亚洲国产精品二区久久,日本美女后入式午夜视频在线观看,国产污视频在线观看,欧美日韩国产精品中文字幕在线观看

上海宸功生物技術(shù)有限公司
中級會員 | 第10年

18918128223

通用型細菌鑒定16S rDNA PCR擴增檢測試劑盒

時間:2017/1/18閱讀:1675
分享:

通用型細菌鑒定16S rDNA PCR擴增檢測試劑盒

產(chǎn)品說明書
主要用途
通用型細菌鑒定16S rDNA PCR擴增檢測試劑是一種旨在根據(jù)保守性序列設(shè)計引物,針對微生物樣本DNA進行PCR擴增,進一步測序后借助分析工具予以同源比較,由可變序列識別和分類微生物樣品的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學家精心研制、成功實驗證明的??梢员挥糜诟鞣N微生物的鑒定、歸類、建樹等系統(tǒng)微生物學的研究。產(chǎn)品即到即用,性能穩(wěn)定,操作簡便,擴增效率顯著。
技術(shù)背景
16SrRNA作為非培養(yǎng)依賴性標記的分子指模(fingerprinting)技術(shù),有別于傳統(tǒng)的選擇性培養(yǎng)技術(shù),用于研究微生物的分類學(phylogenetics)。核糖體RNA(ribosome RNA)存在于所有微生物體內(nèi),且結(jié)構(gòu)與功能進化保留;容易分離和識別;其一級和二級結(jié)構(gòu)具有高度進化保守區(qū)域(conserved region)和物種特異性可變區(qū)域(variable region);其基因序列變異非常緩慢,且不會發(fā)生平行基因轉(zhuǎn)移(horizontal gene transfer)。其包括5S、16S、23S。5S信息量不夠充分;23S不穩(wěn)定;而微生物16SrRNA基因較為穩(wěn)定,初級結(jié)構(gòu)含有1500個堿基。通過引物設(shè)計,擴增產(chǎn)物測序,數(shù)據(jù)庫對照,鑒定微生物的類別或建立新的微生物在進化樹上的位置。
產(chǎn)品內(nèi)容
擴增液(Reagent A) 微升
引物液(Reagent B) 微升
補充液(Reagent C) 毫升
測序引物A(Reagent D) 微升
測序引物B(Reagent E) 微升
產(chǎn)品說明書 1份
保存方式
保存在-20℃冰箱里;有效保證6月
用戶自備
PCR級礦物油:用于封隔反應(yīng)液
PCR儀:用于樣品擴增
PCR管或平板:用于PCR反應(yīng)的容器
瓊脂糖凝膠電泳:用于擴增后電泳分析
實驗步驟
實驗開始前,從-20℃冰箱中取出試劑,放進冰槽里融化。然后進行下列操作: 
1. 針對一個樣本,每次移出 15 微升 擴增液(Reagent A)到 PCR 管
2. 加入 1 微升用戶自備的的待測 DNA 樣品(總量 100 納克)
3. 微升 引物液(Reagent B)
4. 再加入 微升 補充液(Reagent C)(反應(yīng)總量為 25 微升)
5. 即刻放進微型臺式離心機瞬時離心 5秒,速度為500g(或2000RPM;例如 eppendorf 5415)
6. (選擇步驟)加入 50微升用戶自備的 PCR 級礦物油(注意:參見注意事項 13)
7. 即刻進行熱啟動 PCR 反應(yīng):
溫度(℃)時間  循環(huán)
95       2分鐘   1
95       1分鐘   30
45       1分鐘   30
70       1分鐘   30
70       5分鐘    1
8. 反應(yīng)完畢后,移取5微升進行1.0%瓊脂糖凝膠電泳:產(chǎn)物為1.5kb左右
9. 如果繼續(xù)測序鑒定,膠回收PCR產(chǎn)物(建議使用)
10.分別移出2微升用戶自備的測序反應(yīng)液到2個不同的新的1.5毫升離心管
11.加入1微升測序引物A(Reagent D)到其中一個1.5毫升離心管,作好標記
12.加入1微升測序引物B(Reagent E)到另一個1.5毫升離心管,作好標記
13.進行后續(xù)的測序反應(yīng)
注意事項
1. 本產(chǎn)品為20次操作
2. 操作時,須戴手套
3. 建議使用帶濾芯的槍頭,避免污染
4. 在-20℃冰箱里儲存的產(chǎn)品避免反復(fù)凍融
5. 建議樣品為純培養(yǎng)微生物的DNA;DNA提取應(yīng)確保高純度
6. 可以使用菌落直接檢測:用無菌槍頭點觸
7. 如果沒有擴增條帶,可以直接測序,或詢問特殊引物設(shè)計服務(wù)
8. 可以直接使用純化的基因組DNA進行測序
9. 可以將擴增產(chǎn)物純化后,克隆到質(zhì)粒中,然后進行測序
10.測序引物A(Reagent D)為上游引物,可以獲得500至1500的序列;引物序列為:
5-CAGCAGCCGCGGTAATAC3
11.測序引物B(Reagent E)為下游引物,可以獲得0至500的序列;引物序列為:
5-GTATTACCGCGGCTGCTG-3
12.測序建議優(yōu)先使用測序引物B(Reagent E),其可變區(qū)域較為特征
13.根據(jù)用戶PCR儀的性能,決定是否加入礦物油(Mineral Oil)
14.建議使用軟件測算Tm溫度;參考公式為Tm=4(G+C)+2(A+T)
15.本公司提供16SrDNA特異性引物設(shè)計服務(wù)
16.測序后,序列分析和微生物分類分析工具參考如下:
1)樣品序列與數(shù)據(jù)庫已知微生物序列的比對(BLAST) 2
高質(zhì)純化膠回收試劑盒
http://www.ncbi.nlm.nih.gov
2)樣品序列的分類學分析前的預(yù)編輯
http://iubio.bio.indiana.edu/soft/molbio/docs/biosoft-free.html
3)樣品的進化樹的確立
http://evolution.genetics.washington.edu/phylip.html
http://www.lms.si.edu/PAUP
4)16SrRNA 數(shù)據(jù)庫
http://www.mikro.biologie.tu-muenchen.de
17.本公司提供系列細菌 16S rDNA 擴增檢測試劑產(chǎn)品
質(zhì)量標準
1. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
2. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定無核酶污染
3. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測準確

