氨基糖類(lèi)（amino sugar）總量摩根-艾爾森（MORGAN-ELSON）比色法定量

檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)

主要用途

氨基糖類(lèi)（amino sugar）總量摩根-艾爾森（MORGAN-ELSON）比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)堿性加熱處理后，產(chǎn)生顯色素，與歐立希試劑反應(yīng)，生成紫紅色產(chǎn)物，即采用比色法測(cè)算氨基糖類(lèi)總量的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心改良摩根-艾爾森（MORGAN-ELSON）方法、成功實(shí)驗(yàn)證明的。適用于各種細(xì)胞、組織裂解懸液和各種體液樣品中氨基糖類(lèi)總量的檢測(cè)。產(chǎn)品即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，檢測(cè)敏感。

技術(shù)背景

氨基糖類(lèi)（amino sugar）是一類(lèi)含有氨基替代羥基的糖，目前發(fā)現(xiàn)有60多種，例如氨基葡萄糖（glucosamine）、氨基半乳糖（galactosamine），以及衍生物乙?；被咸烟牵╝cetylglucosamine）、唾液酸（sialic acid），和抗菌化合物氨基糖苷（aminoglycoside）等。氨基糖類(lèi)是地球上zui古老和zui豐富的有機(jī)化合物之一。其中氨基葡萄糖是糖基化蛋白生物合成的前體，甲殼綱動(dòng)物（crustacean）體外骨骼和真菌細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)成分。自然存在于動(dòng)物骨組織、骨髓、真菌細(xì)胞壁和貝類(lèi)動(dòng)物殼上。作為食物補(bǔ)充劑，有助于關(guān)節(jié)的結(jié)構(gòu)和功能，尤其是骨關(guān)節(jié)炎（osteoarthritis）患者。氨基半乳糖是糖蛋白類(lèi)激素，例如卵泡刺激素（follicle stimulating hormone；FSH）、促黃體激素（luteinizing hormone；LH）的成分，具有肝毒性。在堿性條件下，通過(guò)加熱處理，形成顯色素（chromogen），進(jìn)而與歐立希試劑（Ehrlich’s reagent），即酸性對(duì)二甲基氨基苯甲醛（N,N-dimethyl p-aminobenzaldehyde）反應(yīng)，產(chǎn)生紫紅色復(fù)合物，在分光光度儀（530nm 波長(zhǎng)）下出現(xiàn)吸光峰值的變化，來(lái)定量測(cè)定樣品中氨基糖類(lèi)量的總含量。 

產(chǎn)品內(nèi)容

堿性液（Reagent A）     毫升

反應(yīng)液（Reagent B）     毫升

標(biāo)準(zhǔn)液（Reagent C）     微升

產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)     1份

保存方式

保存在4℃冰箱里；試劑具有腐蝕性，注意操作安全；有效保證3月

用戶自備

1.5毫升離心管：用于標(biāo)準(zhǔn)樣品配制和反應(yīng)的容器

15毫升錐形離心管：用于樣品反應(yīng)操作的容器

沸水裝置：用于反應(yīng)孵育

比色皿：用于比色的容器

分光光度儀：用于比色分析

實(shí)驗(yàn)步驟

一、標(biāo)準(zhǔn)樣品配制

• 準(zhǔn)備好4個(gè)1.5毫升離心管，標(biāo)記為1至5號(hào)管
• 分別加入xx微升堿性液（Reagent A）到每個(gè)離心管
• 移取xx微升標(biāo)準(zhǔn)液（Reagent C）到1號(hào)管，混勻
• 小心移取xx微升1號(hào)管稀釋的標(biāo)準(zhǔn)液（Reagent C）到2號(hào)管，混勻
• 小心移取xx微升2號(hào)管稀釋的標(biāo)準(zhǔn)液（Reagent C）到3號(hào)管，混勻
• 將1至4號(hào)管放進(jìn)冰槽里備用，避免光照；標(biāo)準(zhǔn)管濃度見(jiàn)下表

• 樣品測(cè)定

• 設(shè)定好分光光度儀：波長(zhǎng)530nm，并置零
• 分別移取xx毫升堿性液（Reagent A）到15毫升離心管
• 分別加入20微升上述制備的標(biāo)準(zhǔn)樣品或待測(cè)樣品，混勻
• 沸水煮沸1小時(shí)
• 分別加入xx毫升反應(yīng)液（Reagent B），混勻
• 室溫下冷卻10分鐘，避免光照
• 轉(zhuǎn)移到新的比色皿
• 即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè)（530nm波長(zhǎng)）：獲得吸光讀數(shù)
• 構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線：縱座標(biāo)（Y軸）為吸光讀數(shù)；橫座標(biāo)（X軸）為標(biāo)準(zhǔn)氨基葡萄糖含量（微克）
• 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品對(duì)應(yīng)氨基葡萄糖含量（微克）
• 計(jì)算樣品實(shí)際氨基糖類(lèi)濃度（微克/毫升） 

注意事項(xiàng)

• 本產(chǎn)品為25次操作，包括標(biāo)準(zhǔn)液
• 本產(chǎn)品檢測(cè)范圍為5至20微克糖類(lèi)總量
• 操作時(shí)，須戴手套
• 試劑具有腐蝕性，注意操作安全
• 孵育時(shí)，避免光照
• 如果待測(cè)樣品濃度過(guò)高或過(guò)低，可以稀釋樣品用量；注意在計(jì)算實(shí)際濃度時(shí)，不要忘記稀釋倍數(shù)調(diào)整
• 糖類(lèi)總量表述方式：微克氨基糖/毫升；微克氨基糖/細(xì)胞量；微克氨基糖/總蛋白量
• 本公司提供系列糖類(lèi)檢測(cè)試劑產(chǎn)品

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

• 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
• 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測(cè)敏感