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更新時(shí)間:2024-07-25 16:11:17瀏覽次數(shù):848次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 環(huán)保在線規(guī)格 | 5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 組織來(lái)源 | 肝臟組織 |
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貨號(hào) | CS-X2864 | 細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 |
產(chǎn)品信息:
貨號(hào) | CS-X2864 | 組織來(lái)源 | 肝臟組織 |
傳代特性 | 可傳3代左右 | 培養(yǎng)基 | 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
培養(yǎng)條件 | 氣相:空氣,95%;CO2,5% | 換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
商品介紹:
產(chǎn)品名稱(chēng):人肝星狀細(xì)胞 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介: 人肝星形細(xì)胞分離自肝臟組織;肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個(gè)器官,并在身體里面起著去氧化、儲(chǔ)存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用;肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機(jī)體內(nèi)臟里最大的器官,位于機(jī)體中的腹部位置,在右側(cè)橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機(jī)體消化系統(tǒng)中最大的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機(jī)體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu):肝臟位于右上腹,隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面,大部分肝為肋弓所復(fù)蓋,僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,肝上面則與膈及腹前壁相接。肝星形細(xì)胞(HSC)又名肝貯脂細(xì)胞、貯存細(xì)胞、竇周細(xì)胞、Ito細(xì)胞等,是肝臟細(xì)胞外基質(zhì)的主要來(lái)源。HSC在激活后可進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為肌成纖維細(xì)胞樣細(xì)胞,各種可導(dǎo)致肝纖維化的因素均將HSC作為最終靶細(xì)胞。正常情況下,HSC處于靜止?fàn)顟B(tài),當(dāng)肝臟發(fā)生炎癥反應(yīng)或受到機(jī)械刺激等損傷時(shí),HSC的表型由靜止型轉(zhuǎn)變?yōu)榧せ钚?,激活的HSC可通過(guò)增生和分泌細(xì)胞外基質(zhì)參與肝纖維化的形成及肝內(nèi)結(jié)構(gòu)的重建,此過(guò)程也是肝纖維化的中心環(huán)節(jié)。肝星形細(xì)胞分布于肝臟的Disse間隙內(nèi),是合成、分泌細(xì)胞外基質(zhì)的主要來(lái)源,在肝纖維化的發(fā)生中處于最重要地位。肝星形細(xì)胞是肝臟的間充質(zhì)細(xì)胞,約占肝臟細(xì)胞總數(shù)的8%-13%。作為肝臟合成細(xì)胞外基質(zhì)的主要細(xì)胞群,肝星形細(xì)胞不僅能分泌蛋白多糖、糖蛋白等細(xì)胞外基質(zhì)成分,合成一定量的膠原酶以維持正常的基底膜結(jié)構(gòu),還能通過(guò)其突起的收縮參與肝竇的微循環(huán)調(diào)節(jié)。此外,肝星形細(xì)胞能通過(guò)合成肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子、胰島素樣生長(zhǎng)因子、表皮生長(zhǎng)因子等促進(jìn)肝細(xì)胞增殖和肝再生。 5.方法簡(jiǎn)介: 公司實(shí)驗(yàn)室分離的人肝星形細(xì)胞采用混合酶灌流消化、低速離心、密度梯度離心制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測(cè): 公司實(shí)驗(yàn)室分離的人肝星狀細(xì)胞經(jīng)α-SMA、Desmin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性 貼壁 細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣 傳代特性 可傳3代左右 消化液 0.25%yi蛋白酶 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% |
細(xì)胞保存方法:
(一)細(xì)胞凍存
1. 配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液;
2. 取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,去除舊培養(yǎng)液,用PBS清洗。
3. 去除PBS,加入適量(覆蓋培養(yǎng)皿表面)把單層生長(zhǎng)的細(xì)胞消化下來(lái);
4. 離心1000rpm,5min;
5. 去除,加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,計(jì)數(shù),調(diào)節(jié)凍存液中細(xì)胞的最終密度為5×106/ml~1×107/ml;
