特性	可傳3代左右	培養(yǎng)基	含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
細胞形態(tài)	梭形、多角形	生長特性	貼壁
培養(yǎng)條件	氣相：空氣，95%；CO2，5%	換液頻率	每2-3天換液一次

商品介紹：

產(chǎn)品名稱：小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞
2.組織來源：腦組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介：

小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞分離自腦組織；大腦分左右兩個半球，大腦皮質(zhì)（灰質(zhì)）覆蓋著每個大腦半球的大部分，它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。每一個半球都有三個面，即外側(cè)面（約占整個皮質(zhì)面積的1/3）、內(nèi)側(cè)面和底面（占2/3的面積）；半球表面有很多深淺不等的溝或裂，溝或裂之間的隆起叫回，它們大大增加了大腦的表面積；大腦外側(cè)面重要的溝、裂有大腦外側(cè)裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔，使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞，是哺乳動物腦內(nèi)分布廣泛的一類細胞，也是膠質(zhì)細胞中體積大的一種。用經(jīng)典的金屬浸鍍技術(shù)（銀染色）顯示此類膠質(zhì)細胞呈星形，從胞體發(fā)出許多長而分支的突起，伸展充填在神經(jīng)細胞的胞體及其突起之間，起支持和分隔神經(jīng)細胞的作用。細胞突起的末端常膨大形成腳板或稱終足，有些腳板貼附在鄰近的毛細血管壁上，因此這些腳板又被稱為血管足或血管周足，靠近腦脊髓表面的腳板則附著在軟膜內(nèi)表面，彼此連接構(gòu)成膠質(zhì)界膜。細胞剛分離時呈圓形，24h后大部分細胞貼壁，均勻分布于瓶底，部分細胞伸出細小突起，培養(yǎng)4-5d后細胞數(shù)量明顯增多，呈扁平、多角形，胞質(zhì)豐富且核漿較少，細胞核呈橢圓形，偏于胞體一側(cè)。神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞是中樞神經(jīng)系統(tǒng)的重要細胞組成，不僅具有支持功能，還能夠合成及分泌多種神經(jīng)活性物質(zhì)，在維持神經(jīng)元內(nèi)外環(huán)境、生存、遷移、免疫調(diào)節(jié)、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、軸突生長及功能整合等方面具有重要作用。

5.方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞采用酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞經(jīng)GFAP免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性可傳3代左右

消化液 0.25%yi蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞

操作步驟：

1）、冷凍前24-48小時更換半量或全量培養(yǎng)基，使細胞處于指數(shù)生長期。

2）、配制冷凍保存溶液(使用前配制)：另取一離心管，加入培養(yǎng)基、血清，逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度，即制成雙倍的凍存液，置于室溫下待用。

3）、離心收集培養(yǎng)之細胞，用加血清的培養(yǎng)基重懸起細胞，取少量細胞懸浮液(約0. 1 ml)計數(shù)細胞濃度及凍前存活率。

4）、取與細胞懸液等量的凍存液，緩慢逐滴加入細胞懸液，并晃動試管，制成細胞凍存懸液(DMSO后濃度為5～10%)，使細胞濃度為1～5×106cells/ ml，混合均勻，分裝于已標示之冷凍保存管中，1～2 ml/vial，并取少量細胞懸浮液作污染檢測。嚴密封口后，注明細胞名稱、代數(shù)、日期。然后進行凍存。

注意事項：

1）、欲冷凍保存之細胞應(yīng)在生長良好且存活率高之狀態(tài)，約為80～90%致密度。冷凍前檢測細胞是否仍保有其性質(zhì)，應(yīng)在冷凍保存前一至二日測試是否有抗體之產(chǎn)生。

2）、細胞在液氮中可長期凍存無，而不會影響細胞活力;在-70度可保存數(shù)月。

3）、注意冷凍保護劑之品質(zhì)。DMSO應(yīng)為試劑級等級，無菌且無色(以0. 22micron FGLP Telflon過濾或是直接購買無菌產(chǎn)品，如Sigma D-2650)，以5～10 ml小體積分裝，4 ℃避光保存，勿作多次解凍。Glycerol亦應(yīng)為試劑級等級，以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用，因長期儲存后對細胞會有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液，可避免DMSO直接加入時釋放的熱量對細胞的損傷。緩慢逐滴加入細胞懸液是使細胞逐步適應(yīng)高滲，可降低細胞受損。DMSO可能引起部分白血病細胞株的分化，可換用10%甘油凍存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

人外周血樹突狀細胞(DC細胞)	人胱抑suF(CST7)檢測試劑盒
小鼠腎小球系膜細胞	人β2微球蛋白(BMG/β2-MG)檢測試劑盒
小鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞	人肺炎支原體抗體(MP-Ab)試劑盒ELISA
小鼠外周血中性粒細胞	人N-甲基-D-天冬氨suan受體(NMDAR)檢測試劑盒
小鼠小腸隱窩上皮細胞	羊血吸蟲PCR試劑盒
小鼠上皮細胞	川牛膝染料法PCR鑒定試劑盒
小鼠羊膜間質(zhì)細胞	彎曲桿菌S rRNA基因熒光PCR檢測試劑盒(探針法)
小鼠真皮成纖維細胞	黃熱病病毒PCR檢測試劑盒
小鼠主動脈內(nèi)皮細胞	裂谷熱病毒RT-PCR試劑盒
小鼠子宮平滑肌細胞	犬流感病毒H3N2型PCR試劑盒
豬主動脈內(nèi)皮細胞	犬副流感病毒PCR檢測試劑盒
4647 (長尾綠猴腎細胞)	流行性出血熱漢坦病毒PCR檢測試劑盒
293FT (人胚腎細胞)	小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞鏈狀帶絳蟲PCR試劑盒
A-204 [A204] (人橫紋肌肉瘤細胞)	禽致病性大腸桿菌1血清型PCR試劑盒
A9 (小鼠皮下結(jié)締組織細胞)	乙型肝炎病毒PCR檢測試劑盒