Alkaline Phosphatase Stain Solution (Coupling azo-dye Method) 堿性磷酸酶染色液（偶氮偶聯(lián)法）

產(chǎn)品信息

【溫馨提示】：見(jiàn)我司懋康生物整理的堿性磷酸酶（Alkaline phosphatase，ALP，AKP）產(chǎn)品專(zhuān)題。

【溫馨提示】：見(jiàn)我司懋康生物整理的堿性磷酸酶活性檢測(cè)試劑盒（定量檢測(cè)）產(chǎn)品專(zhuān)題。

【溫馨提示】：見(jiàn)我司懋康生物整理的堿性磷酸酶染色檢測(cè)試劑盒（定性，干細(xì)胞檢測(cè)）產(chǎn)品專(zhuān)題。

產(chǎn)品描述

堿性磷酸酶（Alkaline phosphatase，ALP，AKP或AP）是一類(lèi)磷酸酯酶，堿性條件下能夠?qū)⒑塑账帷⒌鞍?、甾醇等分子去磷酸化，廣泛分布于哺乳動(dòng)物組織內(nèi)。ALP主要存在于物質(zhì)交換活躍處（細(xì)胞膜），如腸上皮和腎近曲小管的刷狀緣、附睪上皮之靜纖毛、肝的毛細(xì)膽管膜以及微動(dòng)脈和毛細(xì)血管動(dòng)脈部之內(nèi)皮。還發(fā)現(xiàn)于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基復(fù)合體、吞飲小泡、腸上皮之溶酶體、中性粒細(xì)胞之中性顆粒以及平滑肌之細(xì)胞膜及吞飲小泡。

本堿性磷酸酶染色液（偶氮偶聯(lián)法）（Alkaline Phosphatase Stain Solution (Coupling azo-dye Mehod)）利用的是偶氮偶聯(lián)法來(lái)定性檢測(cè)磷酸酶活性。工作原理是在pH 9.2-9.8的堿性條件下，細(xì)胞內(nèi)ALP可使AB-BI磷酸鹽水解，釋放出磷酸與萘酚，后者與偶聯(lián)重氮鹽生成有色產(chǎn)物，定位于細(xì)胞質(zhì)中。該染液可用于血液、骨髓或細(xì)胞涂片、冰凍切片、石蠟切片等的ALP染色，ALP陽(yáng)性反應(yīng)部位呈藍(lán)色，位于胞漿，染色結(jié)果比金屬鹽沉淀法相對(duì)可靠些。

產(chǎn)品組成

注意事項(xiàng)

1. 血液、骨髓細(xì)胞涂片或其他樣本均應(yīng)新鮮，薄厚適宜，及時(shí)固定，否則會(huì)影響酶的活性。
2. 培養(yǎng)細(xì)胞染色操作過(guò)程中，清洗、染色等步驟都應(yīng)輕微，以免損傷或丟失細(xì)胞。
3. 培養(yǎng)細(xì)胞或爬片細(xì)胞不建議采用ALP固定液，此ALP固定液適用于血液或骨髓細(xì)胞涂片的固定。
4. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

操作步驟

• ALP染色液的準(zhǔn)備

臨用前，取適量的AS-BI染色液（B1）和FBB染色液（B2）按照1：1比例混合，即得到ALP染色液，現(xiàn)配現(xiàn)用。

• 涂片或切片染色
• 貼壁細(xì)胞染色

2.1 取6孔板或其他容器培養(yǎng)的細(xì)胞，棄培養(yǎng)液，PBS清洗細(xì)胞。

2.2 加入4%多聚甲醛固定10-20min，PBS清洗細(xì)胞。

2.3 滴加新鮮配制的ALP染色液，放入濕盒，避光孵育15-20min，PBS清洗。

2.4 入核固紅染色液復(fù)染30s~3min。

1. PBS清洗、鏡檢。

三、染色結(jié)果

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 — —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

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