6. 將細(xì)胞分裝入凍存管中,每管1~1.5 ml;
7. 在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱(chēng),凍存時(shí)間及操作者;
8. 凍存:標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序?yàn)榻禍厮俾?1~-2℃/ min;當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí),可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時(shí),則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細(xì)胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ,然后放入-70℃冰箱中過(guò)夜,取出凍存管,移入液氮容器內(nèi)。
注意事項(xiàng):
1)、欲冷凍保存之細(xì)胞應(yīng)在生長(zhǎng)良好且存活率高之狀態(tài),約為80~90%致密度。冷凍前檢測(cè)細(xì)胞是否仍保有其性質(zhì),應(yīng)在冷凍保存前一至二日測(cè)試是否有抗體之產(chǎn)生。
2)、細(xì)胞在液氮中可長(zhǎng)期凍存無(wú),而不會(huì)影響細(xì)胞活力;在-70度可保存數(shù)月。
3)、注意冷凍保護(hù)劑之品質(zhì)。DMSO應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí),無(wú)菌且無(wú)色(以0. 22micron FGLP Telflon過(guò)濾或是直接購(gòu)買(mǎi)無(wú)菌產(chǎn)品,如Sigma D-2650),以5~10 ml小體積分裝,4 ℃避光保存,勿作多次解凍。Glycerol亦應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí),以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開(kāi)啟后一年內(nèi)使用,因長(zhǎng)期儲(chǔ)存后對(duì)細(xì)胞會(huì)有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液,可避免DMSO直接加入時(shí)釋放的熱量對(duì)細(xì)胞的損傷。緩慢逐滴加入細(xì)胞懸液是使細(xì)胞逐步適應(yīng)高滲,可降低細(xì)胞受損。DMSO可能引起部分白血病細(xì)胞株的分化,可換用10%甘油凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 | 人賴(lài)氨suan特異性脫甲基mei5A(JARID1A)檢測(cè)試劑盒 |
293H (人胚腎細(xì)胞) | 人Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)試劑盒elisa |
4T1 (小鼠乳腺癌細(xì)胞) | 人抗內(nèi)因子抗體(IgG)檢測(cè)試劑盒 |
A2058 (人皮膚癌細(xì)胞) | 雞轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGF-β2)試劑盒ELISA |
AAV-293 (人胚腎細(xì)胞) | 哈扎拉病毒RT-PCR試劑盒 |
AN3 CA (人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞) | 沙眼衣原體PCR試劑盒 |
B16-F10 (小鼠皮膚黑色素瘤細(xì)胞) | 河流弧菌PCR檢測(cè)試劑盒 |
Bcap-37 (人乳腺癌細(xì)胞) | 黑色普雷沃菌PCR檢測(cè)試劑盒 |
BGC-823 (人胃腺癌細(xì)胞(低分化)) | 雞血藤探針?lè)?/span>PCR鑒定試劑盒 |
BT-474 [BT474] (人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞) | 肉毒梭狀芽孢桿菌G型外毒su基因PCR試劑盒 |
C6 (大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞) | 嗜熱鏈球菌PCR檢測(cè)試劑盒 |
CCD-18Co (人結(jié)腸組織細(xì)胞) | 擠奶工結(jié)節(jié)病毒PCR檢測(cè)試劑盒 |
Caki-2 (人乳頭狀腎細(xì)胞癌細(xì)胞) | 人肝星狀細(xì)胞雞源性成分PCR試劑盒 |
CNE (人鼻咽癌細(xì)胞) | 嗜肺軍團(tuán)菌PCR檢測(cè)試劑盒 |
CRT (人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞) | 小腸結(jié)腸炎耶爾森菌PCR檢測(cè)試劑盒 |
操作步驟:
1)、冷凍前24-48小時(shí)更換半量或全量培養(yǎng)基,使細(xì)胞處于指數(shù)生長(zhǎng)期。
2)、配制冷凍保存溶液(使用前配制):另取一離心管,加入培養(yǎng)基、血清,逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度,即制成雙倍的凍存液,置于室溫下待用。
3)、離心收集培養(yǎng)之細(xì)胞,用加血清的培養(yǎng)基重懸起細(xì)胞,取少量細(xì)胞懸浮液(約0. 1 ml)計(jì)數(shù)細(xì)胞濃度及凍前存活率。
4)、取與細(xì)胞懸液等量的凍存液,緩慢逐滴加入細(xì)胞懸液,并晃動(dòng)試管,制成細(xì)胞凍存懸液(DMSO后濃度為5~10%),使細(xì)胞濃度為1~5×106cells/ ml,混合均勻,分裝于已標(biāo)示之冷凍保存管中,1~2 ml/vial,并取少量細(xì)胞懸浮液作污染檢測(cè)。嚴(yán)密封口后,注明細(xì)胞名稱(chēng)、代數(shù)、日期。然后進(jìn)行凍存。
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