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規(guī)格	5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶	組織來(lái)源	眼球
貨號(hào)	CS-X3060	細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣

產(chǎn)品信息：

貨號(hào)	CS-X3060	組織來(lái)源	眼球
傳代特性	可傳1-2代	培養(yǎng)基	含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣	生長(zhǎng)特性	貼壁
培養(yǎng)條件		換液頻率	每2-3天換液一次

小鼠虹膜色素上皮細(xì)胞

商品介紹：

產(chǎn)品名稱(chēng)：小鼠虹膜色素上皮細(xì)胞
2.組織來(lái)源：眼球

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介：

小鼠虹膜色素上皮細(xì)胞分離自眼球虹膜組織；虹膜是眼睛構(gòu)造的一部分，屬于眼球中層，位于血管膜的前部；在睫狀體前方虹膜，中心有一圓形開(kāi)口，稱(chēng)為瞳孔，猶如相機(jī)當(dāng)中可調(diào)整大小的光圈，內(nèi)含色素決定眼睛的顏色。日間光線(xiàn)較為強(qiáng)烈時(shí)，虹膜會(huì)收蹜，只使一小束光線(xiàn)穿透瞳孔，進(jìn)入眼睛；當(dāng)進(jìn)入黑暗環(huán)境中，虹膜就會(huì)往后退縮，使瞳孔變大，讓更多的光線(xiàn)進(jìn)入眼睛，多數(shù)的脊椎動(dòng)物的眼睛都有虹膜。虹膜色素上皮細(xì)胞（IPE）是虹膜重要結(jié)構(gòu)組成細(xì)胞之一，位于虹膜組織的后面，和視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞（RPE）同樣起源于神經(jīng)外胚葉層，可能具有相似的生物學(xué)功能，因此對(duì)IPE的研究將為防治因RPE結(jié)構(gòu)或功能異常而導(dǎo)致的眼底病提供新思路。

5.方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠虹膜色素上皮細(xì)胞采用yi蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過(guò)上皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠虹膜色素上皮細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

包被條件鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性可傳1-2代

消化液 0.25%yi蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

細(xì)胞保存方法：

（一）細(xì)胞凍存

1. 配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液；

2. 取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，去除舊培養(yǎng)液，用PBS清洗。

3. 去除PBS，加入適量（覆蓋培養(yǎng)皿表面）把單層生長(zhǎng)的細(xì)胞消化下來(lái)；

4. 離心1000rpm，5min；

5. 去除，加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，計(jì)數(shù)，調(diào)節(jié)凍存液中細(xì)胞的最終密度為5×106/ml～1×107/ml；

6. 將細(xì)胞分裝入凍存管中，每管1～1.5 ml；

7. 在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱(chēng)，凍存時(shí)間及操作者；

8. 凍存：標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序?yàn)榻禍厮俾?1～-2℃/ min；當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí)，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃時(shí)，則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細(xì)胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ，然后放入-70℃冰箱中過(guò)夜，取出凍存管，移入液氮容器內(nèi)。

小鼠虹膜色素上皮細(xì)胞

注意事項(xiàng)：

1）、欲冷凍保存之細(xì)胞應(yīng)在生長(zhǎng)良好且存活率高之狀態(tài)，約為80～90%致密度。冷凍前檢測(cè)細(xì)胞是否仍保有其性質(zhì)，應(yīng)在冷凍保存前一至二日測(cè)試是否有抗體之產(chǎn)生。

2）、細(xì)胞在液氮中可長(zhǎng)期凍存無(wú)，而不會(huì)影響細(xì)胞活力;在-70度可保存數(shù)月。

3）、注意冷凍保護(hù)劑之品質(zhì)。DMSO應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí)，無(wú)菌且無(wú)色(以0. 22micron FGLP Telflon過(guò)濾或是直接購(gòu)買(mǎi)無(wú)菌產(chǎn)品，如Sigma D-2650)，以5～10 ml小體積分裝，4 ℃避光保存，勿作多次解凍。Glycerol亦應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí)，以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開(kāi)啟后一年內(nèi)使用，因長(zhǎng)期儲(chǔ)存后對(duì)細(xì)胞會(huì)有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液，可避免DMSO直接加入時(shí)釋放的熱量對(duì)細(xì)胞的損傷。緩慢逐滴加入細(xì)胞懸液是使細(xì)胞逐步適應(yīng)高滲，可降低細(xì)胞受損。DMSO可能引起部分白血病細(xì)胞株的分化，可換用10%甘油凍存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞	人精氨suan(Arg)ELISA檢測(cè)試劑盒
大鼠骨髓單個(gè)核細(xì)胞	人胎盤(pán)堿性磷suanmei(PLAP)檢測(cè)試劑盒
大鼠冠狀動(dòng)脈成纖維細(xì)胞	人含SET域4(setd4)檢測(cè)試劑盒
大鼠呼吸道上皮細(xì)胞	人c-sis 檢測(cè)試劑盒
大鼠脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞	擬枝孢鐮刀菌PCR試劑盒
大鼠頸動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞	雷丸染料法PCR鑒定試劑盒
大鼠脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞	綿羊肺腺瘤病毒PCR檢測(cè)試劑盒
大鼠腦微血管周細(xì)胞	美洲四棱線(xiàn)蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒
大鼠胚胎肢芽間充質(zhì)干細(xì)胞	科恩酒曲菌PCR試劑盒
大鼠前列腺成纖維細(xì)胞	人免疫缺陷病毒1型M群A型RT-PCR試劑盒
大鼠三叉神經(jīng)元細(xì)胞	人皰疹病毒PCR檢測(cè)試劑盒
大鼠視網(wǎng)膜Muller細(xì)胞	潰蝕齒密螺旋體PCR檢測(cè)試劑盒
大鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞	小鼠虹膜色素上皮細(xì)胞口蹄疫病毒通用RT-PCR試劑盒
大鼠外周血單個(gè)核細(xì)胞	人類(lèi)嗜淋巴細(xì)胞病毒2型前病毒PCR試劑盒
大鼠小腸Cajal間質(zhì)細(xì)胞	牛錐蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒

操作步驟：

1）、冷凍前24-48小時(shí)更換半量或全量培養(yǎng)基，使細(xì)胞處于指數(shù)生長(zhǎng)期。

2）、配制冷凍保存溶液(使用前配制)：另取一離心管，加入培養(yǎng)基、血清，逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度，即制成雙倍的凍存液，置于室溫下待用。

3）、離心收集培養(yǎng)之細(xì)胞，用加血清的培養(yǎng)基重懸起細(xì)胞，取少量細(xì)胞懸浮液(約0. 1 ml)計(jì)數(shù)細(xì)胞濃度及凍前存活率。

4）、取與細(xì)胞懸液等量的凍存液，緩慢逐滴加入細(xì)胞懸液，并晃動(dòng)試管，制成細(xì)胞凍存懸液(DMSO后濃度為5～10%)，使細(xì)胞濃度為1～5×106cells/ ml，混合均勻，分裝于已標(biāo)示之冷凍保存管中，1～2 ml/vial，并取少量細(xì)胞懸浮液作污染檢測(cè)。嚴(yán)密封口后，注明細(xì)胞名稱(chēng)、代數(shù)、日期。然后進(jìn)行凍存。