會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復(fù)您~
撥打電話
在線留言
日本亚洲欧洲一区二区| 男人把昆吧放女人屁股里| 精品一区二区av天堂色偷偷| 男人吃奶大鸡巴操逼视频| 国内不卡的中文字幕一区| 大几吧插进小穴视频| 国产 推油 性爱| 女人张开腿让男人捅个爽| 国产欧美一区二区精品久久久| 人妻含泪让粗大挺进| 美性中文网中文字幕91| 美女让我插她的骚逼| 色熟妇人妻久久中文字幕| 日韩欧美人妻综合| 一个色综合色综合色综合| 美女日逼视频免费| 日韩久久中文字幕| 国产又粗又猛又色又免费| 欧美一级淫片免费播放口| 狠狠干无码日韩AV| 97人妻精品一区二区三区视频| 国产一级第一级毛片| 91kaobi视频在线| 日本亚洲欧洲一区二区| 日韩精品一区av在线| 欧美国产三级片久久高清| 男人大鸡巴操小鲜肉视频| 中文有码无码人妻在线看| 国产一区二区三区免费观在线| 欧美国产三级片久久高清| 日本公共厕所mmm撒尿| 精品免费久久久久久久久| 日本不卡高清视频在线播放| 91精品国产剧情欧美一区二区| 骚逼被狂插视频教程| 鸡巴插骚逼视频欧美风格| 国产a一级毛片午夜剧院| 喜欢被粗大阴茎插入| 欧美日韩欧美国产中文字幕| 日本韩国国产精品一区| 三级片手机在线视频|